張元來 趙崇學(xué) 袁得光
摘? 要:筆者通過查閱文獻(xiàn)對近幾年豬瘟流行特點進(jìn)行了分析,針對豬瘟流行特點,結(jié)合臨床實踐歸納了其診斷方法,為進(jìn)一步研究豬瘟的流行病學(xué)調(diào)查和防治提供理論依據(jù)。
關(guān)鍵詞:豬瘟;流行特點;診斷方法
中圖分類號:S855 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:C 文章編號:1001-0769(2019)11-0038-03
豬瘟,又稱古典豬瘟(Classical Swine Fever,CSF),是由豬瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起的嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一,被世界衛(wèi)生組織列為A類傳染病,我國也將其列為一類傳染病[1]。1833年,該病首先發(fā)現(xiàn)于美國的俄亥俄州,呈世界性流行,以流行范圍廣、發(fā)病率和死亡率高為主要特征。該病的暴發(fā)能造成巨大的經(jīng)濟損失,嚴(yán)重影響國際貿(mào)易。
豬瘟在我國流行已有一百多年的歷史,是嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的疾病之一,每年由豬瘟所造成的經(jīng)濟損失高達(dá)100億元左右。自改革開放以來,我國普遍采用以豬瘟兔化疫苗免疫接種為主的綜合性防治措施,一度有效地控制了豬瘟在我國的大規(guī)模流行[2]。近幾年來,隨著養(yǎng)豬業(yè)的迅猛發(fā)展,CSFV仍在養(yǎng)豬場廣為流行,主要引起妊娠母豬流產(chǎn),早產(chǎn),產(chǎn)死胎、畸胎、木乃伊胎或弱仔以及仔豬腹瀉,給豬瘟的診斷和防治工作帶來了新的難題[3]。筆者通過查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn),結(jié)合臨床實踐,詳細(xì)闡述了豬瘟的流行特點及診斷方法,為進(jìn)一步研究豬瘟的流行病學(xué)和防治提供了理論依據(jù)。
1? 病原
豬瘟病毒屬于黃病毒科瘟病毒屬。本病毒主要存在于病豬的各種組織、器官和體液中,以脾臟、淋巴結(jié)、腎臟、血液及病豬的分泌物和排泄物中含毒量較高。根據(jù)毒力的強弱可以將其分為強毒株、中毒株、低毒株及無毒株。豬瘟病毒不同毒株間的毒力差異很大,強毒株能夠引起不同年齡豬的急性致死性感染,低毒株感染往往引起妊娠母豬的帶毒綜合征等。
豬瘟病毒對外界環(huán)境的抵抗力較弱。該病毒在糞便中于20 ℃能存活2周;72℃~ 76 ℃的水1 h能殺死病毒;強烈的陽光照射1~4周能殺死病毒。常用的消毒劑為:2%燒堿溶液、5%漂白粉溶液、5%~10%石灰水和3%~5%來蘇兒溶液。其中2%燒堿溶液是最合適的消毒劑。
2? 豬瘟的流行特點
2.1 流行范圍廣,流行形式發(fā)生轉(zhuǎn)變
我國是一個生豬生產(chǎn)大國,隨著我國生豬及畜產(chǎn)品加工、出口日益頻繁,豬傳染病的防控也將面臨新的、巨大的挑戰(zhàn)。在我國,豬瘟的流行范圍較廣,典型或非典型豬瘟的報道在全國各地均有發(fā)生[4],其流行形式也已經(jīng)發(fā)生了較大變化,目前已對我國的養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。呂宗吉和涂長春等[5]利用RT-PCR方法和熒光抗體染色法,檢測了我國豬瘟流行的16個省、市和自治區(qū)的48個疫點,檢測結(jié)果顯示:豬瘟的發(fā)病率高達(dá)41%~44%。陳軼霞等[6]對甘肅省1990-1999年豬瘟的發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計,結(jié)果顯示甘肅省豬瘟的發(fā)病率高達(dá)56.66%。丘惠深等[7]對我國13個省、市的29個大、中型豬場調(diào)查,結(jié)果顯示29個豬場中全部存在母豬帶毒的情況,帶毒母豬綜合征感染率為11.12%。近年來,豬瘟的流行形式已從頻繁發(fā)生的大流行轉(zhuǎn)變?yōu)榈貐^(qū)性、散發(fā)性流行,規(guī)模較小,強度也較輕[10]。
2.2 發(fā)病豬的月齡小
由于豬瘟流行形式的改變,100日齡以下,尤其是2~10日齡的哺乳仔豬和斷奶到60 d的保育豬,是該病發(fā)病的主要豬群,特點是發(fā)病急,死亡率也較高,而且發(fā)病前無明顯的臨床癥狀。100 d以上的育肥豬和種豬發(fā)病則較少[8]。
2.3 發(fā)病溫和
當(dāng)前,豬瘟在許多國家已被控制,較大規(guī)模的流行很少發(fā)生,病程也由急性變?yōu)槁赃^程,病情來勢較為緩和。近年來研究表明,豬瘟在我國的發(fā)病多以溫和型、非典型、慢性型為主,主要是引起妊娠母豬出現(xiàn)繁殖障礙綜合征(如早產(chǎn),流產(chǎn),產(chǎn)死胎、畸胎、木乃伊胎和顫抖胎等)及仔豬腹瀉。
2.4 持續(xù)性感染與免疫耐受性
據(jù)報道,感染豬瘟的豬大約有60%未呈現(xiàn)典型的臨床癥狀,而呈現(xiàn)持續(xù)性感染及亞臨床感染。即繁殖母豬感染了野毒或低毒力的病毒,由于其具有較強的抵抗力,不呈現(xiàn)臨床癥狀,但卻源源不斷地向外界環(huán)境排毒或者通過胎盤將病毒傳染給胎兒。
通過研究發(fā)現(xiàn),感染豬瘟病毒的母豬會發(fā)生所謂的“母豬帶毒綜合征”,其數(shù)量可達(dá)到妊娠母豬的43%。由于母豬的這種持續(xù)性感染,其所生的仔豬或其他被感染的仔豬會出現(xiàn)先天性的免疫耐受。當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生變化時,豬瘟?xí)竺娣e流行。
2.5 繼發(fā)感染與混合感染
近年來,我國在豬瘟的防控方面面臨著混合感染與繼發(fā)感染的雙重挑戰(zhàn)。它們往往引起患病豬的病情復(fù)雜化,發(fā)病率和死亡率升高,且防治效果不顯著,最終多以死亡而告終。如豬瘟與豬肺疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征、豬弓形蟲病、豬鏈球菌病、豬白肌病、豬水腫病和仔豬副傷寒等發(fā)生混合感染,導(dǎo)致其臨床癥狀呈現(xiàn)多樣化、病理變化復(fù)雜化,從而增加了豬瘟診斷與防治的難度。
3 豬瘟的實驗室診斷方法
3.1血清學(xué)診斷
血清學(xué)診斷包括酶聯(lián)免疫吸附試驗、正向間接血凝試驗、免疫熒光組化試驗、瓊脂糖擴散試驗等,其具有以下優(yōu)缺點:
3.1.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗
酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是現(xiàn)在使用最廣的檢測手段,具有靈敏度高、特異性強、操作簡單和檢測時間短等優(yōu)點,常用于規(guī)?;i場的檢測,在疫苗免疫效果的評定、疾病的防制等方面發(fā)揮著重要的作用。近年來,隨著檢驗醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展,新的方法技術(shù)不斷發(fā)展和更新,廣泛應(yīng)用于豬瘟的檢測,如Dot-ELISA、BAS-ELISA等方法。研究人員通過在大腸桿菌中表達(dá)豬瘟病毒的E2基因,經(jīng)純化后作為包被抗原,建立了檢測豬瘟抗體的間接ELISA方法。結(jié)果表明該方法具有特異性高、易純化和成本低等特點。研究人員以桿狀病毒作為載體表達(dá)了豬瘟病毒的重組E2蛋白,以其作為包被抗原,建立了重組E2蛋白競爭抑制ELISA(CI-ELISA)方法,該方法操作簡便、快速,可以用于大量樣本的檢測和流行病學(xué)監(jiān)測。
目前用于檢測豬瘟抗體的ELISA試劑盒已經(jīng)比較成熟,在基層和市、縣級實驗室都得到了很好的運用。但是,用于檢測豬瘟抗原的ELISA試劑盒仍然存在敏感性不高、非特異性強的問題,對于溫和型豬瘟與持續(xù)性帶毒豬的檢測還存在一定的問題。
3.1.2 免疫熒光法
免疫熒光法是豬瘟的常用診斷方法,可用于檢測病豬內(nèi)臟器官是否存在豬瘟病毒,對豬瘟的早期診斷具有十分重要的意義。其具有操作簡單、快速、結(jié)果可靠、成本低等優(yōu)點。因此,目前許多國家將它作為執(zhí)行豬瘟消滅計劃的主要診斷試驗之一。采用免疫熒光法凈化豬瘟已經(jīng)在一些豬場取得成功。
3.1.3 間接血凝試驗
間接血凝試驗(Indirect Hemagglutination,IHA)具有操作簡便、快捷等優(yōu)點,可用于免疫抗體的檢測,但敏感性較低。采用IHA方法和Dot-ELISA方法可檢測仔豬血清中的母源抗體含量。結(jié)果表明:IHA方法比Dot-ELISA方法更能客觀地反映仔豬早期體內(nèi)的母源抗體水平,可用于檢測仔豬體內(nèi)的母源抗體水平的高低及評價疫苗的免疫效果。
目前,可用于豬瘟檢測的血清學(xué)診斷方法還包括中和試驗、免疫膠體金技術(shù)等,但這些方法的一些缺點給推廣應(yīng)用帶來了極大的難度,應(yīng)用不廣。
3.2 分子生物學(xué)診斷
3.2.1 反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)
RT-PCR是發(fā)展最早的一種診斷技術(shù),具有操作簡單快捷、特異性強、敏感度高、重復(fù)性好等優(yōu)點,可用于豬瘟病毒的檢測,能達(dá)到快速檢測的目的。采用RT-PCR方法對廣西19個豬場的58份疑似豬瘟病料進(jìn)行了檢測,結(jié)果顯示:陽性數(shù)為34份,陽性率為58.62%。采用RT-PCR方法檢測了廣西地區(qū)的135份疑似豬瘟病料,結(jié)果表明:陽性數(shù)為84份,陽性率為62.20%。
3.2.2 熒光定量PCR技術(shù)
熒光定量PCR方法是近幾年逐步發(fā)展起來的一種核酸定量技術(shù),具有檢測準(zhǔn)確、特異性強、靈敏度高等優(yōu)點,可用于核酸的檢測,在病毒的定性和定量方面都有較好的效果。
3.2.3 核酸探針技術(shù)
核酸探針技術(shù)是在分子標(biāo)記的基礎(chǔ)上建立的一種診斷技術(shù),具有準(zhǔn)確性高、特異性強的優(yōu)點,可用于豬瘟的診斷,但是該方法診斷費用過高。
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