郭玲慧，王 煒，蔣 露，任偉宏＊＊，賀 嬌，郭夢(mèng)琦

（1. 河南中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院 鄭州 450000；2. 河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 鄭州 450000）

外泌體中包含功能蛋白、mRNA、微小RNA（microRNA，miRNA）等多種具有生物活性的物質(zhì)，且外泌體的膜結(jié)構(gòu)上存在多種抗原和抗體分子，能產(chǎn)生多種生物學(xué)效應(yīng)[1]。然而，細(xì)胞外囊泡（Extracellular vesicles,EVs）物種的異質(zhì)性和非特異性、分離技術(shù)的多樣性以及外泌體與其他囊泡在密度、大小、成分上的重合性，都使其難以確定分離到的囊泡是否為外泌體，這一問(wèn)題的解決取決于外泌體標(biāo)志物的篩選[2]。如經(jīng)典的外泌體標(biāo)志物有CD9、CD63、CD81 等，這些蛋白質(zhì)主要定位于外泌體膜上[3]。除此之外，隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)外泌體膜蛋白在外泌體生物合成、分泌及細(xì)胞與細(xì)胞間通訊等方面發(fā)揮重要作用，而攝取過(guò)程與外泌體膜蛋白與受體細(xì)胞相互作用有關(guān)[3，4]?，F(xiàn)已有研究[2]表明，利用外泌體包裝天然藥物，提高天然藥物在體內(nèi)的生物利用度，并賦予天然藥物的靶向性，而這些作用與外泌體膜蛋白密切相關(guān)。因此，需要對(duì)外泌體膜蛋白的種類(lèi)及功能進(jìn)行深入研究，提高外泌體在臨床的應(yīng)用價(jià)值。

1 外泌體簡(jiǎn)介

EVs是多種細(xì)胞主動(dòng)向胞外分泌的脂質(zhì)雙層膜囊泡，根據(jù)其大小、生物學(xué)特征及形成過(guò)程，可分為外泌體、微泡和凋亡小體等[5]。外泌體是多泡小體（Multivesicular bodies, MVBs）與細(xì)胞膜融合后釋放的管腔內(nèi)囊泡（Intraluminal vesicles，ILVs），其直徑為30-150 nm，在電鏡下呈杯狀結(jié)構(gòu)[6]。外泌體起源于內(nèi)體系統(tǒng)，細(xì)胞質(zhì)膜向內(nèi)凹陷形成初級(jí)內(nèi)吞囊泡，多個(gè)初級(jí)內(nèi)吞囊泡融合形成早期內(nèi)體（Early endosomes，EEs），通過(guò)網(wǎng)格蛋白或小孔蛋白依賴(lài)或獨(dú)立的途徑包裹細(xì)胞內(nèi)容物形成多個(gè)ILVs，進(jìn)一步形成晚期內(nèi)體（Late endosomes，LEs），也稱(chēng) MVBs。然后，Rab27A 和Rab27B將MVBs引向細(xì)胞膜，在可溶性N-乙基馬來(lái)酰亞胺敏感因子附著蛋白（SolubleN-ethylmaleimidesensitive factor attachment proteins，SNARE）的協(xié)助下促進(jìn)MVBs與質(zhì)膜融合，將ILVs釋放到細(xì)胞外，即為外泌體[7]。

外泌體的內(nèi)體起源也反映在其蛋白質(zhì)組成中，包括凋亡連接相關(guān)基因2 相互作用蛋白X（Apoptosislinked gene 2-interacting protein X，Alix）、CD63 和腫瘤易感基因101 蛋白質(zhì)（Tumour susceptibility gene 101，TSG101）。所有的外泌體均含有參與轉(zhuǎn)運(yùn)和融合的蛋白質(zhì)（如Rab GTP 酶、Annexins 等）。其內(nèi)容物中細(xì)胞骨架蛋白、黏附因子和四跨膜蛋白家族蛋白（如四跨膜蛋白CD63、CD81和CD82）也很豐富。

外泌體的內(nèi)容物不僅表明了供體細(xì)胞的組成，而且反映了一種調(diào)節(jié)的分選機(jī)制。外泌體的膜表面及內(nèi)部包括各種蛋白質(zhì)（如受體、轉(zhuǎn)錄因子和細(xì)胞外基質(zhì)蛋白等）、脂質(zhì)和核酸，如mRNA、miRNA 和長(zhǎng)鏈非編碼RNA（Long non-coding RNA，lncRNA）。對(duì)外泌體蛋白質(zhì)的組成分析發(fā)現(xiàn)，某些蛋白質(zhì)起源于特定的細(xì)胞和組織，而某些蛋白質(zhì)在外泌體中普遍存在。例如，B 淋巴細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞（Dendritic cells，DCs）分泌的外泌體攜帶主要組織相容性復(fù)合物（Major histocompatibility complex，MHC）I 類(lèi)和II 類(lèi)蛋白，活化T 細(xì)胞的外泌體含有可誘導(dǎo)T 細(xì)胞凋亡的生物活性Fas 配體，一些腫瘤細(xì)胞分泌的外泌體攜帶與腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移相關(guān)的黏附分子、金屬蛋白酶和組織特異性蛋白[8]。而一系列融合和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（如Rab2、Rab7、Flotillion和Annexin）、熱休克蛋白（如HSP70和HSP90）、細(xì)胞骨架蛋白（包括肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白、微管蛋白）以及介導(dǎo)MVBs 形成的Alix 等蛋白質(zhì)屬于外泌體的非特異性蛋白質(zhì)[7]。

外泌體可介導(dǎo)細(xì)胞間通訊，其將內(nèi)含的多種物質(zhì)，傳遞給受體細(xì)胞，引起受體細(xì)胞的表型和功能發(fā)生變化。如腫瘤細(xì)胞分泌的外泌體裝載有多種內(nèi)容物，將其轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，導(dǎo)致受體細(xì)胞的表型改變，從而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展[9]。近年來(lái)，外泌體作為納米級(jí)囊泡裝載藥物用于疾病的靶向治療也成為研究熱點(diǎn)。有研究[10]表明，外泌體包裹姜黃素，可用于腦部疾病的治療，并且能夠提高姜黃素的生物利用度；姜黃素封裝于外泌體遞送，能夠治療炎性疾病，且無(wú)明顯副作用。而外泌體遞送功能的完成與膜蛋白有關(guān)。

2 外泌體膜蛋白分類(lèi)

圖1 外泌體蛋白質(zhì)分類(lèi)

圖2 外泌體膜蛋白來(lái)源

圖3 Gene ontology(Biological process)分類(lèi)

前期外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)的研究為認(rèn)識(shí)外泌體膜蛋白的種類(lèi)奠定了基礎(chǔ)，本文將蛋白質(zhì)組學(xué)研究數(shù)據(jù)[11-15]進(jìn)行匯總。將目前已知的外泌體蛋白質(zhì)進(jìn)行整理，根據(jù)Uniprot 數(shù)據(jù)庫(kù)（https://www.uniprot.org/）的注釋?zhuān)疚膶?duì)1858種存在于外泌體中的蛋白質(zhì)進(jìn)行分類(lèi)（圖1），外泌體中的蛋白質(zhì)79.28%屬于膜蛋白和胞質(zhì)蛋白，且外泌體特有的蛋白質(zhì)占總蛋白質(zhì)的比例僅為0.22%。對(duì)622種外泌體膜蛋白進(jìn)一步分析其來(lái)源（圖2），可知外泌體膜蛋白多來(lái)源于細(xì)胞膜蛋白和細(xì)胞器膜蛋白（如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體等）。此外，對(duì)這些外泌體上的膜蛋白進(jìn)行生物學(xué)過(guò)程（Biological process）進(jìn)行分類(lèi)（圖3），得出外泌體膜蛋白常見(jiàn)的四種功能，其中參與轉(zhuǎn)運(yùn)功能的膜蛋白占42%、參與信號(hào)傳導(dǎo)的膜蛋白占18%、參與抗原處理與呈遞的膜蛋白占15%、參與胞吞與胞吐的膜蛋白占15%。由此可知外泌體膜蛋白最重要的功能是協(xié)助外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)其內(nèi)容物，其次是將信號(hào)傳導(dǎo)至受體細(xì)胞，引起受體細(xì)胞的生理或病理的變化，其還參與免疫過(guò)程以及胞吞作用釋放外泌體和受體細(xì)胞內(nèi)化外泌體。

3 外泌體膜蛋白功能

3.1 轉(zhuǎn)運(yùn)功能

外泌體的轉(zhuǎn)運(yùn)功能是指外泌體可將其裝載的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸等生物活性分子轉(zhuǎn)運(yùn)至受體細(xì)胞。外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)其內(nèi)容物的功能已被證實(shí)，但參與協(xié)助完成該轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程的外泌體膜蛋白尚不明確[16，17]。目前認(rèn)為，外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)功能與受體細(xì)胞攝取過(guò)程密切相關(guān)。

外泌體經(jīng)典標(biāo)志物CD9，位于外泌體膜上，參與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、粘附和融合[18]。因此推測(cè)CD9 可能介導(dǎo)受體細(xì)胞攝取外泌體，參與轉(zhuǎn)運(yùn)外泌體的內(nèi)容物至受體細(xì)胞。此外，外泌體膜上的縫隙連接蛋白（Connexins,Cxs）可在外泌體膜和細(xì)胞膜之間形成六聚體半通道，將外泌體內(nèi)的小分子物質(zhì)（＜1 kDa，例如第二信使、離子和代謝物等）遞送到受體細(xì)胞[19，20]。

受體細(xì)胞在外泌體膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的作用下攝取外泌體，導(dǎo)致受體細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸水平發(fā)生變化，進(jìn)而使受體細(xì)胞的功能發(fā)生變化。例如，人原代角質(zhì)形成細(xì)胞攝取來(lái)源于大皰性類(lèi)天皰瘡患者水皰液的外泌體后，外泌體誘導(dǎo)人原代角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生關(guān)鍵的炎性細(xì)胞因子和趨化因子，促進(jìn)大皰性類(lèi)天皰瘡相關(guān)的皮膚局部自體炎癥反應(yīng)[21]。外泌體還可通過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)其內(nèi)容物對(duì)病原體感染和抗感染的雙向調(diào)節(jié)作用[22，23]。在免疫突觸形成的過(guò)程中，CD63+外泌體將miRNA 從T 細(xì)胞單向轉(zhuǎn)移至抗原呈遞細(xì)胞（Antigen-presenting cells，APC），導(dǎo)致受體細(xì)胞中的基因表達(dá)發(fā)生變化[23]。盡管許多外泌體膜蛋白都可以在轉(zhuǎn)運(yùn)功能中發(fā)揮重要作用，但是具體的調(diào)節(jié)機(jī)制仍需進(jìn)一步的探索。

3.2 信號(hào)傳導(dǎo)

外泌體膜蛋白除在外泌體內(nèi)容物轉(zhuǎn)運(yùn)至受體細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞中發(fā)揮作用外，外泌體膜蛋白還可與受體細(xì)胞表面的受體蛋白相互作用，作為細(xì)胞外信號(hào)刺激物質(zhì)，引起受體細(xì)胞一系列的變化，即信號(hào)傳導(dǎo)功能。盡管已有文獻(xiàn)[24-26]表明，外泌體參與細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)，但是其對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑的影響尚未完全闡明。

已有研究[27，28]發(fā)現(xiàn)外泌體膜蛋白可激活細(xì)胞內(nèi)通路，影響受體細(xì)胞功能。例如，外泌體膜蛋白cAMP 1直接活化交換蛋白1（Exchange protein directly activated by cAMP 1，EPAC 1）通過(guò)磷酸二酯酶3B（phosphodies‐terase type-3B,PDE3B）與Rap 鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子3（Rap guanine nucleotide exchange factor 3，RAPGEF3）和磷酸肌醇-3 調(diào)節(jié)亞基6（Phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit，PIK3R6）結(jié)合，將 PDE3B 組裝在一個(gè)信號(hào)復(fù)合體中，在這個(gè)信號(hào)復(fù)合體激活PI3Kγ復(fù)合體，參與血管生成，EPAC 1 也可通過(guò)獨(dú)立于Rho 介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，在調(diào)節(jié)cAMP 誘導(dǎo)的內(nèi)皮屏障功能的動(dòng)態(tài)控制中起作用。外泌體膜蛋白黏蛋白-1（Mucin-1，MUC1）β亞基含有羧基末端結(jié)構(gòu)域，其通過(guò)磷酸化和蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)，可調(diào)節(jié)ERK（Extracelluar regulated protein kinases，ERK）、SRC 和NF-κB（Nuclear factor-kappa B，NF-κB）途徑中的信號(hào)傳導(dǎo)，且在活化的T 細(xì)胞中，其可直接或間接影響Ras/MAPK 途徑（https://www.uniprot.org/uniprot/P15941）。

MVBs 形成期間的蛋白質(zhì)組成是外泌體分選中的關(guān)鍵分子，外泌體從宿主細(xì)胞釋放，外泌體上的信號(hào)配體與受體細(xì)胞上的受體相互作用，誘導(dǎo)下游信號(hào)級(jí)聯(lián)，這一過(guò)程在癌癥的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用。胰腺導(dǎo)管腺癌（Pancreatic ductal adenocarcinoma，PDAC）衍生的外泌體在Kuppffer 細(xì)胞中誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factorβ，TGF-β）信號(hào)傳導(dǎo)，導(dǎo)致肝星狀細(xì)胞（Hepatic stellate cells，hStCs）的活化和細(xì)胞外基質(zhì)重塑[29]，但激活TGF-β信號(hào)的外泌體膜蛋白仍需進(jìn)一步探究。

3.3 抗原的處理和呈遞

外泌體通過(guò)抗原呈遞作用參與到免疫調(diào)節(jié)，并且在不同的生理或病理?xiàng)l件下，會(huì)產(chǎn)生促進(jìn)或抑制免疫應(yīng)答的作用。外泌體膜中含有的共刺激分子，參與MHC Ⅰ類(lèi)和Ⅱ類(lèi)途徑的抗原呈遞，激活免疫系統(tǒng)[26]。例如，DCs分泌的外泌體膜表面含有MHC Ⅰ類(lèi)和Ⅱ類(lèi)分子，可以呈遞腫瘤抗原[30]；APC 分泌的外泌體膜上含有抗原呈遞肽-MHC Ⅰ類(lèi)復(fù)合物，與CD8+T細(xì)胞結(jié)合，激活T 細(xì)胞的增殖和分化，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答[23]。Burrello 等[31]研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞和干細(xì)胞分泌的外泌體可攜帶免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)物（如轉(zhuǎn)錄因子、非編碼RNA和細(xì)胞因子）抑制機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。

此外，還有多種定位于外泌體膜上的蛋白質(zhì)參與對(duì)抗原的處理和呈遞。例如，組織相容性抗原Ⅰ類(lèi)（HLA Ⅰ）、整合素αv和β5可通過(guò)MHC Ⅰ類(lèi)參與抗原的處理呈遞[32]。HLA Ⅱ類(lèi) DMα和β鏈可結(jié)合MHC Ⅱ類(lèi)蛋白，并且可通過(guò)MHC Ⅱ類(lèi)參與外源性抗原的處理和呈遞。銜接子相關(guān)蛋白質(zhì)復(fù)合物-2（adaptorrelated protein complex-2，AP-2）的多種亞基也可通過(guò)MHC Ⅱ類(lèi)參與外源性抗原的處理與呈遞。這些研究表明外泌體膜蛋白在抗原的處理和呈遞中發(fā)揮重要作用。

外泌體除了參與抗原的處理和呈遞外，還可充當(dāng)維持人體穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)劑。由于外泌體可以充當(dāng)不同免疫細(xì)胞之間的信使這一事實(shí)，因此探究外泌體在免疫系統(tǒng)中的作用尤其重要。例如，來(lái)自間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal stem cell，MSC）的外泌體可激活 Toll 樣受體的信號(hào)傳導(dǎo)，增強(qiáng)白細(xì)胞介素-10（IL-10）表達(dá)，減弱炎癥的程度[23]。轉(zhuǎn)移性黑色素瘤可釋放表面攜帶程序性死亡配體1（Programmed death ligand 1，PD-L1）的外泌體，含有上調(diào)表達(dá)PD-L1 的外泌體，可抑制CD8+T 細(xì)胞的功能，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)[33]?？傊瑢?duì)外泌體膜蛋白的深入研究，有利于更好地了解外泌體在機(jī)體免疫系統(tǒng)中發(fā)揮的作用，以便更好地調(diào)控免疫系統(tǒng)。

3.4 胞吐和胞吞

囊泡的胞吐作用是調(diào)節(jié)許多生物事件的基本細(xì)胞過(guò)程，例如神經(jīng)遞質(zhì)、激素和細(xì)胞因子的釋放以及蛋白質(zhì)和脂質(zhì)向質(zhì)膜的遞送，用于細(xì)胞修復(fù)、生長(zhǎng)、遷移和細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)[34]。胞吞作用即指細(xì)胞膜接觸大分子或顆粒狀物質(zhì)后，伸出偽足包圍抗原形成小泡并吞入細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，又稱(chēng)內(nèi)化。外泌體作為囊泡的一種，其分泌和攝取與胞吐和胞吞過(guò)程緊密聯(lián)系。

MVBs 與質(zhì)膜的融合，是外泌體釋放到胞外環(huán)境的必要環(huán)節(jié)。目前已知參與胞吐釋放外泌體的38 種膜蛋白。Rab GTP 酶在外泌體產(chǎn)生中起重要作用，它們調(diào)節(jié)內(nèi)體在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸（MVBs 起源）以及將囊泡運(yùn)輸?shù)劫|(zhì)膜并隨后從細(xì)胞中釋放[35-37]。此外，外泌體膜蛋白CD9 與胞吐作用產(chǎn)生外泌體密切相關(guān)，其能夠促進(jìn)外泌體的產(chǎn)生和釋放[38-39]。

外泌體釋放到細(xì)胞外環(huán)境后，隨著血液循環(huán)，最終與配體結(jié)合，以?xún)?nèi)化等方式進(jìn)入受體細(xì)胞。較小的外泌體可通過(guò)網(wǎng)格蛋白（Clathrin）介導(dǎo)的胞吞作用被受體細(xì)胞攝取，而較大的外泌體則采用其他的內(nèi)化過(guò)程，如大胞飲和吞噬作用。在外泌體膜蛋白中，參與內(nèi)吞作用的55種膜蛋白，其中參與網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用的外泌體膜蛋白有9 種。AP-2 是一種網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)胞吞作用的貨物適配器，可幫助網(wǎng)格蛋白在質(zhì)膜上積聚，AP-2 與結(jié)合RNA 的泛素 E3 連接酶（RNA-binding ubiquitin E3 ligase，MEX3C）相互作用引起網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的胞吞作用[40]；網(wǎng)格蛋白輕鏈A（Clathrin light chain A，CLTA）和網(wǎng)格蛋白輕鏈B（Clathrin light chain B，CLTB）是包被內(nèi)陷小窩和囊泡復(fù)合物的主要蛋白質(zhì)組分，其可引起網(wǎng)格蛋白的積聚和包被小泡的形成，使外泌體被受體細(xì)胞攝?。╤ttps://www.uniprot.org/uniprot/P09496,https://www.uniprot.org/uniprot/P09497）。此外，作為吞噬標(biāo)志物的CD47 蛋白和溶酶體相關(guān)膜蛋白-1（Lysosome-associated membrane glycoprotein 1，LAMP1）都定位于外泌體的膜蛋白，表明外泌體可通過(guò)吞噬作用被受體細(xì)胞攝取。

3.5 其他

外泌體膜蛋白除上述功能外，還參與細(xì)胞間黏附以及細(xì)胞間連接，例如橋粒芯蛋白1（Desmoglein-1，DSG 1）可參與細(xì)胞間連接的組裝及通過(guò)質(zhì)膜細(xì)胞黏附分子參與調(diào)節(jié)鈣依賴(lài)的細(xì)胞間黏附作用[32,41]。CD9、CD47、CD166 和鈣粘蛋白等可參與細(xì)胞間黏附，而這些蛋白質(zhì)也定位于外泌體膜蛋白，推測(cè)其可能參與外泌體與受體細(xì)胞的黏附，使外泌體被受體細(xì)胞攝取。

此外，Kinsley 等[9]研究表明，源自骨髓或不同類(lèi)型的癌細(xì)胞分泌的EVs 在動(dòng)物模型中的特定器官中積聚。例如，骨髓細(xì)胞產(chǎn)生的EVs 在腎臟中積聚，促進(jìn)損傷修復(fù)。然而，源自癌癥的EVs 促進(jìn)多種器官的轉(zhuǎn)移，如來(lái)自黑色素瘤細(xì)胞分泌的EVs 優(yōu)先在骨、肝、脾和肺中積聚，來(lái)自乳腺癌細(xì)胞分泌的EVs 優(yōu)先在肝和肺中積聚，而來(lái)自胰腺癌細(xì)胞分泌的EVs 優(yōu)先積聚在肝臟。外泌體作為EVs 中的一種，可推測(cè)其也可根據(jù)來(lái)源不同而靶向不同的組織。這種特異性識(shí)別大部分是由于外泌體膜上具有不同的蛋白質(zhì)。同時(shí)，Lyden等研究表明[9,42]，表達(dá)整合素α6β4的外泌體優(yōu)先分布到肺部，表達(dá)整合素αvβ5的外泌體則優(yōu)先分布到肝臟，敲除整合素α6β4和αvβ5的腫瘤細(xì)胞分泌的外泌體無(wú)法靶向到特定組織。因此，外泌體膜蛋白整合素具有靶向外泌體到特定受體細(xì)胞和組織的功能。有研究[43]報(bào)道，經(jīng)過(guò)基因工程的改造，將吞噬過(guò)程中的關(guān)鍵蛋白CD47 表達(dá)至正常成纖維細(xì)胞樣的間充質(zhì)細(xì)胞，使其分泌的外泌體表達(dá)和攜帶的CD47 蛋白增多，能有效增強(qiáng)外泌體的靶向性。

總之，外泌體膜蛋白可介導(dǎo)外泌體與細(xì)胞的黏附及靶向功能，從而調(diào)節(jié)外泌體被受體細(xì)胞攝取的過(guò)程，引起受體細(xì)胞發(fā)生生理或病理的變化。

4 小結(jié)與展望

受體細(xì)胞識(shí)別、結(jié)合并攝取外泌體，從而將外泌體的內(nèi)容物轉(zhuǎn)運(yùn)至受體細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮功能，這一過(guò)程與外泌體膜蛋白和受體細(xì)胞膜蛋白相互作用密切相關(guān)，但如何調(diào)控外泌體發(fā)揮生物學(xué)作用尚不十分清楚。外泌體膜上存在的四跨膜蛋白（如CD9、CD63 等）、整合素、黏蛋白等，使外泌體可以被受體細(xì)胞攝?。煌瑫r(shí)，外泌體膜上也存在多種MHC Ⅰ類(lèi)和Ⅱ類(lèi)組織相容性抗原，參與對(duì)抗原的處理和呈遞。此外，外泌體膜上還存在許多功能尚不完全確定的膜蛋白，仍需深入研究。

雖然根據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù)的篩查結(jié)果，外泌體膜蛋白可以來(lái)源于高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體等細(xì)胞器，但是也有文獻(xiàn)報(bào)道外泌體膜蛋白通常不來(lái)源于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體等細(xì)胞器，這可能是由于現(xiàn)有的外泌體分離技術(shù)難以得到純度較高的外泌體。因此，嚴(yán)格意義上，現(xiàn)有技術(shù)分離到的囊泡只能稱(chēng)為小細(xì)胞外囊泡。為獲得純度較高的外泌體，需盡可能多地發(fā)現(xiàn)外泌體特異性標(biāo)志物，并不斷改進(jìn)現(xiàn)有的分離技術(shù)。

外泌體裝載藥物用于靶向治療是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。天然藥物分子量較大，滲透性較差，在人體內(nèi)的生物利用度較低。例如，姜黃素在治療癌癥、阿爾茨海默病以及炎癥方面都有良好的效果，但是由于其快速的新陳代謝和消除作用，無(wú)論給藥途徑如何，其在血清和組織中的含量均較低，且在水中的低溶解度會(huì)降低其在靶細(xì)胞內(nèi)的有效作用[44]。目前的研究[45]證實(shí)，將藥物封裝于外泌體，外泌體可保護(hù)其內(nèi)容物不被其他物質(zhì)降解而提高其利用度。研究人員發(fā)現(xiàn)姜黃素封裝于外泌體內(nèi)，可提高其在血液中的濃度，使其具有更高的溶解度和穩(wěn)定性。此外姜黃素刺激細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體具有恢復(fù)連接蛋白和內(nèi)皮細(xì)胞通透性的潛力[44]。

盡管人們對(duì)于外泌體膜蛋白的成分、種類(lèi)及其在外泌體功能中的作用有了一定的了解，但是其在生理和病理?xiàng)l件下的復(fù)雜作用尚不完全清楚，需繼續(xù)探索，因此，進(jìn)一步了解外泌體膜蛋白的精確生理功能對(duì)于確定其在機(jī)體生理和病理?xiàng)l件下的調(diào)節(jié)作用具有重大意義。