農(nóng)藥對(duì)于防治農(nóng)作物病蟲害具有重要作用，但也給農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全帶來(lái)隱患，因此，蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)逐漸受到社會(huì)關(guān)注。現(xiàn)階段，中國(guó)十分重視蔬菜質(zhì)量安全問(wèn)題，監(jiān)管力度不斷加強(qiáng)，各地監(jiān)管機(jī)構(gòu)、批發(fā)市場(chǎng)、超市、生產(chǎn)基地等相繼建立了蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)室與檢測(cè)點(diǎn)。蔬菜農(nóng)藥殘毒檢測(cè)技術(shù)是現(xiàn)如今比較普遍的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法，方法簡(jiǎn)單，易于操作，已被各檢測(cè)主體廣泛使用。本文分析了蔬菜農(nóng)藥殘毒檢測(cè)技術(shù)注意事項(xiàng)，以期更好地開展蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作。

1藥品配制和處理

1.1藥品配制

藥品配制和保存過(guò)程主要包括配置提取液、酶液、底物和顯色劑。提取液是稀釋其他配制劑的重要液體，提取液的配制過(guò)程十分重要。受藥品純度及實(shí)驗(yàn)室濕度影響，緩沖液pH值會(huì)有所差別。正常情況下，最后配比出的提取液通常無(wú)法達(dá)到規(guī)定值要求。建議在配制完成后，用pH計(jì)來(lái)校正提取液pH值。

顯色劑、酶液、底物在高溫環(huán)境中容易發(fā)生變質(zhì)進(jìn)而失去效果。所以，在配制藥液的過(guò)程中可以采用分裝制，隨用隨取，這種方法可以避免藥品浪費(fèi)，保證藥品質(zhì)量。酶是決定檢測(cè)技術(shù)成功與否的重要成分。酶的活性、純度、反應(yīng)時(shí)酶的濃度等都會(huì)影響最后的檢測(cè)結(jié)果。因此，應(yīng)合理控制這些因素，保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。

1.2樣品前期處理

在取樣時(shí)，要根據(jù)不同蔬菜種類選擇不同部位取樣。例如葉菜類應(yīng)去掉枯葉和腐葉，進(jìn)而再收集植株的不同葉片；豆菜和果菜類需在表皮到果肉部分1～1.5 cm處取樣，果肉取樣要適量；含有葉綠素和色素比較高的其他蔬菜，禁止立刻進(jìn)行加液提取，否則會(huì)快速氧化，提取液的顏色會(huì)變深。

1.3制備培養(yǎng)樣品

在選擇培養(yǎng)管時(shí)，容量最好與培養(yǎng)量相符合，避免檢測(cè)結(jié)果誤差較大。同時(shí)，需把培養(yǎng)箱的溫度控制在37～38℃，培養(yǎng)時(shí)間控制為30 min。

2檢測(cè)值常見問(wèn)題

2.1空白值

首先，在操作儀器之前要保證儀器穩(wěn)定，比色杯沒(méi)有較大色差。其次，要嚴(yán)格控制樣品從培養(yǎng)箱取出到上機(jī)這段時(shí)間。丁酰膽堿酯酶樣品的空白值受時(shí)間影響較大，丁酰膽堿酯酶穩(wěn)定性較差，活性較高，在加入底物之后反應(yīng)速度較快，所以要縮短操作時(shí)間，避免空白值迅速減小。因此，不同種類的酶在不同檢測(cè)條件下樣品空白值各不相同。

2.2吸光值

樣品吸光值偏高是在檢測(cè)中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題。根本原因是酶的活性發(fā)生變化和反應(yīng)中產(chǎn)生的化學(xué)、物理干擾。酶失效導(dǎo)致自身顏色發(fā)生變化，樣品本底顏色較深，提取液中的樣品組織液形成乳濁液等透光之后被散色，導(dǎo)致透光率降低，吸光度逐漸增大。

2.3抑制率

在檢測(cè)結(jié)果中，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)抑制率為負(fù)數(shù)的情況，個(gè)別樣品會(huì)出現(xiàn)較小的負(fù)值誤差，這主要是由于操作誤差導(dǎo)致。酶分解底物時(shí)，分解物與顯色劑相結(jié)合時(shí)速度較快，若操作方法不科學(xué)容易造成誤差，從而使抑制率變成負(fù)數(shù)。

2.4假陽(yáng)性假陰性

假陽(yáng)性是因?yàn)槊富钚越档突蛘呤Щ?，?dǎo)致在底物中無(wú)法發(fā)生作用，底物無(wú)法被水解，不能與顯色劑相結(jié)合從而顯色造成。結(jié)果與提取液中存在農(nóng)藥抑制酶的活性相類似。假陰性是由于某種農(nóng)藥對(duì)酶沒(méi)有明顯抑制作用而產(chǎn)生的，表現(xiàn)出沒(méi)有農(nóng)藥的假象。除此之外，在反應(yīng)過(guò)程中，化學(xué)干擾也會(huì)發(fā)生假陰性和假陽(yáng)性的情況。檢測(cè)人員需選擇敏感性較強(qiáng)的酶，降低假陽(yáng)性和假陰性發(fā)生概率。

3其他注意事項(xiàng)

3.1儀器使用條件

應(yīng)科學(xué)控制實(shí)驗(yàn)室溫度及濕度，保證儀器正常使用。實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)溫度應(yīng)控制在20～30℃，相對(duì)濕度要低于85%，否則會(huì)影響酶的活性及檢測(cè)結(jié)果。酶在室溫下培養(yǎng)時(shí)，22℃需培養(yǎng)20 min，25℃需培養(yǎng)15 min，若室溫低于20℃，必須將酶放入37～38℃的保溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

3.2樣品數(shù)量

蔬菜樣品重量應(yīng)為2～2.5 kg，最好將其分成3份，一份備案，一份用于復(fù)檢，一份在檢測(cè)時(shí)使用。

3.3用水選擇

溶液試劑用水最好選擇蒸餾水，也可以使用等離子水和純凈水，避免用礦泉水和自來(lái)水。

3.4樣液浸提

在樣液浸提時(shí)，用超聲提取儀進(jìn)行提取較為適宜，也可以使用振蕩器振蕩浸提。無(wú)法使用儀器浸提時(shí)，應(yīng)用晃動(dòng)的方式浸提。浸提時(shí)間要充足且適當(dāng)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或者過(guò)短都會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

3.5器具清洗

在檢測(cè)過(guò)程中用到的所有器具，在重復(fù)使用之前都必須進(jìn)行浸泡，再用自來(lái)水沖洗5遍，然后用蒸餾水清洗2遍，洗凈之后再用。

3.6比色瓶保護(hù)

對(duì)比色瓶做好清潔保護(hù)，可減少實(shí)驗(yàn)誤差。比色瓶在插進(jìn)比色槽之前，必須要用清洗布或者干凈柔軟的紙張進(jìn)行擦拭，然后再準(zhǔn)確插入比色槽。在檢測(cè)結(jié)束后，要將比色瓶里面的溶液及時(shí)倒掉，再用自來(lái)水進(jìn)行清潔，避免污染或溶液腐蝕比色瓶；在使用前，先用蒸餾水沖洗2次，甩干后用擦鏡紙把瓶子表面擦干。

3.7辛辣等樣液檢測(cè)

需使用酶抑制法快速檢測(cè)蔥、姜、蒜等一些辛辣性蔬菜農(nóng)藥殘留，但可能出現(xiàn)假陽(yáng)性的情況，且辛辣味越強(qiáng)烈的蔬菜就越有可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。所以，在浸提辛辣蔬菜類樣品時(shí)，需要在其中加入專用消除劑來(lái)隔絕辛辣物質(zhì)的干擾，用特殊的方法進(jìn)行浸提。

3.8確認(rèn)結(jié)果

在獲得初測(cè)結(jié)果后，對(duì)不合格樣品要在標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)室中進(jìn)一步檢測(cè)與定性，進(jìn)行精確確認(rèn)。在用氣相色譜或液相技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，用雙毛細(xì)管柱、雙檢定器氣相色譜、高效液相色譜檢測(cè)進(jìn)行定性及定量分析。這種檢測(cè)方法能快速準(zhǔn)確檢測(cè)出蔬菜中的有機(jī)磷、有機(jī)氯、氧基甲酸酯等農(nóng)藥殘留。

3.9加強(qiáng)監(jiān)督

蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)只能檢測(cè)小部分蔬菜樣品，無(wú)法覆蓋到市場(chǎng)上全部蔬菜種類，因此在日常管理中，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)農(nóng)戶農(nóng)藥使用情況的監(jiān)督，引導(dǎo)農(nóng)戶正確使用農(nóng)藥，提高環(huán)境保護(hù)意識(shí)。嚴(yán)格按照低毒無(wú)殘留標(biāo)準(zhǔn)種植蔬菜，保障食品安全。

3.10檢測(cè)資料管理

檢測(cè)結(jié)果除了需做好電子備份外，還應(yīng)該準(zhǔn)備紙質(zhì)資料建檔，方便查詢和長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

蔬菜是十分重要的食物，可為人體補(bǔ)充各種維生素及膳食纖維，但隨著蔬菜需求量的不斷上漲，一些高農(nóng)殘蔬菜也開始流入市場(chǎng)，所以各地必須重視蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作。

（1寧夏石嘴山市惠農(nóng)區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心馬惠蘭2寧夏石嘴山市農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法支隊(duì)惠農(nóng)大隊(duì)李玉明）