楊田田，陳娜，李金玲，袁笑

濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 （山東濱州 256600）

肺結(jié)核屬于常見的肺部感染性疾病之一，其發(fā)生與結(jié)核分枝桿菌感染有關(guān)。肺結(jié)核患者的臨床表現(xiàn)為消瘦、咳痰、咯血及胸痛等。該病傳染性強(qiáng)，嚴(yán)重危害患者的生命健康，影響其日常工作生活。炎癥介質(zhì)與免疫細(xì)胞尤其是T淋巴細(xì)胞亞群是診斷肺部疾病、病菌感染及炎癥的重要指標(biāo)。因此，研究肺結(jié)核患者炎癥介質(zhì)、T細(xì)胞亞群指標(biāo)特異性表現(xiàn)逐漸成為臨床研究的重點(diǎn)。本研究旨在分析肺結(jié)核患者炎癥介質(zhì)及免疫細(xì)胞檢驗(yàn)的意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年11月至2018年12月我院收治的32例進(jìn)展期肺結(jié)核患者作為試驗(yàn)組，選取同期32例好轉(zhuǎn)期肺結(jié)核患者作為對(duì)照組。對(duì)照組男18例，女14例；年齡34～60歲，平均（44.23±4.21）歲。試驗(yàn)組男17例，女15例；年齡35～62歲，平均（46.28±4.75）歲。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均符合《肺結(jié)核診斷和治療指南》中關(guān)于肺結(jié)核疾病的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］；具備完整的臨床資料；患者及其家屬均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并糖尿病、甲狀腺疾病、代謝異常等情況的患者；心、肝、肺功能障礙的患者；近期接受抗凝和溶栓藥物治療的患者。

1.2 方法

（1）炎癥介質(zhì)檢測(cè)：囑患者空腹，抽取外周血5 ml，分離血清，于-80℃冰箱保存待檢；利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法測(cè)定腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）及干擾素-γ（IFN-γ）［2］；試劑盒由上海江萊生物科技有限公司提供，酶標(biāo)儀由武漢優(yōu)爾生生命科學(xué)裝備有限公司（SMR16.1）提供，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算所需濃度值。（2）免疫細(xì)胞檢測(cè)：取EDTA-K2抗凝血采集管采集患者靜脈血2 ml，標(biāo)記抗體，進(jìn)行溶血處理，利用貝克曼庫(kù)爾特生物科技（蘇州）有限公司提供的流式細(xì)胞儀（型號(hào)Flow Cytometer）檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD3+/CD8+等；檢測(cè)過(guò)程嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行，抗體由南京森貝伽生物科技有限公司提供。

1.3 臨床評(píng)價(jià)

比較兩組炎癥介質(zhì)水平及免疫細(xì)胞檢驗(yàn)情況，包括TNFα、IL-10、IL-2、IFN-γ及T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD3+/CD8+等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組炎癥介質(zhì)水平比較

試驗(yàn)組炎癥介質(zhì)TNF-α、IL-10、IL-2水平高于對(duì)照組，IFN-γ水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組炎癥介質(zhì)水平比較（ng/L，±s）

表1 兩組炎癥介質(zhì)水平比較（ng/L，±s）

注：與對(duì)照組比較，a P＜0.05

組別 例數(shù) TNF-α IL-10 IL-2 IFN-γ試驗(yàn)組 32 49.87±3.59a 29.98±2.69a 63.21±4.25a 124.10±4.88 a對(duì)照組 32 38.35±2.47 22.01±2.58 57.98±4.32 168.75±5.69

2.2 兩組T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)水平比較

試驗(yàn)組T淋巴細(xì)胞亞群CD8+水平高于對(duì)照組，CD3+、CD4+、CD3+/CD8+水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)水平比較（±s）

表2 兩組T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)水平比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，a P＜0.05

組別 例數(shù) CD3+（%） CD4+（%） CD3+/CD8+ CD8+（%）試驗(yàn)組 32 63.56±3.65a 34.25±3.77a 1.22±0.12a 28.32±2.89 a對(duì)照組 32 66.54±3.25 45.68±4.12 1.65±0.32 25.45±3.21

3 討論

結(jié)核疾病是一種常見的慢性疾病，主要是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的，會(huì)嚴(yán)重?fù)p害機(jī)體多個(gè)臟器，肺結(jié)核感染尤為突出。人體在感染結(jié)核病菌后，淋巴細(xì)胞致敏性增強(qiáng)，細(xì)胞吞噬能力提高，導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降，甚至發(fā)生細(xì)胞介導(dǎo)變態(tài)反應(yīng)，引發(fā)肺結(jié)核［3］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在全球范圍內(nèi)，我國(guó)肺結(jié)核患者數(shù)量?jī)H次于印度［4-5］。因而，探討肺結(jié)核機(jī)制具有重要的臨床價(jià)值。同時(shí)，臨床判定肺結(jié)核疾病活動(dòng)性以及轉(zhuǎn)歸情況時(shí)主要依據(jù)患者的臨床表現(xiàn)、痰菌、空洞、肺部病變等情況，根據(jù)肺結(jié)核病變不同的活動(dòng)性，進(jìn)展期患者的分期標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)滿足以下任意一項(xiàng)：出現(xiàn)新的活動(dòng)性病變；空洞擴(kuò)大或者出現(xiàn)新的空洞；相較于之前病變?cè)龆?、惡化；痰菌呈?yáng)性。而好轉(zhuǎn)期患者則具備以下任一項(xiàng)：相較于之前病變吸收；空洞縮小或者閉合；痰菌呈陰性。

本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組炎癥介質(zhì)TNF-α、IL-10、IL-2水平高于對(duì)照組，IFN-γ水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在控制肺結(jié)核感染時(shí)，IFN-γ因子發(fā)揮著重要的作用，其對(duì)Th1細(xì)胞增殖可起到促進(jìn)作用，能夠提高相關(guān)抗原表達(dá)能力，具有免疫調(diào)控、抗腫瘤、抗病毒等作用［6］。IFN-γ因子在重癥肺炎、肺結(jié)核患者體內(nèi)可導(dǎo)致細(xì)菌釋放內(nèi)毒素，對(duì)活化T細(xì)胞產(chǎn)生影響，使得T細(xì)胞活性降低、含量下降，進(jìn)而對(duì)IFN-γ的生成產(chǎn)生抑制作用或者加速其降解［7］。TNF-α有助于誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞吞噬結(jié)核分枝桿菌，充分結(jié)合鐵離子，進(jìn)而對(duì)結(jié)核分枝桿菌的增殖起到抑制作用。在B細(xì)胞、T細(xì)胞分化時(shí)，IL-2可起到明顯的促進(jìn)作用，有助于分泌相關(guān)免疫細(xì)胞因子，提高免疫細(xì)胞防御能力，有助于清除病原菌。Th2細(xì)胞能夠分泌IL-10抗炎因子，對(duì)TNF-α增殖起到抑制作用［8］。檢測(cè)肺結(jié)核患者機(jī)體TNF-α、IL-10、IL-2等炎癥介質(zhì)水平有助于臨床掌握患者細(xì)胞因子情況，根據(jù)細(xì)胞因子的變化判定其病情嚴(yán)重程度，進(jìn)而為治療肺結(jié)核患者提供適宜的靶點(diǎn)，改善患者預(yù)后。

在肺結(jié)核發(fā)生與發(fā)展期，T淋巴細(xì)胞亞群免疫細(xì)胞發(fā)揮重要作用。本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組T淋巴細(xì)胞亞群CD8+水平高于對(duì)照組，CD3+、CD4+、CD3+/CD8+水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在機(jī)體清除結(jié)核分枝桿菌的過(guò)程中，CD3+不直接參與清除，但可促進(jìn)識(shí)別抗原活化信號(hào)，有助于啟動(dòng)免疫應(yīng)答反應(yīng)［4］。肺結(jié)核好轉(zhuǎn)期患者CD3+水平下降的原因在于，感染結(jié)核分枝桿菌時(shí)CD3+的消耗數(shù)量明顯增加；同時(shí)，這種消耗量可能與結(jié)核分枝桿菌數(shù)量成正比關(guān)系。在免疫應(yīng)答中，CD3+細(xì)胞可以分化為Th1與Th2型細(xì)胞，能夠分泌多種免疫因子，對(duì)機(jī)體形成重要的保護(hù)作用，而Th1、Th2細(xì)胞的變化可以反映機(jī)體的抗感染水平。在T淋巴細(xì)胞增殖、分化過(guò)程中，CD8+細(xì)胞發(fā)揮著重要的作用，可顯著提升結(jié)核分枝桿菌清除能力及特異性識(shí)別能力，進(jìn)而對(duì)機(jī)體形成重要的保護(hù)作用［5］。CD3+/CD8+水平的變化可反映機(jī)體免疫情況，當(dāng)機(jī)體發(fā)生免疫缺陷或病毒感染時(shí)，CD3+/CD8+值就會(huì)下降；當(dāng)機(jī)體發(fā)生自身免疫性疾病時(shí)，CD3+/CD8+值則會(huì)升高。對(duì)于進(jìn)展期及好轉(zhuǎn)期的肺結(jié)核患者，對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢驗(yàn)有助于掌握機(jī)體免疫系統(tǒng)抵抗、清除病菌的能力，對(duì)診斷與治療不同類型的肺結(jié)核具有重要意義。

綜上所述，肺結(jié)核患者炎癥介質(zhì)、免疫細(xì)胞等指標(biāo)水平變化對(duì)于肺結(jié)核的診斷及治療具有重要意義。