孫悅

血小板的生成是產(chǎn)生于骨髓中成熟的巨核細(xì)胞，由胞質(zhì)脫落而來(lái)，壽命一般為7～14 d(半壽期約3 d)，受血小板生成素的調(diào)控。全身大概有1/3的血小板滯留于脾竇以及脾髓細(xì)胞間，該聚集被稱為“脾池化”現(xiàn)象，脾池中的血小板與循環(huán)池中的血小板之間能夠自由交換，具有止血以及凝血的功能。血細(xì)胞分析中的一個(gè)重要指標(biāo)也是血小板活化的一個(gè)重要指標(biāo)，血小板平均體積升高，血小板的體積增大、活性增強(qiáng)。有研究發(fā)現(xiàn)［1］，血小板平均體積增大與急性冠狀動(dòng)脈、腦梗的發(fā)生、發(fā)展以及預(yù)后情況有著密切的聯(lián)系。當(dāng)前檢驗(yàn)血小板技術(shù)的金標(biāo)準(zhǔn)需要進(jìn)行手工計(jì)數(shù)，分類也要在鏡下進(jìn)行，雖然耗費(fèi)人力但是經(jīng)過(guò)許多年的驗(yàn)證可知準(zhǔn)確度毋庸置疑，不管目前檢驗(yàn)技術(shù)如何變化，手工檢驗(yàn)依然最為準(zhǔn)確。隨著醫(yī)療水平的不斷發(fā)展，檢測(cè)儀器的不斷更新?lián)Q代，該檢測(cè)的方法具有自動(dòng)化程序高、檢測(cè)設(shè)備的參數(shù)多樣化、檢測(cè)速度快以及環(huán)保性高的優(yōu)點(diǎn)受到歡迎［2］。但是在檢測(cè)的過(guò)程中總會(huì)不可避免的發(fā)生血小板假性減低的現(xiàn)象，本文就血小板假性減低的原因及其校正進(jìn)行分析報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2016年8月～2017年9月收治的68例血小板假性減低患者，其中男34例，女34例；年齡21～68歲，平均年齡(42.2±1.6)歲。根據(jù)血小板對(duì)不同檢測(cè)發(fā)生的聚集情況分為多種聚集組(8例)和單一聚集組(60例)。對(duì)其進(jìn)行重新抽血檢測(cè)血小板，用不同的抗凝劑同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，再采集末梢新鮮血液進(jìn)行涂片鏡檢。

1.2 方法 根據(jù)全國(guó)血液學(xué)的復(fù)檢規(guī)則將血小板假性減低患者的標(biāo)本對(duì)其形態(tài)、分布情況、數(shù)量等進(jìn)行檢查，并且使用手工顯微鏡計(jì)數(shù)的方式統(tǒng)計(jì)監(jiān)測(cè)值。儀器分析法：采用BC-6800型全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè)，試劑采用含有枸櫞酸鈉抗凝劑的真空管以及含有EDTA-K2抗凝劑的真空管采集血標(biāo)本。

具體的方法：告知所有患者采血的注意事項(xiàng)，次日采集每例患者新鮮末梢血液，根據(jù)規(guī)定的時(shí)間稍作停留之后立即對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)；而裝入枸櫞酸鈉抗凝真空管以及EDTA-K2抗凝管內(nèi)的靜脈血使用及其進(jìn)行檢測(cè)(放置15 min后進(jìn)行檢測(cè))。

再使用枸櫞酸鈉抗凝真空管以及EDTA-K2抗凝管內(nèi)的標(biāo)本制作成血涂片，通過(guò)鏡檢的方法觀察血小板的分布以及形態(tài)情況，操作規(guī)程按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo) 分析比較EDTA-K2抗凝劑、枸櫞酸鈉抗凝劑、新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測(cè)的血小板計(jì)數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在EDTA-K2抗凝劑、枸櫞酸鈉抗凝劑、新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測(cè)中，多種聚集組血小板計(jì)數(shù)水平分別為(65.02±1.58)×109/L、(63.25±2.64)×109/L、(155.36±4.89)×109/L、(161.36±6.15)×109/L，單一聚集組血小板計(jì)數(shù)水平分別為(63.21±1.05)×109/L、(162.15±10.35)×109/L、(161.22±8.22)×109/L、(163.25±7.69)×109/L。

單一聚集組中血小板與EDTA-K2抗凝劑均發(fā)生聚集現(xiàn)象，且EDTA-K2抗凝劑檢驗(yàn)血小板計(jì)數(shù)均小于枸櫞酸鈉抗凝劑、新鮮的末梢血以及手工鏡檢檢測(cè)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；枸櫞酸鈉抗凝劑、新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測(cè)的血小板計(jì)數(shù)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

多種聚集組中血小板與枸櫞酸鈉以及EDTA-K2抗凝劑均發(fā)生聚集現(xiàn)象，EDTA-K2抗凝劑、枸櫞酸鈉抗凝劑檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)水平均小于新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測(cè)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；EDTA-K2抗凝劑與枸櫞酸鈉抗凝劑檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；新鮮的末梢血與手工鏡檢檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義有(P＞0.05)。

3 討論

血小板能夠參與初期的凝血過(guò)程，可以起到凝血以及促進(jìn)止血的功能，在傷口愈合、止血、血栓形成、炎癥反應(yīng)以及術(shù)中出血等過(guò)程中均有著重要的臨床指導(dǎo)意義，而且血小板計(jì)數(shù)與許多血液病患者的病情有著密不可分的關(guān)系，對(duì)于血液病患者而言血小板計(jì)數(shù)減少需要輸入血小板進(jìn)行治療，輸入血小板也會(huì)給患者帶來(lái)了一定的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，而且輸入的過(guò)程中會(huì)誘發(fā)免疫反應(yīng)以及感染的發(fā)生，因此正確的檢測(cè)結(jié)果有著至關(guān)重要的作用。在本研究中使用全自動(dòng)功能細(xì)胞分析儀器(BC-6800型號(hào))對(duì)血小板的計(jì)數(shù)以及形態(tài)、分布等進(jìn)行分析、統(tǒng)計(jì)，并且根據(jù)不同的信號(hào)將血小板的體積分布繪制出來(lái)，使用該儀器檢測(cè)的過(guò)程中由于血小板與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測(cè)是在同一個(gè)通道中進(jìn)行檢測(cè)，故而僅能通過(guò)體積的大小進(jìn)行區(qū)別，血小板的計(jì)數(shù)容易受到紅細(xì)胞的碎片以及小紅細(xì)胞的影響，不僅如此，還有多種因素能夠引起血小板計(jì)數(shù)的減低［3］。

影響結(jié)果的因素：①采血因素：采集末梢血穿刺的部位皮膚過(guò)于冷、入針過(guò)淺、或者用力擠壓均會(huì)促使組織凝血因子混入血液標(biāo)本中，從而產(chǎn)生肉眼看不見(jiàn)的小凝血塊，血液在毛細(xì)血管中反復(fù)積壓的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，便會(huì)引起形態(tài)等的改變；②吸收的標(biāo)本量不足也是導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)減少的原因，同時(shí)也會(huì)引起白細(xì)胞以及紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)減少；③標(biāo)本未經(jīng)混勻便進(jìn)行檢測(cè)，會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的偏差出現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)減低的現(xiàn)象，采集的標(biāo)本在凝血試管中放置的時(shí)間過(guò)短，采集末梢血做血細(xì)胞分析時(shí)如果馬上進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)，則會(huì)發(fā)生血小板計(jì)數(shù)偏低的現(xiàn)象，原因是與EDTA抗凝劑混合使得血小板的形態(tài)發(fā)生變化，其外膜形成的微小管游離端向外側(cè)伸展，從而在血小板周圍形成了血小板偽足，會(huì)出現(xiàn)其相互纏繞的情況，最后形成血小板可逆聚集體，引起計(jì)數(shù)結(jié)果的降低；④大血小板影響，血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板原理設(shè)計(jì)計(jì)數(shù)閾值時(shí)，當(dāng)血小板＞30 fl，血小板會(huì)被誤認(rèn)為小紅細(xì)胞從而不進(jìn)行計(jì)數(shù)，當(dāng)血小板＜2 fl，儀器會(huì)將其作為干擾不進(jìn)行計(jì)數(shù)，也會(huì)造成檢驗(yàn)的偏差；⑤患者長(zhǎng)期使用青素、地高辛、硫酸鎂等藥物時(shí)也會(huì)引起血小板的減少，原因?yàn)樗幬锱c血漿蛋白結(jié)合形成抗原、刺激機(jī)體產(chǎn)生血小板抗體有關(guān)，這種現(xiàn)象引起的血小板減少被稱為藥源性血小板減少，通常在停藥之后的15～20 d恢復(fù)正常；⑥大量輸入血液也會(huì)造成血小板計(jì)數(shù)的減少，一般停止輸血后的4～6 d即可恢復(fù)正常；⑦抗凝劑的影響，如果要獲得可靠的檢測(cè)數(shù)值，抗凝劑是很重要的影響因素之一，抗凝劑過(guò)期或者抗凝劑的劑量不足均會(huì)引起抗凝效果的不同，從而能夠產(chǎn)生血小板的聚集，引發(fā)血小板計(jì)數(shù)的減少，該原因形成的血小板假性較少，通常沒(méi)有科室的特異性，一般與器材的購(gòu)置不合理有關(guān)，而且血標(biāo)本在試管中放置的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)引起血小板的減少［4］。

經(jīng)檢驗(yàn)，多種聚集組中血小板與枸櫞酸鈉以及EDTA-K2抗凝劑均發(fā)生聚集現(xiàn)象，EDTA-K2抗凝劑、枸櫞酸鈉抗凝劑檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)水平均小于新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測(cè)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；EDTA-K2抗凝劑與枸櫞酸鈉抗凝劑檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；新鮮的末梢血與手工鏡檢檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義有(P＞0.05)。針對(duì)應(yīng)用抗凝劑發(fā)生聚集現(xiàn)象導(dǎo)致的血小板計(jì)數(shù)減低的現(xiàn)象總結(jié)、分析其發(fā)生的原因，再根據(jù)具體的情況重新檢測(cè)，找出問(wèn)題的所在進(jìn)一步進(jìn)行研究。

針對(duì)假性血小板減低的情況進(jìn)行了如下的糾正措施：在采血的過(guò)程中先檢測(cè)抗凝試管的合格情況，機(jī)器檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)減低時(shí)應(yīng)該慎重對(duì)待，需要采集患者新鮮的末梢血再次進(jìn)行計(jì)數(shù)復(fù)檢，只有當(dāng)機(jī)器的檢測(cè)結(jié)果與手工檢測(cè)的結(jié)果相接近才能給出試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告，否則會(huì)引起醫(yī)生的誤診，加重患者的負(fù)擔(dān)［5］。

綜上所述，抽血不當(dāng)或者凝血?jiǎng)┎缓细窬鶗?huì)造成假性血小板的發(fā)生，應(yīng)該在采血后充分混勻血標(biāo)本，按照規(guī)定靜止相應(yīng)的時(shí)間再次混勻之后上機(jī)檢驗(yàn)，如果發(fā)現(xiàn)血小板降低的情況應(yīng)該慎重對(duì)待，在手工鏡檢檢測(cè)復(fù)測(cè)之后給予定論，以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確率，為臨床治療提供可靠的依據(jù)。