黃榮

（海門(mén)市第四人民醫(yī)院 江蘇 海門(mén) 226141）

近年臨床上可使用的固定液較多，但均存在一定的局限性，同時(shí)HE染色的質(zhì)量也存在不同，故而本次研究中采用不同固定液對(duì)280例冷凍組織病理切片做HE染色，旨在比較其HE染色質(zhì)量以及相關(guān)情況。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇的280例組織主要源自甲狀腺和胃、乳腺以及腸、肺、腦、子宮、平滑肌等，均是患者活檢、術(shù)后遺留的組織；資料源自我院2016年1月—2018年12月檢測(cè)的280例冷凍組織病理切片，隨機(jī)將280例對(duì)象分成對(duì)照組和觀察組各140例：對(duì)照組男性患者83例和女性患者57例，年齡19～63歲、平均（35.8±5.6）歲；觀察組男性患者81例和女性患者59例，年齡21～62歲、平均（35.2±5.4）歲。兩組一般資料比較無(wú)差異，P＞0.05，有可比性。

1.2 方法

對(duì)照組：常規(guī)試劑采用的是二甲苯和無(wú)水乙醇、分化液、含汞蘇木素以及伊紅等，HE染色根據(jù)規(guī)定步驟進(jìn)行。

觀察組：新型試劑采用的是環(huán)保試劑，把140例患者的病理組織切片后，將其用無(wú)苯切片脫蠟液I和Ⅱ各處理5min，隨后再用Ⅲ號(hào)脫蠟液將其處理10min；采用無(wú)水乙醇I將其處理1min，并用Ⅱ號(hào)再處理1min，隨后以95%和85%的乙醇將其處理10s；將病理組織放在自來(lái)水龍頭下將其緩流清洗1min，之后采用蘇木素穩(wěn)定劑將其再處理30s，再者是用蘇木素染色液將其處理9min，用自來(lái)水將其再進(jìn)行緩流沖洗1min；隨即用0.5%分化液將其處理2s，并再次用自來(lái)水緩流清洗1min；再用返藍(lán)染色液將其處理5s，并用自來(lái)水對(duì)其緩流清洗1min；用伊紅染色液將其處理2min，再用自來(lái)水緩流清洗5s；以85%的乙醇將其處理5s，并用95%的乙醇將其再處理10s；隨后再用無(wú)水乙醇I和Ⅱ?qū)?biāo)本各處理10s；隨后再用無(wú)苯切片透明液I對(duì)其進(jìn)行20s的處理，Ⅱ號(hào)液體再處理1min，Ⅲ號(hào)液體再處理2min；上述各項(xiàng)操作完成后則將標(biāo)本濕封。

1.3 觀察指標(biāo)和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

選取的280例患者病理組織標(biāo)本均采用LED型光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察，用MRNN型高清數(shù)字顯微鏡相機(jī)對(duì)CCD圖像進(jìn)行采集，觀察病理組織的色彩顏色及其滲透性、對(duì)比度和組織結(jié)構(gòu)等情況。HE染色質(zhì)量等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)參照[1]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件選擇SPSS24.0，性別占比和HE染色I(xiàn)級(jí)、Ⅱ級(jí)以及Ⅲ級(jí)資料用（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；年齡資料用（±s）表示，行t檢驗(yàn)；P＜0.05時(shí)，表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

相較于對(duì)照組的HE染色質(zhì)量，觀察組的色彩、對(duì)比度和滲透力以及圖像呈現(xiàn)速度比較無(wú)差異（P＞0.05）；但觀察組的HE染色圖像清晰度與對(duì)照組比較有差異，I級(jí)率和Ⅱ級(jí)率均比對(duì)照組高，差異顯著（P＜0.05）。

表 兩組冷凍組織病理切片HE染色質(zhì)量比較 （例）

3.討論

冷凍切片的質(zhì)量與切片的固定有關(guān)，常用的固定液中主要含有乙醇、貢等物質(zhì)，乙醇雖然能夠去除切片上的水分，對(duì)切片的組織結(jié)構(gòu)保存有效，但會(huì)導(dǎo)致組織切片中的球蛋白和白蛋白等物質(zhì)沉淀，這時(shí)核蛋白沉淀并會(huì)溶解在水中，造成著色異?；蛘卟患?；貢會(huì)對(duì)人體組織造成較大的破壞，極易造成切片組織出現(xiàn)黃色的氧化汞，從而影響組織病理診斷[2]。

本次采用的新型環(huán)保固定液中不含汞，切片組織可以在短時(shí)間內(nèi)著色，進(jìn)行分化后則用流水沖洗，促使組織切片快速返藍(lán)，縮短了組織著色時(shí)間。由于是采用無(wú)汞固定液，病理組織不會(huì)被破壞，固定液的穩(wěn)定性得到加強(qiáng)，消除了常規(guī)固定液的一些不足，確保了病理組織的著色質(zhì)量，同時(shí)新試劑更換時(shí)無(wú)需再做相關(guān)處理。固定液的改良，使得其中的有害物質(zhì)均被分離，不會(huì)出現(xiàn)大量揮發(fā)或者生物降解的問(wèn)題，亦不會(huì)造成病理組織標(biāo)本異常收縮，可以獲得色彩良好且對(duì)比度佳的圖像[3]。

綜上所述，新型試劑HR染色色彩對(duì)比度和滲透力以及圖像呈現(xiàn)速度與常規(guī)試劑無(wú)較大差異，但其染色圖像清晰度較高，這對(duì)病理組織的快速診斷有著積極作用。