肖 強 馬 麗 吳 佳 馮佳玲 潘陶強

研究[1]顯示，有性生活的女性人乳頭瘤病毒(HPV)感染率發(fā)病率可高達70%～80%。HPV感染是引發(fā)宮頸病變的重要誘因之一，而宮頸病變經(jīng)過漫長的過程可發(fā)展至宮頸癌，對女性健康甚至生命造成嚴重危害[2]。目前早期宮頸癌不易通過篩查確診，導(dǎo)致治療時機延誤，患者預(yù)后多不佳。因此，了解宮頸癌發(fā)病危險因素，對高危人群進行有目的的篩查，有利于做到早發(fā)現(xiàn)、早確診、早治療。近些年，女性陰道微生態(tài)在婦科疾病發(fā)生、發(fā)展中的作用逐漸成為研究熱點，有研究[3]指出，多種婦科疾病是由陰道微生態(tài)平衡狀態(tài)被打破引起的。本研究主要探討陰道微生態(tài)變化與HPV感染及宮頸病變的關(guān)系，旨在為宮頸疾病的篩查、治療提供參考?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2018年12月我院接受宮頸病變篩查的女性90例，年齡21～60歲，平均(44.3±6.2)歲；孕次0～6次，平均(3.5±1.1)次；產(chǎn)次0～4次，平均(2.3±0.9)次。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～60歲，有性生活史者；取樣前72 h無陰道灌洗、上藥；取樣前48 h無性生活者；取樣前1個月內(nèi)未接受抗菌藥物治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠、哺乳期女性；就診時陰道有不規(guī)律出血者；月經(jīng)期者；伴有免疫系統(tǒng)或內(nèi)分泌疾病者；精神病者等。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 取膀胱截石位，暴露受檢者宮頸口，采用2支無菌棉拭子自陰道側(cè)壁上1/3取適量分泌物放入特定試管中，送檢。使用2支專用宮頸刷分別在受檢者宮頸鱗柱交界處刷取5～10圈，將刷頭分別置于保存液中，送檢。

1.2.2 陰道微生態(tài)檢測 1支棉拭子采用鹽水玻片法在光鏡下檢查是否有炎癥及滴蟲，使用精密試紙測定陰道pH；第2支棉拭子涂片、革蘭染色，檢測陰道微生態(tài)菌群，并在顯微鏡下觀察是否有念珠菌病原體。

陰道微生態(tài)判定標(biāo)準(zhǔn)：從陰道pH、陰道微生態(tài)菌群、滴蟲感染、炎癥、念珠菌感染及細菌性陰道病進行判定：陰道pH正常范圍為3.8～4.5，否則為異常；陰道微生態(tài)菌群主要包含乳桿菌、加得納菌及大腸埃希菌等，檢測結(jié)果分為正常和異常；滴蟲感染及炎癥分為陰性和陽性；念珠菌感染及細菌性陰道病均分為陰性、弱陽性和陽性，弱陽性和陽性歸為一組。

1.2.3 宮頸液基細胞學(xué)檢測 采用液基薄層細胞學(xué)(TCT)法行宮頸液基細胞學(xué)檢測，按TBS分類法進行診斷，分為未見上皮內(nèi)病變或惡性細胞(NILM)、不典型鱗狀細胞(ASC)兩類，ASC又包括無明確診斷意義的不典型鱗狀細胞(ASCUS)、不能除外高級別鱗狀上皮內(nèi)病變不典型鱗狀細胞(ASC-H)、低/高度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL、HSIL)、鱗狀細胞癌(SCC)。

1.2.4 HPV檢測 采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)-反向點雜交法行HPV檢測，可鑒別檢測高危型HPV-16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82型及低危型HPV-6、11、42、43、81、83。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0做數(shù)據(jù)分析，以百分比(%)表示計數(shù)資料，采用χ2檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 陰道微生態(tài)分布情況

90例受檢者陰道pH正常75例(83.33%)、異常15例(16.67%)。陰道微生態(tài)菌群正常58例(64.44%)、異常32例(35.56%)。滴蟲感染陰性88例(97.78%)、陽性2例(2.22%)。炎癥陰性78例(86.67%)、陽性12例(13.33%)。念珠菌感染陰性76例(84.44%)、弱陽性或陽性14例(15.56%)。細菌性陰道病陰性78例(86.67%)、弱陽性或陽性12例(13.33%)。

2.2 陰道微生態(tài)與HPV感染的關(guān)系

2.2.1 HPV檢測結(jié)果 HPV16陽性18例，檢出率最高，占20.00%；HPV18陽性8例，檢出率為8.89%；HPV亞型陽性4例(HPV31 2例，HPV35 1例，HPV58 1例)。90例受檢者中共檢出HPV陽性30例，占33.33%。

2.2.2 陰道微生態(tài)與HPV感染的關(guān)系 受檢者陰道微生態(tài)菌群、炎癥及念珠菌感染在HPV(+)和HPV(-)間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；陰道pH、滴蟲感染與細菌性陰道病在HPV(+)和HPV(-)間無明顯差異(P>0.05)。見表1。

2.3 陰道微生態(tài)與宮頸病變的關(guān)系

2.3.1 TCT檢測結(jié)果 宮頸正常者78例(86.67%)；宮頸病變者12例(13.33%)，其中ASCUS 6例，ASC-H 3例，LSIL 2例，HSIL 1例。

2.3.2 陰道微生態(tài)與宮頸病變的關(guān)系 受檢者陰道微生態(tài)菌群、炎癥及念珠菌感染在宮頸正常和宮頸病變受檢者間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；陰道pH、滴蟲感染與細菌性陰道病在宮頸正常和宮頸病變受檢者間無明顯差異(P>0.05)。見表1。

3 討論

HPV是環(huán)狀DNA雙鏈病毒，具有高度特異性，多數(shù)女性感染HPV后通過自身的免疫力可把病毒清除掉，這個過程大概需要10個月左右，但也有部分患者由于受多次妊娠、不潔性行為等因素的影響感染HPV后不能自動清除，這類患者發(fā)生子宮頸癌前病變的風(fēng)險明顯增加[4-5]。但感染HPV后到宮頸癌前病變，再到發(fā)展為宮頸癌是一個漫長的過程，需要8～10年的時間，這也為治療提供了一定時間。HPV感染后的轉(zhuǎn)歸結(jié)果主要取決于宿主生物學(xué)易感行為、病毒因素及機體免疫狀態(tài)3方面，而陰道微生態(tài)平衡是機體免疫的一部分。

陰道微生態(tài)屬于機體免疫的一部分，是一種復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)。研究[6-7]顯示，HPV感染可影響陰道微生態(tài)的菌群構(gòu)成，而陰道菌群平衡失調(diào)可增強HPV的表達，如此形成惡性循環(huán)，引發(fā)宮頸病變，最終導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生。正常女性陰道內(nèi)寄居著革蘭氏陽性/陰性需氧菌、專性厭氧菌等多種微生物，構(gòu)成了陰道正常微生物群，這些微生物在陰道內(nèi)相互制約，使微生物與微生物之間、微生物與宿主之間維持著相互制約、共生共存的動態(tài)平衡，構(gòu)成陰道微生態(tài)系統(tǒng)。

表1 陰道微生態(tài)與HPV感染及宮頸病變的關(guān)系/例

健康婦女陰道內(nèi)主要存在乳桿菌、加得納菌及大腸埃希茵等多種細菌，其中乳桿菌含量最多，占95%以上，對維持陰道局部微環(huán)境有著重要作用，屬于陰道內(nèi)的優(yōu)勢菌群，主要表現(xiàn)在乳桿菌可產(chǎn)生抑菌和殺菌物質(zhì)，還有競爭黏附作用及維持陰道自凈作用等[8]。然而微生物數(shù)量、繁殖速度及宿主機體狀態(tài)的變化等可影響陰道內(nèi)這種微環(huán)境的動態(tài)平衡，一旦這種平衡被打破，就會發(fā)生細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎、外陰陰道假絲酵母菌病及HPV感染等微生物感染性疾病[9]。有研究[10-11]證實，乳桿菌對光滑假絲酵母菌和白色假絲酵母菌有明顯的抑制作用，而白色假絲酵母菌屬于條件致病菌，當(dāng)患者免疫功能下降時，白色假絲酵母菌便會大量繁殖，引起陰道內(nèi)菌群失調(diào)，最終導(dǎo)致疾病的發(fā)生。此外，由于陰道是與外界相通的生殖器官，本就容易發(fā)生各種感染，甚至同時發(fā)生兩種以上的感染，這些致病菌相互影響、相互制約，一種感染可影響著另一種感染的發(fā)生。正常情況下，由于乳桿菌的存在，育齡女性陰道pH值維持在3.8～4.5，這也是陰道的健康狀態(tài)，而陰道pH值的變化既是引起陰道疾病的誘因，也可以是致病后的結(jié)果。本研究HPV檢測結(jié)果顯示，HPV陽性者占33.33%，其中HPV16檢出率最高，陽性者占20.00%；TCT法行宮頸液基細胞學(xué)檢測，結(jié)果顯示90例受檢者中宮頸正常者占86.67%，宮頸病變者占13.33%；隨后分析了陰道微生態(tài)變化與HPV感染及宮頸病變的關(guān)系，結(jié)果顯示，受檢者陰道微生態(tài)菌群、炎癥及念珠菌感染在HPV(+)和HPV(-)間及宮頸正常和宮頸病變受檢者間比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，而陰道pH、滴蟲感染與細菌性陰道病在HPV(+)和HPV(-)間及宮頸正常和宮頸病變受檢者間無明顯差異，提示陰道微生態(tài)失調(diào)與HPV感染及宮頸病變間存在著一定的相關(guān)性，陰道微生態(tài)平衡被打破，可增加HPV感染及宮頸病變風(fēng)險，與張朋云等[12]研究結(jié)果一致。這應(yīng)該與陰道微生態(tài)失調(diào)降低了患者陰道內(nèi)微環(huán)境抵抗外來病原體入侵的能力，外來病原體不同程度地損壞上皮細胞有關(guān)。

綜上，陰道微生態(tài)失調(diào)與HPV感染及宮頸病變密切相關(guān)，陰道微生態(tài)平衡被打破，可增加HPV感染及宮頸病變風(fēng)險，臨床應(yīng)注重HPV檢測及宮頸癌前病變的篩查，以提高宮頸癌前病變及宮頸癌檢出率，及早發(fā)現(xiàn)及早治療，改善患者轉(zhuǎn)歸。