王曉玲 張萍

摘 ?????要：實(shí)驗(yàn)研究了在pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl緩沖液中，鹽酸地爾硫卓與伊紅可形成穩(wěn)定的電荷轉(zhuǎn)移絡(luò)合物，據(jù)此建立了鹽酸地爾硫卓荷移光度分析的新方法。絡(luò)合物最大吸收波長為550 nm，表觀摩爾吸光系數(shù)為4.61×104 L·mol-1·cm-1，其線性方程為Y = 0.488 3X+0.024 5， 相關(guān)系數(shù)，R=0.999 8，鹽酸地爾硫卓的量在1.5～7.5 mg·L-1質(zhì)量濃度范圍內(nèi)符合朗伯比爾定律，該法選擇性和重現(xiàn)性好，靈敏度較高，可用于快速檢測藥品中鹽酸地爾硫卓的含量。

關(guān) ?鍵 ?詞：鹽酸地爾硫卓;伊紅;荷移光度法

中圖分類號：O 657.32 ??????文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ???文章編號： 1671-0460（2019）01-0218-03

Abstract：A novel spectrophotometric method for the determination of diltiazem hydrochloride was established based on the charge transfer reaction between diltiazem hydrochloride and eosin Y in pH=3.6 potassium hydyogen phthalate-HCl. The results showed that the apparent molar absorptivity of the color complex was 4.61×104 L·mol-1·cm-1 at 550 nm. The linear regression equation was Y=0.488 3X+0.024 5， the correlation coefficient was 0.999 8， the adsorption conformed to Lambert-Beer law in the range of 1.5～7.5 mg·L-1.The method is simple， rapid， high sensitive and suitable for determination of diltiazem hydrochioride content in medicine.

Key words： Diltiazem hydrochloride; Eosin Y; Charge-transfer spectrophotometric method

鹽酸地爾硫卓是一類典型高選擇性的苯并硫氮卓類鈣拮抗劑（又名合心爽），具有優(yōu)良的藥效學(xué)特點(diǎn)和廣泛的臨床適應(yīng)性，主要用于治療冠心病、高血壓、心律失常、勞力型心絞痛等。目前，鹽酸地爾硫卓的分析方法相對較少，主要有流動(dòng)注射-化學(xué)發(fā)光法[1]、高效液相色譜法[2，3]、反相高效液相色譜法[4，5]、荷移分光光度法[6]等。伊紅和鹽酸地爾硫卓的荷移反應(yīng)研究鮮見報(bào)道。研究發(fā)現(xiàn)伊紅分子中由于溴取代基的強(qiáng)誘導(dǎo)效應(yīng)，使得苯環(huán)平面成為缺電子體系，可以作為電子接受體，鹽酸地爾硫卓分子中叔氨基上的氮原子含有孤對電子可以作為電子給予體，在此理論基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)二者的荷移反應(yīng)介質(zhì)不同于文獻(xiàn)中報(bào)道的基本上都是有機(jī)溶劑，而是可在鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）緩沖介質(zhì)中發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移反應(yīng)，形成新的絡(luò)合物分子，此荷移反應(yīng)的靈敏度相對較高，據(jù)此建立了荷移光度法測定鹽酸地爾硫卓的分析方法，測定了鹽酸地爾硫和伊紅的絡(luò)合比為1∶1，初步探討了鹽酸地爾硫和伊紅的反應(yīng)機(jī)理，方法用于測定藥品中鹽酸地爾硫卓的含量，結(jié)果滿意。

1 ?實(shí)驗(yàn)部分

1.1 ?主要儀器與試劑

鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）緩沖溶液。1.2 ?實(shí)驗(yàn)方法用兩只刻度相同的25 mL具塞比色管，分別加入伊紅溶液1.5 mL，pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl緩沖溶液1.0 mL， 向其中一支加入一定量的鹽酸地爾硫卓溶液，另一支不加，用去離子水稀釋至10 mL，搖勻，放置在40 ℃水浴中加熱15 min，取出后用自來水迅速冷卻15 min。以試劑空白為參比，用1 cm比色皿在分光光度計(jì)上，在550 nm處測定吸光度值A(chǔ)。

2 ?結(jié)果與討論

2.1 ?吸收曲線

按照實(shí)驗(yàn)方法，測定不同波長下的吸光度A0和吸光度A，作出吸收光譜圖。如圖1所示，鹽酸地爾硫卓在可見光區(qū)沒有吸收，伊紅的最大吸收波長為518 nm鹽酸地爾硫卓能與伊紅反應(yīng)生成電荷轉(zhuǎn)移絡(luò)合物的最大吸收波長550 nm，荷移絡(luò)合物的最大吸收波長比試劑空白的最大吸收波長紅移了32 nm。實(shí)驗(yàn)選擇測定550 nm為測定波長。

1： 伊紅+鄰苯二甲酸氫鉀（pH=3.6）

2： 伊紅+鄰苯二甲酸氫鉀（pH=3.6）+鹽酸地爾硫卓

2.2 ?反應(yīng)條件的選擇

2.2.1 ?最佳介質(zhì)條件

按照實(shí)驗(yàn)方法，試驗(yàn)了KCl-HCl（pH=1.7）、鄰苯二甲酸氫鉀-HCl（pH=3.6）、NaAc-HAc（pH=4.2）、鄰苯二甲酸鹽（pH=5.6）、Na2HPO4-NaH2PO4（pH=6.2）、NH3·H2O-NH4Cl（pH=8.0）、硼砂-NaOH（pH=9.8）、NaHCO3-NaOH（pH=11.0） 、KCl-NaOH（pH=13.0）、甲醇、乙醇、丙酮等體系對反應(yīng)的影響。結(jié)果表明：在堿性介質(zhì)里，反應(yīng)體系基本上沒有色差，而在中性與酸性介質(zhì)中出現(xiàn)了比較明顯的色差，且在pH為3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl的緩沖溶液中的顏色對比最為明顯。 選擇pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl作為反應(yīng)介質(zhì)

2.2.2 ?緩沖溶液的用量

改變鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）的用量，如圖2所示，當(dāng)鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）用量在1.0 mL的A值最大且穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)選擇鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）的最佳用量為1.0 mL。

2.2.3 ?伊紅的用量

改變伊紅的用量，如圖3所示，當(dāng)伊紅用量在1.5 mL時(shí)反應(yīng)進(jìn)行完全，吸光度A值達(dá)到最大，在增加伊紅的用量，吸光度慢慢減小，靈敏度降低，實(shí)驗(yàn)選擇伊紅的最佳用量為1.5 mL。

2.2.4 ?反應(yīng)溫度

按照實(shí)驗(yàn)方法，分別試驗(yàn)了20， 30，40， 50 ，60℃不同溫度對實(shí)驗(yàn)測定的影響，結(jié)果表明，反應(yīng)在升到40 ℃時(shí)吸光度達(dá)最大且穩(wěn)定，溫度大于40 ℃時(shí)吸光度逐漸減小，實(shí)驗(yàn)選擇反應(yīng)溫度為40 ℃。

2.2.5 ?反應(yīng)時(shí)間

實(shí)驗(yàn)考察了反應(yīng)時(shí)間分別為5、10、15、20、25、30、35 min時(shí)對吸光度值的影響，結(jié)果顯示反應(yīng)進(jìn)行15 min 時(shí)吸光度值基本穩(wěn)定， 實(shí)驗(yàn)選擇加熱時(shí)間為15 min，迅速冷卻15 min后測定。

2.2.6 ?反應(yīng)順序

按照實(shí)驗(yàn)方法，對0.05 mg·10 mL-1鹽酸地爾硫卓進(jìn)行測定，變換添加反應(yīng)物的順序，其吸光度測定結(jié)果如表1所示。

2.3 ?工作曲線和檢出限

按照實(shí)驗(yàn)方法對鹽酸地爾硫卓標(biāo)準(zhǔn)溶液系列進(jìn)行測定，結(jié)果表明：鹽酸地爾硫卓的質(zhì)量濃度在1.5～7.5 mg·L-1范圍內(nèi)與A呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性回歸方程Y=0.488 3X+0.024 5， 相關(guān)系數(shù)R=0.999 8，表觀摩爾吸光系數(shù)為4.61×104 L·mol-1·cm-1。按照實(shí)驗(yàn)方法測定空白溶液11次，以3倍的標(biāo)準(zhǔn)偏差除以斜率計(jì)算方法的檢出限為4.6×10-2 mg·L-1

2.4 ?干擾離子

按照實(shí)驗(yàn)方法對4.5 mg·L-1鹽酸地爾硫卓進(jìn)行測定，在±5%的相對誤差范圍內(nèi)，考察了藥物賦形劑與常見的離子對該反應(yīng)的干擾情況。實(shí)驗(yàn)表明，1 300倍的蔗糖、130倍的乳糖、110倍的淀粉、、90倍的葡萄糖、900倍的氯化鈉、300倍的K+、220倍的SO4-、20倍的NO3-和均不干擾測定。

2.5 ?測定鹽酸地爾硫卓與伊紅的絡(luò)合比

采用等摩爾連續(xù)變換法和摩爾比法測定鹽酸地爾硫卓與伊紅生成的電荷轉(zhuǎn)移絡(luò)合物的組成比為1∶1。

2.6 ?反應(yīng)機(jī)理的探討

鹽酸地爾硫卓中的氮原子上有一對孤對電子，可作為 n-電子給予體; 伊紅是一平面缺電子體系，可作為電子接受體，鹽酸地爾硫卓與伊紅反應(yīng)，可形成1∶1的 n-π電荷轉(zhuǎn)移絡(luò)合物，根據(jù)其絡(luò)合比推測鹽酸地爾硫卓與伊紅反應(yīng)機(jī)理如下：

2.7 ?精密度試驗(yàn)

按照實(shí)驗(yàn)方法測定對4.5 mg·L-1的鹽酸地爾硫卓標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，6次測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.84%，表明方法的精密度較好

2.8 ?樣品分析

取鹽酸地爾硫卓藥片（標(biāo)示量30 mg /片）10片，準(zhǔn)確稱量后研細(xì)混勻，求得每片的平均質(zhì)量，準(zhǔn)確稱取相當(dāng)于半片的質(zhì)量用水溶解定容到250 mL的容量瓶中，過濾，移取適量的濾液按照實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測定，平行： 測定6次。測定結(jié)果如表2。

3 ?結(jié) 論

工作建立了荷移光度法測定鹽酸地爾硫卓的含量，方法準(zhǔn)確、簡便、靈敏度較高、選擇性和重現(xiàn)性較好、可用于藥片中鹽酸地爾硫卓含量的測定。

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