張希，康晨

天津市黃河醫(yī)院檢驗(yàn)科 (天津 300110)

全自動血細(xì)胞分析儀主要通過流式與電阻抗技術(shù)對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，再使用過氧化物酶、高頻電磁、低頻電磁、激光散射、直流電等方法將白細(xì)胞分為多種類型，一般通過散點(diǎn)圖表示[1]。但在實(shí)際檢測過程中會受諸多因素的影響而導(dǎo)致白細(xì)胞分類與計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確，進(jìn)而導(dǎo)致假性白細(xì)胞分類不準(zhǔn)確與假性增高，此時(shí)散點(diǎn)圖可提示為檢測結(jié)果異常，因此，操作人員需充分了解血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖，以便準(zhǔn)確分析原因[2]。本研究主要就全自動血細(xì)胞分析儀中白細(xì)胞假性計(jì)數(shù)的研究進(jìn)展作一綜述。

1 白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性降低

1.1 分葉核中性粒細(xì)胞聚集

在實(shí)際檢測過程中，標(biāo)本中所含有的EDTA抗凝劑可導(dǎo)致分葉核中性粒細(xì)胞聚集，進(jìn)而導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性降低，此種情況雖然較少發(fā)生，但仍不可忽視[3]。分葉核中性粒細(xì)胞聚集無明顯性別差異，醫(yī)學(xué)界目前尚未明確此種聚集的發(fā)生機(jī)制。此外，該種情況還可發(fā)生于枸櫞酸鈉和肝素抗凝的血液標(biāo)本中。相關(guān)報(bào)道顯示，白細(xì)胞聚集與特定疾病或者病理之間無明確關(guān)聯(lián)性[4]。白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖能夠提示異常情況，但在實(shí)際檢測過程中往往會出現(xiàn)儀器忽略最大聚集物的情況，并對小聚集物發(fā)出報(bào)警。在電阻抗類血細(xì)胞分析儀中，當(dāng)白細(xì)胞分類圖分葉核中性粒細(xì)胞聚集區(qū)域出現(xiàn)未成熟粒白細(xì)胞時(shí)，儀器會發(fā)出報(bào)警信號。這種發(fā)生于EDTA抗凝血腫的分葉核中性粒細(xì)胞聚集物可直接影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測結(jié)果，出現(xiàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性降低與錯誤分類情況，進(jìn)而引發(fā)淋巴細(xì)胞增多癥與假性粒細(xì)胞缺乏癥，需引起重視。

1.2 淋巴細(xì)胞聚集

淋巴細(xì)胞聚集可導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)出現(xiàn)假性降低情況。據(jù)相關(guān)報(bào)道顯示，對燒傷、尿路感染、嚴(yán)重單核細(xì)胞白血病、B細(xì)胞淋巴瘤等患者的血液標(biāo)本進(jìn)行檢測后，可發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞聚集情況[5]。此外，相關(guān)報(bào)道顯示，在慢性淋巴細(xì)胞白血病患者體內(nèi)也存在淋巴細(xì)胞聚集情況，使用血細(xì)胞分析儀對存在上述情況的患者進(jìn)行檢測時(shí)，會導(dǎo)致較大的聚集細(xì)胞被忽略，進(jìn)一步導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性降低；同時(shí)，小聚集物可干擾白細(xì)胞分類情況，導(dǎo)致儀器出現(xiàn)錯誤[6]。

2 白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高

2.1 血小板聚集與巨型血小板

通常，白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高主要由體積相近的血小板聚集物所致。目前常用的全自動五分類血細(xì)胞分析儀能夠準(zhǔn)確檢測出此種異常情況，并直接反映于散點(diǎn)圖上。血小板聚集物能夠以點(diǎn)的形式組成火箭狀，主要位于白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖左下方，可形成淋巴細(xì)胞報(bào)警信號[7]。若患者患有骨髓增生性疾病與骨髓發(fā)育異常疾病，則血液中會出現(xiàn)一些體積巨大的血小板，由于這些血小板會達(dá)到白細(xì)胞大小而被當(dāng)成白細(xì)胞計(jì)數(shù)，當(dāng)儀器檢測到此種巨型血小板時(shí)會發(fā)出報(bào)警信號，報(bào)告為血小板聚集或者巨血小板。

2.2 有核紅細(xì)胞

有核紅細(xì)胞可存在于正常血液或病理血液中，數(shù)量有時(shí)可多于白細(xì)胞，且可與溶血劑直接反應(yīng)，使細(xì)胞膜溶解，進(jìn)而釋放出細(xì)胞核，也是臨床上導(dǎo)致白細(xì)胞異常增高的重要原因[8]。當(dāng)有紅細(xì)胞處于游離狀態(tài)時(shí)，其體積低于50 fl，可與巨大血小板或血小板聚集物表面相重疊，進(jìn)而共同影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)，使儀器發(fā)出相同報(bào)警信號。

2.3 抗溶性紅細(xì)胞

在部分情況下，紅細(xì)胞不會受到溶血劑的破壞，當(dāng)患者患有肝臟疾病、尿毒癥及行化療后，可導(dǎo)致其體內(nèi)抗溶性紅細(xì)胞被誤認(rèn)為白細(xì)胞，進(jìn)而導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高[9]。白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖中可發(fā)現(xiàn)大量小點(diǎn)處于淋巴細(xì)胞區(qū)域，使其無法與淋巴細(xì)胞區(qū)分，進(jìn)而發(fā)出報(bào)警信號。但通常情況下，可根據(jù)散點(diǎn)圖密度分析出有核紅細(xì)胞的存在，該情況可見于含血紅蛋白C的紅細(xì)胞患者血液標(biāo)本內(nèi)。此外，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀能夠通過產(chǎn)生紅細(xì)胞的方式抵抗溶血劑信息，使血細(xì)胞與溶血劑接觸時(shí)間延長，進(jìn)而達(dá)到消除紅細(xì)胞抵抗的目的。對于存在專用白細(xì)胞核計(jì)數(shù)通道的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，可通過破膜試劑將細(xì)胞膜溶解，以達(dá)到精確計(jì)數(shù)細(xì)胞核的目的，確保準(zhǔn)確區(qū)分有核紅細(xì)胞與白細(xì)胞。

2.4 冷球蛋白類

冷球蛋白對白細(xì)胞計(jì)數(shù)具有重要的影響，不僅能夠?qū)е缕浼傩栽龈撸€可進(jìn)一步影響血小板、紅細(xì)胞及血紅蛋白計(jì)數(shù)。據(jù)相關(guān)報(bào)道顯示，這種影響與冷球蛋白量無明顯關(guān)聯(lián)性，可能與其自身特性相關(guān)，因此，在實(shí)際檢測過程中，若出現(xiàn)異常檢測結(jié)果，則可考慮冷球蛋白，有助于冷球蛋白血癥的臨床診斷[10]。當(dāng)處于室溫下，通過顯微鏡對患者染色的血涂片進(jìn)行觀察，可發(fā)現(xiàn)明顯冷沉淀物，當(dāng)處于低溫環(huán)境下，該情況更加明顯。冷球蛋白本質(zhì)上屬于一種免疫球蛋白，當(dāng)處于37 ℃以下的環(huán)境時(shí)，可形成冷沉淀物，因此，在檢測時(shí)需適當(dāng)對試劑加溫，以減少該情況的發(fā)生，但仍無法完全避免，有時(shí)仍可發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高的情況。這種冷沉淀物的體積接近血小板，在臨床檢測時(shí)可對血小板計(jì)數(shù)產(chǎn)生直接影響，導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)出現(xiàn)假性增高的情況，進(jìn)而導(dǎo)致血小板體積直方圖發(fā)出報(bào)警信號。當(dāng)冷球蛋白出現(xiàn)聚集或者體型巨大時(shí)，可接近白細(xì)胞，使白細(xì)胞計(jì)數(shù)出現(xiàn)假性增高情況。對白細(xì)胞散點(diǎn)圖進(jìn)行觀察后，可發(fā)現(xiàn)冷球蛋白呈云霧狀小點(diǎn)分布，主要位于血小板閾值處或者淋巴細(xì)胞上，有時(shí)也可出現(xiàn)于多形核白細(xì)胞散點(diǎn)頂端，若觀察到上述情況，則說明可能存在冷凝蛋白質(zhì)[11]。此外，當(dāng)冷球蛋白呈膠凍狀時(shí)，可堵塞血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的吸樣針，進(jìn)而影響最終分析結(jié)果，因此，需引起重視。

2.5 纖維蛋白原

相關(guān)研究結(jié)果顯示，纖維蛋白與冷纖維蛋白原可直接影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)與血小板計(jì)數(shù)，使其出現(xiàn)明顯假性增高的情況，有時(shí)可使白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高16倍[12]。通過電子顯微鏡對血涂片進(jìn)行觀察后，可發(fā)現(xiàn)其與纖維絲相關(guān)，這種纖維絲與纖維蛋白、冷纖維蛋白原存在密切的關(guān)聯(lián)。在臨床檢測時(shí)，將采集到的新鮮血液使用EDTA抗凝可有效避免上述情況，說明當(dāng)標(biāo)本與EDTA尚未接觸前可引發(fā)纖維蛋白聚集，進(jìn)而導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)出現(xiàn)假性增高的情況[13]。

2.6 標(biāo)本量過度

在臨床檢測中，真空管內(nèi)血液標(biāo)本過多可導(dǎo)致血小板假性計(jì)數(shù)，進(jìn)而導(dǎo)致血液標(biāo)本受到影響，使白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高，因此，在檢測時(shí)需控制標(biāo)本的質(zhì)量，以確保白細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

總之，在使用全自動血細(xì)胞分析儀的過程中，易受到多種因素的影響而導(dǎo)致白細(xì)胞假性計(jì)數(shù)，其中原因較為復(fù)雜，難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)與鑒別，因此，要求操作者高度重視全自動血細(xì)胞分析儀所顯示的報(bào)警信號，通過血涂片方式進(jìn)行觀察，以減少或者避免白細(xì)胞假性計(jì)數(shù)的情況。