黃榮
(海門市第四人民醫(yī)院 江蘇 海門 226141)
近年臨床上可使用的固定液較多,但均存在一定的局限性,同時HE染色的質(zhì)量也存在不同,故而本次研究中采用不同固定液對280例冷凍組織病理切片做HE染色,旨在比較其HE染色質(zhì)量以及相關情況。
選擇的280例組織主要源自甲狀腺和胃、乳腺以及腸、肺、腦、子宮、平滑肌等,均是患者活檢、術后遺留的組織;資料源自我院2016年1月—2018年12月檢測的280例冷凍組織病理切片,隨機將280例對象分成對照組和觀察組各140例:對照組男性患者83例和女性患者57例,年齡19~63歲、平均(35.8±5.6)歲;觀察組男性患者81例和女性患者59例,年齡21~62歲、平均(35.2±5.4)歲。兩組一般資料比較無差異,P>0.05,有可比性。
對照組:常規(guī)試劑采用的是二甲苯和無水乙醇、分化液、含汞蘇木素以及伊紅等,HE染色根據(jù)規(guī)定步驟進行。
觀察組:新型試劑采用的是環(huán)保試劑,把140例患者的病理組織切片后,將其用無苯切片脫蠟液I和Ⅱ各處理5min,隨后再用Ⅲ號脫蠟液將其處理10min;采用無水乙醇I將其處理1min,并用Ⅱ號再處理1min,隨后以95%和85%的乙醇將其處理10s;將病理組織放在自來水龍頭下將其緩流清洗1min,之后采用蘇木素穩(wěn)定劑將其再處理30s,再者是用蘇木素染色液將其處理9min,用自來水將其再進行緩流沖洗1min;隨即用0.5%分化液將其處理2s,并再次用自來水緩流清洗1min;再用返藍染色液將其處理5s,并用自來水對其緩流清洗1min;用伊紅染色液將其處理2min,再用自來水緩流清洗5s;以85%的乙醇將其處理5s,并用95%的乙醇將其再處理10s;隨后再用無水乙醇I和Ⅱ對標本各處理10s;隨后再用無苯切片透明液I對其進行20s的處理,Ⅱ號液體再處理1min,Ⅲ號液體再處理2min;上述各項操作完成后則將標本濕封。
選取的280例患者病理組織標本均采用LED型光學顯微鏡進行觀察,用MRNN型高清數(shù)字顯微鏡相機對CCD圖像進行采集,觀察病理組織的色彩顏色及其滲透性、對比度和組織結構等情況。HE染色質(zhì)量等級劃分標準參照[1]。
統(tǒng)計學軟件選擇SPSS24.0,性別占比和HE染色I級、Ⅱ級以及Ⅲ級資料用(%)表示,行χ2檢驗;年齡資料用(±s)表示,行t檢驗;P<0.05時,表示差異有統(tǒng)計學意義。
相較于對照組的HE染色質(zhì)量,觀察組的色彩、對比度和滲透力以及圖像呈現(xiàn)速度比較無差異(P>0.05);但觀察組的HE染色圖像清晰度與對照組比較有差異,I級率和Ⅱ級率均比對照組高,差異顯著(P<0.05)。
表 兩組冷凍組織病理切片HE染色質(zhì)量比較 (例)
冷凍切片的質(zhì)量與切片的固定有關,常用的固定液中主要含有乙醇、貢等物質(zhì),乙醇雖然能夠去除切片上的水分,對切片的組織結構保存有效,但會導致組織切片中的球蛋白和白蛋白等物質(zhì)沉淀,這時核蛋白沉淀并會溶解在水中,造成著色異?;蛘卟患眩回晻θ梭w組織造成較大的破壞,極易造成切片組織出現(xiàn)黃色的氧化汞,從而影響組織病理診斷[2]。
本次采用的新型環(huán)保固定液中不含汞,切片組織可以在短時間內(nèi)著色,進行分化后則用流水沖洗,促使組織切片快速返藍,縮短了組織著色時間。由于是采用無汞固定液,病理組織不會被破壞,固定液的穩(wěn)定性得到加強,消除了常規(guī)固定液的一些不足,確保了病理組織的著色質(zhì)量,同時新試劑更換時無需再做相關處理。固定液的改良,使得其中的有害物質(zhì)均被分離,不會出現(xiàn)大量揮發(fā)或者生物降解的問題,亦不會造成病理組織標本異常收縮,可以獲得色彩良好且對比度佳的圖像[3]。
綜上所述,新型試劑HR染色色彩對比度和滲透力以及圖像呈現(xiàn)速度與常規(guī)試劑無較大差異,但其染色圖像清晰度較高,這對病理組織的快速診斷有著積極作用。