梁劍鋒　廖揚(yáng)勛　陸倩文　余文潮　廖子慧　黃鉅明　倪文麗

[摘要]目的 了解人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒（HTLV）在肇慶市無(wú)償獻(xiàn)血人群中的感染情況。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法對(duì)2016年3月14日～2018年12月20日肇慶市中心血站獻(xiàn)血的全部獻(xiàn)血者112 742例做抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ篩檢，對(duì)篩檢中發(fā)現(xiàn)的反應(yīng)性（S/CO≥1）標(biāo)本送廣州血液中心先用化學(xué)發(fā)光法，再用核酸試驗(yàn)（PCR）或免疫印跡（WB）檢測(cè)確認(rèn)并確定HTLV亞型。結(jié)果 用ELISA方法共檢測(cè)出67例HTLV-Ⅰ/Ⅱ陽(yáng)性，初篩陽(yáng)性率為0.06%，將67例標(biāo)本送廣州血液中心確證，結(jié)果均為陰性。陽(yáng)性組的光密度（OD）值為0.449，陰性組的OD值為0.328，兩組的OD值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 從目前檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，暫未發(fā)現(xiàn)肇慶市無(wú)償獻(xiàn)血人群中HTLV感染陽(yáng)性。

[關(guān)鍵詞]人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒;無(wú)償獻(xiàn)血人群;感染

[中圖分類號(hào)] R511? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721（2019）10（c）-0135-03

[Abstract] Objective To investigate the infection of human T-lymphocytic leukemia virus （HTLV） in blood donors in Zhaoqing. Methods Screening of 112 742 voluntary blood donation samples were collected， from March 14， 2016 to December 20， 2018 in Zhaoqing Central Blood Station. All the samples were performed anti-HTLV-Ⅰ/Ⅱ by ELISA. The positive samples （S/CO≥1） found in screening procedure were sent to Guangzhou Blood Center were screened by chemiluminescence then were further verified by polymerase chain reaction （PCR） and Western blot （WB）. Results A total of 67 HTLV-Ⅰ/Ⅱ positive cases were detected by ELISA. The positive rate of primary screening was 0.06%. The 67 samples were sent to Guangzhou Blood Center for confirmation and the results were negative. The OD value of positive group was 0.449， while that of negative group was 0.328. There was no significant difference in OD value between the two groups （P>0.05）. Conclusion According to the current test results， we find no positive HTLV infection in the voluntary blood donors in Zhaoqing.

[Key words] Human T-cell lymphotropic virus; Voluntary unpaid blood donors; Infection

人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒（HTLV）是20世紀(jì)80年代初發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)人類逆轉(zhuǎn)錄病毒，主要有Ⅰ型（HTLV-Ⅰ）和Ⅱ型（HTLV-Ⅱ）之分。其中HTLV-Ⅰ在加勒比海地區(qū)、南美東北部、日本西南部以及非洲的某些地區(qū)呈地方性流行。HTLV-Ⅱ在美國(guó)黑人、印第安人及歐洲等靜脈吸毒者中流行。HTLV的傳播方式類似HIV，可通過(guò)輸血、性接觸、共用針頭、胎盤(pán)和哺乳等途徑傳播。我國(guó)是HTLV低流行地區(qū)，福建、廣東、廣西和浙江等沿海地區(qū)的流行率會(huì)高于其他內(nèi)陸地區(qū)。絕大部分的HTLV感染者是長(zhǎng)期無(wú)癥狀的，HTLV-Ⅰ可引起T淋巴細(xì)胞白血病/淋巴瘤、熱帶痙攣性截癱/HTLV-Ⅰ相關(guān)性脊髓病等[1]，是一種慢性進(jìn)行性神經(jīng)系統(tǒng)紊亂。此外，HTLV-Ⅰ感染還與其他多種疾病有關(guān)，如葡萄膜炎（眼色素層炎）、慢性炎癥性關(guān)節(jié)炎、感染性皮炎、Sjogren綜合癥、多發(fā)性肌炎、支氣管肺病、口腔病變（阿菲他口炎、口唇皰疹和非尖銳濕疣）等。HTLV-Ⅱ感染除能引起神經(jīng)系統(tǒng)疾病外，還可能與血細(xì)胞白血病有關(guān)。為了解肇慶市無(wú)償獻(xiàn)血人群HTLV感染情況，肇慶市中心血站對(duì)抽取的112 742份無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本采用ELISA法檢測(cè)HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體，并統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

肇慶市中心血站2016年3月14日～2018年12月20日共112 742例無(wú)償獻(xiàn)血者，皆符合GB18467-2011版《獻(xiàn)血者健康檢查要求》。采用EDTA-K2抗凝的真空采血管留取5 ml血液標(biāo)本用作ELISA檢測(cè)。本研究經(jīng)本血站醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2試劑與儀器

HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體檢測(cè)試劑盒（北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)為T20180403B、T20180302B等），試劑均在有效期內(nèi)使用，TECAN全自動(dòng)加樣器處理系統(tǒng)（FREEDOM EVO，瑞士TECAN公司），全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)（BEP，德國(guó)西門子公司），SUNRISE酶標(biāo)儀（TECAN，瑞士TECAN公司）。

1.3方法

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法，試劑由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司提供。臨界值（Cut-off）=陰性對(duì)照孔均值+0.18。標(biāo)本光密度（OD）值與Cut-off的比值（S/CO）≥1.0為陽(yáng)性，<1為陰性。獻(xiàn)血后采集的血樣，經(jīng)血站進(jìn)行HTLV抗體檢測(cè)，若初次檢測(cè)為陽(yáng)性，再取原標(biāo)本及其辮子進(jìn)行雙孔復(fù)查，若均為陰性，則判定為陰性;若至少一孔為陽(yáng)性，進(jìn)一步送廣州血液中心進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)包括兩個(gè)方面：先用化學(xué)發(fā)光法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，若為陰性即為陰性，若為陽(yáng)性進(jìn)一步檢測(cè)，一是檢測(cè)白細(xì)胞中是否含有HTLV的核酸，二是用免疫印跡方法檢測(cè)血漿中HTLV抗原，這兩種方法有一種為陽(yáng)性的，即為HTLV陽(yáng)性。所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行（圖1）。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布的改用中位數(shù)表示，兩組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)（秩和檢驗(yàn)），以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 ELISA檢測(cè)結(jié)果

11 242份獻(xiàn)血者標(biāo)本共篩查出抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ67份標(biāo)本的OD值分布如圖2，篩查陽(yáng)性反應(yīng)率為0.06%。

2.2初篩反應(yīng)性標(biāo)本的確證結(jié)果

所有初篩反應(yīng)性的標(biāo)本進(jìn)一步做化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)，經(jīng)化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)為陽(yáng)性的再進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)。經(jīng)化學(xué)發(fā)光確認(rèn)為陽(yáng)性的有9份標(biāo)本，這9份標(biāo)本的人口學(xué)資料如表1，進(jìn)一步做確證后，9份標(biāo)本結(jié)果都為陰性。

2.3流行病學(xué)調(diào)查

67份初篩反應(yīng)性的獻(xiàn)血者中有61例均為廣東籍人士，只有6例為外來(lái)人士，多次獻(xiàn)血者為32例，首次獻(xiàn)血的為35例，男42例，女25例，將這67份初篩反應(yīng)性的標(biāo)本分成化學(xué)發(fā)光陽(yáng)性（9份，其OD值為0.449）和陰性（58份，其OD值為0.328）兩組，兩者比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=1.729，P=0.089）。

3討論

HTLV廣泛分布于全世界，其主要傳播途徑包括輸血傳播、性傳播和母嬰傳播。美國(guó)的HTLV篩查感染率為0.025%，但考慮到危害性，美國(guó)從1988年開(kāi)始把HTLV-Ⅰ列入常規(guī)篩查項(xiàng)目。加勒比海地區(qū)為高流行區(qū)，HTLV抗體陽(yáng)性率高達(dá)2%～12%。日本是HTLV-Ⅰ的高流行區(qū)域，1984年即開(kāi)始在獻(xiàn)血者中篩查HTLV-Ⅰ并持續(xù)至今[2]，日本不同地區(qū)的感染率0.66%～1.02%[3]。臺(tái)灣地區(qū)也把HTLV列入了常規(guī)篩查項(xiàng)目，HTLV-Ⅰ的流行率為0.5%～0.9%。歐洲的人群整體感染率較低，僅個(gè)別國(guó)家有少數(shù)感染者。英國(guó)的感染率為0.001%～0.55%[4]，法國(guó)為0.002%～0.035%。英國(guó)和法國(guó)把HTLV列為篩查項(xiàng)目。挪威在1998年篩查了33 000例獻(xiàn)血者發(fā)現(xiàn)了1例HTLV-Ⅱ陽(yáng)性，并于2000年開(kāi)始全面篩查，但是至2006年未再發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性，于2007年停止了HTLV篩查。芬蘭也于2008年停止了HTLV篩查。雖然我國(guó)是HTLV低流行地區(qū)，但已有部分地區(qū)報(bào)道獻(xiàn)血者中存在HTLV無(wú)癥狀感染者，有報(bào)道顯示在福建、廣東、廣西和浙江等沿海地區(qū)的流行率會(huì)高于其他地區(qū)。2014年林鐵輝等[5]報(bào)道了福建莆田地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血人群HTLV感染情況，確認(rèn)陽(yáng)性率為0.101%。漳州市無(wú)償獻(xiàn)血人群確認(rèn)陽(yáng)性率為0.005%[6];蘇州市無(wú)償獻(xiàn)血人群確認(rèn)陽(yáng)性率為0.0039%[7];而合肥、洛陽(yáng)、重慶、天津市等內(nèi)陸地區(qū)經(jīng)確認(rèn)均無(wú)HTLV陽(yáng)性獻(xiàn)血者[8-11]，本市目前沒(méi)有發(fā)現(xiàn)HTLV陽(yáng)性獻(xiàn)血者，肇慶市遠(yuǎn)離沿海地區(qū)，為HTLV低流行地區(qū)或非流行區(qū)域。但我省的廣州地區(qū)獻(xiàn)血者HTLV的確認(rèn)陽(yáng)性率為0.02%[12]，佛山地區(qū)的確認(rèn)陽(yáng)性率為0.003%[13]，中山確認(rèn)陽(yáng)性率為0.0024%[14]，肇慶與廣州、佛山、中山等地處珠三角地區(qū)，交通方便人口流動(dòng)頻繁，也不能掉以輕心。廣東省要求2016年3月1日前全省開(kāi)展獻(xiàn)血者HTLV篩查檢測(cè)。肇慶地區(qū)112 742份獻(xiàn)血者標(biāo)本中檢出抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ6反應(yīng)性標(biāo)本67份，后經(jīng)廣州血液中心確認(rèn)后，有9份為化學(xué)發(fā)光陽(yáng)性，但經(jīng)核酸確認(rèn)均為陰性，初篩陽(yáng)性率為0.06%，67例HTLV-Ⅰ/Ⅱ有6份抗體初篩結(jié)果呈陽(yáng)性，確證結(jié)果呈陰性的獻(xiàn)血者，仍存在傳播HTLV的風(fēng)險(xiǎn)，無(wú)癥狀HTLV病毒攜帶者成為固定獻(xiàn)血者反復(fù)獻(xiàn)血，經(jīng)血液傳播HTLV病毒風(fēng)險(xiǎn)將被數(shù)倍放大，將對(duì)血液安全和受血者的健康產(chǎn)生嚴(yán)重危害，因此有效預(yù)防HTLV經(jīng)血液傳播的方法是及時(shí)發(fā)現(xiàn)HTLV感染的獻(xiàn)血者，并采取措施阻止其獻(xiàn)血，切斷HTLV傳播途徑，建議肇慶地區(qū)常規(guī)開(kāi)展檢測(cè)HTLV-Ⅰ/Ⅱ型抗體。另外文獻(xiàn)報(bào)道濾除白細(xì)胞的血液制品可大幅降低感染HTLV的風(fēng)險(xiǎn)[15]。

綜上所述，肇慶市為HTLV低流行區(qū)或非流行區(qū)域，但結(jié)合國(guó)家和省的相關(guān)檢測(cè)要求，常規(guī)開(kāi)展HTLV-Ⅰ/Ⅱ型抗體的檢測(cè)，可有效預(yù)防或減少HTLV-Ⅰ/Ⅱ經(jīng)輸血傳播，保證血液質(zhì)量安全，另外常規(guī)對(duì)血液制品進(jìn)行濾白處理。

[參考文獻(xiàn)]

[1]鄧詩(shī)楨，謝敬文，嚴(yán)康峰，等.廣州獻(xiàn)血人群HTLV流行狀況初步調(diào)查[J].遼寧醫(yī)學(xué)雜志，2016，30（2）：14.

[2]Marano G，Vaglio S，Pupella S，et al.Human T-lymphotropic virus and transfusion safety does one size fit all[J].transfusion，2016，56（1）：249-260.

[3]Satake M，Yamaguchi K，Tadokoro K.Current prevalence of HTLV-Ⅰ in Japan as determined by screening of blood donors[J].J Med Virol，2012，84（2）：327-335.

[4]Vrielink H，Reesink HW.HTLV-Ⅰ/Ⅱ prevalence in different geographic location[J].Transfusion Med Rev，2004，18（1）：46-57.

[5]林鐵輝，許海.莆田地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血人群HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染調(diào)查與分析[J].中國(guó)輸血雜志，2014，27（7）：754-756.

[6]張麗云.漳州市無(wú)償獻(xiàn)血者HTLV感染狀況分析[J].黑龍江醫(yī)藥，2016，29（6）：1097-1099.

[7]江妮娜，董麗，鄭雪瓊，等.蘇州市無(wú)償獻(xiàn)血人群HTLV篩查情況及分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017，38（1）：133-134.

[8]程衛(wèi)芳，周學(xué)勇，楊斌，等.合肥地區(qū)獻(xiàn)血人群HTLV篩查情況及分析[J].中國(guó)輸血雜志，2017，30（3）：229-230.

[9]陳善華，朱麗莉，李慧曉，等.洛陽(yáng)地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血人群中HTLV感染情況調(diào)查[J].中國(guó)輸血雜志，2018，31（8）：874-876.

[10]代華友，楊俊鴻，陳政，等.重慶市無(wú)償獻(xiàn)血人群人類噬T淋巴細(xì)胞病毒感染狀況調(diào)查研究[J].云南醫(yī)藥，2017，38（4）：370-372.

[11]趙瑛，李雙玉，安仕萍，等.天津地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血人群HTLV感染情況調(diào)查研究[J].臨床血液學(xué)雜志，2017，30（2）：129-130.

[12]謝麗娥，廖峭.廣州地區(qū)輸血傳播人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒的風(fēng)險(xiǎn)研究[J].廣東醫(yī)學(xué)，2018，39（S1）：175-177.

[13]林俊填，伍偉健，盧瑾，等.佛山市無(wú)償獻(xiàn)血者人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒感染情況調(diào)查[J].國(guó)際輸血及血液學(xué)雜志，2017，40（5）：403-407.

[14]何銳洪，袁文聲，詹宗偉，等.廣東中山地區(qū)獻(xiàn)血人群人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒感染狀況調(diào)查[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017，38（12）：1628-1633.

[15]Cesaire R，Kerob-bauchet B，Bourdonne O，et al，Evaluation of HTLV-I removal by filtracion of blood cell components in aroutine setting[J].Transfusion，2004，44（1）：42-48.

（收稿日期：2019-01-18? 本文編輯：崔建中）