楊國(guó)棟 趙樂

(河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院 1血管外科，河南 洛陽(yáng) 471003；2檢驗(yàn)科)

動(dòng)脈硬化不良反應(yīng)的早期表現(xiàn)是血管壁結(jié)構(gòu)和功能的變化，并且與廣泛的臨床疾病，如動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、糖尿病、慢性腎臟病、瓣膜心臟病、肥厚型心肌病、先天性心臟病、結(jié)締組織疾病及高齡相關(guān)〔1〕。動(dòng)脈硬化程度的增加已證明與一些心血管危險(xiǎn)因素有關(guān)，如高膽固醇血癥、糖尿病、高血壓、代謝綜合征和肥胖等〔2〕。透明質(zhì)酸(HA)是一種黏多糖參與的細(xì)胞外基質(zhì)中水和蛋白的代謝平衡，細(xì)胞的增殖和遷移〔3〕。HA是糖萼層的重要組成部分。HA酶(hyaluronidase)參與HA的降解，有多種亞型，hyaluronidase-1是唯一在人類中發(fā)現(xiàn)的亞型〔4〕。已經(jīng)證明，由于各種血管異常導(dǎo)致HA代謝的改變，血管通透性及脂蛋白的增加，單核細(xì)胞和血小板黏附于內(nèi)皮，一氧化氮(NO)的減少〔5，6〕。在動(dòng)脈粥樣硬化性病變的糖尿病患者中，患者患有冠狀動(dòng)脈疾病的基礎(chǔ)上觀察到血漿HA和hyaluronidase水平增加，NO減少可能與內(nèi)皮功能障礙可能與動(dòng)脈硬化和動(dòng)脈粥樣硬化性血管疾病相關(guān)。本研究旨在探討糖尿病合并高血壓患者中血清hyaluronidase與動(dòng)脈硬化程度關(guān)系。

1 材料與方法

1.1一般資料 2017年12月至2018年5月于河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院治療的109例患有高血壓、糖尿病患者分為三組：1組僅有高血壓組，2組僅有糖尿病組，3組同時(shí)患有糖尿病和高血壓組。 診斷標(biāo)準(zhǔn)：高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)：非藥物狀態(tài)下2次或2次以上非同日多次重復(fù)血壓測(cè)定所得的平均值收縮壓≥140 mmHg和舒張壓≥89 mmHg。2型糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)：空腹血糖≥7.0 mmol/L和(或)餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L或糖化血紅蛋白(HbA1c)≥6.5%。排除標(biāo)準(zhǔn)包括：急、慢性肝腎疾病，急性冠脈綜合征，重癥感染性疾病，急、慢性炎癥性疾病，惡性腫瘤及血液病、風(fēng)濕性疾病，妊娠。1組33例，男18例，女15例，平均年齡(43.1±3.2)歲；2組24例，男11例，女13例，平均年齡(40.5±5.1)歲；3組52例，男21例，女31例，平均年齡(48.3±3.7)歲。3組基線資料及臨床資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

1.2方法 受試者晨起空腹抽靜脈血，部分血液離心后分離血清保存于-80℃冰箱，統(tǒng)一測(cè)定血清透明質(zhì)酸酶和NO水平。使用日立7600全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定HbA1c、肌酐(Cr)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)。血清hyaluronidase水平測(cè)定使用酶聯(lián)免疫吸附法，NO水平測(cè)定使用酶免疫法。對(duì)于主動(dòng)脈硬化的檢查應(yīng)用Philips Sonos 5500 型彩色超聲診斷儀。測(cè)量收縮末期主動(dòng)脈根部?jī)?nèi)徑(AOS)和舒張末期主動(dòng)脈根部?jī)?nèi)徑(AOD)。主動(dòng)脈應(yīng)變(AS)=100×(AOS-AOD)/AOD；主動(dòng)應(yīng)變指數(shù)(ASI)=(SBP/DBP)/(AS)；主動(dòng)脈擴(kuò)張性(AD)=2 ×AS/SBP-DBP。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行方差分析及Pearson相關(guān)分析。

表1 109例患者相關(guān)基線資料及臨床資料

2 結(jié) 果

2.1患者血清hyaluronidase和NO水平呈負(fù)相關(guān) 患者在研究過程中使用藥物治療，其中使用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制的44例，使用血管緊張素受體拮抗劑的32例，使用鈣通道阻滯劑的38例，使用-受體阻滯劑的26例，使用α受體阻滯劑的16例，使用利尿劑的18例，口服降糖藥的58例，使用胰島素的22例。高血壓患者研究過程中均使用降壓藥。同時(shí)，糖尿病患者在研究過程中均使用口服降糖藥和(或)胰島素。在所有患者中，患者血清hyaluronidase和NO水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.521，P=0.011)；在 1、2、3組患者中，血清hyaluronidase和NO水平之間也呈負(fù)相關(guān)(r=-0.609、-0.579、-0.541，均P<0.001)，見圖1～圖4。

圖1 三組所有患者NO和血清hyaluronidase的關(guān)系

圖2 糖尿病患者中NO與血清hyaluronidase的關(guān)系

圖3 高血壓者中NO和血清hyaluronidase的關(guān)系

圖4 高血壓合并糖尿病患者中NO和血清hyaluronidase的關(guān)系

2.2NO水平與AS、ASI、AD的關(guān)系 1、2和3組中血清hyaluronidase水平與AS和AD呈顯著負(fù)相關(guān)，而與ASI呈顯著正相關(guān)(P<0.05)；1和3組中NO水平與AS和AD呈顯著正相關(guān)，而2組中NO水平與AS和AD無相關(guān)性；1、2和3組中NO水平與ASI呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，見表2。

表2 3組血清hyaluronidase水平與NO水平與AS、ASI和AD對(duì)比

3 討 論

動(dòng)脈硬化是隨著人們的年齡的增長(zhǎng)而出現(xiàn)的血管性疾病，通常是在青少年時(shí)期發(fā)生至中老年時(shí)期癥狀加重，進(jìn)而出現(xiàn)疾病表現(xiàn)。目前男性發(fā)病率較多于女性，近年來本病在我國(guó)的發(fā)病率逐年增加，成為我國(guó)老年人死亡的主要原因之一。動(dòng)脈硬化分為三類，即：細(xì)動(dòng)脈硬化，動(dòng)脈中層硬化和動(dòng)脈粥樣硬化。動(dòng)脈粥樣硬化主要累及大、中型動(dòng)脈，其病因及發(fā)病機(jī)制未完全明了，但已公認(rèn)的高膽固醇、高血壓、吸煙等是引起本病的主要危險(xiǎn)因素。

動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制可能是由于動(dòng)脈粥樣硬化脂質(zhì)浸潤(rùn)學(xué)說，動(dòng)脈粥樣硬化脂質(zhì)浸潤(rùn)學(xué)說的提出是因?yàn)檠芯空呖吹桨邏K中的脂質(zhì)沉積，認(rèn)為這是血液中脂質(zhì)水平增高而滲透到血管壁內(nèi)所致。Kucur等〔7〕研究發(fā)現(xiàn)冠心病患者中血清hyaluronidase含量明顯高于非冠心病患者，表明HA可能參與動(dòng)脈粥樣硬化。Lévesque等〔8〕檢測(cè)了成人和新生兒的頸動(dòng)脈標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)標(biāo)本中存在HA和hyaluronidase。在動(dòng)脈粥樣硬化樣本的內(nèi)膜上發(fā)現(xiàn)HA，hyaluronidase在彌漫性增厚的內(nèi)膜中高表達(dá)，進(jìn)一步說明在動(dòng)脈粥樣硬化病變中hyaluronidase含量高。HA是一種非硫酸鹽氨基葡聚糖，存在于細(xì)胞外基質(zhì)中，作為血管生成介質(zhì)，參與多種細(xì)胞學(xué)行為，大分子的HA可以抑制血管的形成，而低分子的HA可以刺激內(nèi)皮細(xì)胞的增殖及遷移，誘導(dǎo)血管生成〔9〕。相關(guān)體外研究證明，HA調(diào)節(jié)牛微血管內(nèi)皮細(xì)胞的侵襲和蛋白水解，并且和血管生長(zhǎng)因子協(xié)同誘導(dǎo)血管再生，暗示HA和血管生長(zhǎng)因子在調(diào)節(jié)血管再生中起很重要的作用〔10〕。最近相關(guān)研究表明，細(xì)胞外基質(zhì)信號(hào)在血管壁中的作用，并且表明彈性蛋白和膠原蛋白，也參與平滑肌細(xì)胞功能的控制；說明動(dòng)脈硬化程度受血管壁密度和空間組織結(jié)構(gòu)的影響〔11〕。有相關(guān)研究證明，HA作為一個(gè)負(fù)性調(diào)節(jié)因子作用于血小板衍生生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞的增殖，并且作為一個(gè)正性調(diào)節(jié)因子作用于血小板衍生生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞的遷移〔12〕，此研究說明HA參與調(diào)節(jié)血管平滑肌。本研究結(jié)果說明在糖尿病和(或)高血壓患者中，hyaluronidase含量與主動(dòng)脈應(yīng)變及擴(kuò)張性呈負(fù)相關(guān)，說明hyaluronidase越高，主動(dòng)脈應(yīng)變及擴(kuò)張性越差。

血管內(nèi)皮是合成釋放NO的主要場(chǎng)所，NO可以調(diào)節(jié)血管舒張、抑制血小板黏附聚集、清除氧自由基，有保護(hù)細(xì)胞的作用。NO是體內(nèi)的主要舒血管物質(zhì)，可以平衡腎素血管緊張素和交感神經(jīng)系統(tǒng)素系統(tǒng)引起的血管張力。在兔實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭酗@示，由于NO的外周舒血管作用，使基礎(chǔ)去甲腎上腺素釋放效應(yīng)減少了69%。研究人員用N-甲基-L-精氨酸等L-精氨酸類似物競(jìng)爭(zhēng)抑制劑抑制一氧化氮合成酶后，抑制NO生成，致使兔外周血管收縮，血壓升高。有相關(guān)研究表明，NO具有抑制平滑肌細(xì)胞有絲分裂，減少膠原纖維及彈力纖維的產(chǎn)生，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化形成及發(fā)展的作用〔13〕。有學(xué)者使用一氧化氮合酶激動(dòng)劑乙酰膽堿分別注入21例原發(fā)性高血壓患者和正常血壓人的肱動(dòng)脈后，發(fā)現(xiàn)兩組肱動(dòng)脈血流均增加，阻力均減少，但是這種改變?cè)诟哐獕航M遠(yuǎn)比正常組低。可見，正常人內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生NO能力較高血壓患者高。NO具有舒張血管的作用，高血壓患者中動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生NO量較正常少，本文結(jié)果表明高血壓患者中NO水平對(duì)主動(dòng)脈應(yīng)變和主動(dòng)脈擴(kuò)張性影響不大，糖尿病患者中NO水平對(duì)主動(dòng)脈應(yīng)變和主動(dòng)脈擴(kuò)張性存在影響。

總之，在糖尿病和(或)高血壓患者中，hyaluronidase含量與主動(dòng)脈應(yīng)變及擴(kuò)張性呈負(fù)相關(guān)，高血壓患者中NO水平對(duì)主動(dòng)脈應(yīng)變和主動(dòng)脈擴(kuò)張性影響不大，糖尿病患者中NO水平對(duì)主動(dòng)脈應(yīng)變和主動(dòng)脈擴(kuò)張性存在影響，表明NO和hyaluronidase可以作為內(nèi)皮功能的重要指標(biāo)，動(dòng)脈硬化患者血管內(nèi)皮功能受損的病理生理機(jī)制可能涉及HA代謝，需要進(jìn)一步的研究來證明HA代謝內(nèi)皮功能障礙的發(fā)展中的確切機(jī)制。