周建峰 朱小嬌

溫州市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測(cè)院 浙江溫州 325000

油料作物是植物油脂和蛋白質(zhì)的最重要來(lái)源，是與人類(lèi)生活息息相關(guān)的重要生活資料，在保證油脂和蛋白質(zhì)的有效供給，改善食物結(jié)構(gòu)，促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展方面具有重要作用。有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥在我國(guó)油菜上普遍使用，如樂(lè)果、倍硫磷、甲胺磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、馬拉硫磷、毒死蜱[1]等。油菜籽作為大眾食用油的最主要來(lái)源，它的農(nóng)藥殘留問(wèn)題無(wú)疑是人們迫切要求解決的大事；另外，我國(guó)與世界各國(guó)經(jīng)濟(jì)貿(mào)易的合作也促使我國(guó)必須盡快制定出符合我國(guó)國(guó)情的檢測(cè)方法，目前檢測(cè)行業(yè)中，針對(duì)植物油中有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)的前處理方法操作復(fù)雜，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，容易乳化，有時(shí)操作稍不注意會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，回收率也較低，因此有必要改進(jìn)植物油中多種有機(jī)磷的提取方法，有效優(yōu)化凈化步驟，縮短檢測(cè)時(shí)間，在保證回收率的前提下，逐漸提高檢測(cè)效率。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

試劑：乙腈、石油醚、二氯甲烷、丙酮均為色譜純；無(wú)水硫酸鈉，分析純；中性氧化鋁、石墨碳；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品物質(zhì)，包含樂(lè)果、毒死蜱、馬拉硫磷、對(duì)硫磷，均為固體標(biāo)樣，德國(guó)Dr．Ehrenstorfer。

儀器：安捷倫7890B 氣相色譜儀，帶火焰光度檢測(cè)器；LCTechFreestyleGPC 凝膠色譜儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；氮吹儀

1.2 混合標(biāo)準(zhǔn)工作液與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)配制

（1）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：分別取樂(lè)果、毒死蜱、馬拉硫磷、對(duì)硫磷的固體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)品，配成1000μg/mL。

（2）混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別移取0．1mL 各單標(biāo)儲(chǔ)備液于10mL 容量瓶中，丙酮定容，此混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為10μg/mL。

（3）標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)配制：分別移取0．05mL、0．10mL、0．20mL、0．40mL、0．80mL、1．20mL10μg/mL 的 混 合 標(biāo) 準(zhǔn) 工 作 液 定 容至10mL。各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的曲線(xiàn)濃度分別為0．05μg/mL、0．10μg/mL、0．20μg/mL、0．40μg/mL、0．80μg/mL、1．20μg/mL。

1.3 樣品處理

（1）按照GB5009．20-2003[2]方法中的第二法對(duì)植物油樣品進(jìn)行加標(biāo)回收。

（2）利用混合溶劑進(jìn)行萃取。

提?。簻?zhǔn)確稱(chēng)取5．0g 植物油樣品，用30mL 石油醚的乙腈飽和溶液將其溶解洗入分液漏斗中，然后加入40mL 乙腈的石油醚飽和溶液，劇烈振蕩萃取，靜置分層，收集下層溶液，再加入30mL乙腈的石油醚飽和溶液，進(jìn)行萃取收集乙腈相，然后濃縮，定容至10mL，等待下一步凈化。

凈化：將待凈化液轉(zhuǎn)移到GPC 凝膠色譜儀上，根據(jù)優(yōu)化后的分離凈化方法去油去雜質(zhì)，然后氮吹近干，以丙酮定容至2．0mL，以氣相色譜儀測(cè)定。

1.4 儀器分析條件

毛細(xì)管柱DB-1701（30．0m×250μm×0．25μm）；載氣：氫氣60．0mL/min，空氣60．0mL/min，氮?dú)?0．0mL/min；流速：1．0mL/min；進(jìn)樣口溫度：220℃；檢測(cè)器溫度250℃；不分流進(jìn)樣；柱溫程序：起始溫度80℃（1min），以10℃/mL 的速率升溫至250℃（8min），F(xiàn)PD 檢測(cè)器。上述條件根據(jù)操作可做適當(dāng)調(diào)整，已獲得最佳效果。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜柱的選擇

測(cè)定農(nóng)藥殘留選用的柱子極性一般中等偏下，DB-1701 極性為中性，相對(duì)于DB-5 弱極性，DB-1701 在同等條件下，目標(biāo)峰的分離度較好，同一水平濃度響應(yīng)值明顯較高，所以選擇DB-1701 毛細(xì)管柱作為檢測(cè)色譜柱[2]。

2.2 提取方法的選擇

按照GB5009．20-2003 方法中的第二法操作中的二氯甲烷萃取液自然風(fēng)干，檢測(cè)耗時(shí)較長(zhǎng)，而且容易吸附空氣中的大量水分，同時(shí)最后結(jié)果回收率偏低且不穩(wěn)定。利用混合飽和溶劑進(jìn)行萃取，極高效率的縮短了萃取過(guò)程，同時(shí)避免了樣品懸濁乳化現(xiàn)象。利用乙腈飽和的石油醚去除油脂，再利用石油醚飽和的乙腈提取有機(jī)磷，回收效果明顯。

2.3 凈化條件的選擇

GB5009．20-2003 中利用石墨碳、中性氧化鋁、以及無(wú)水硫酸鈉，通過(guò)旋渦離心進(jìn)行除色除油除水，當(dāng)檢測(cè)樣品量大時(shí)，操作會(huì)顯得繁瑣；利用florisil 固相萃取柱進(jìn)行凈化，操作可行，回收率也好；利用LCTechFreestyleGPC 凝膠色譜儀進(jìn)行凈化，可以減少實(shí)驗(yàn)操作中人工成本和時(shí)間成本，同時(shí)凈化后的回收率較高較穩(wěn)定。所以本實(shí)驗(yàn)的凈化條件采用GPC 凝膠色譜儀進(jìn)行凈化[3]。

2.4 加標(biāo)回收率

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)植物油樣品進(jìn)行了不同添加水平的多批次加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，得到部分?jǐn)?shù)據(jù)如圖表1。樂(lè)果、毒死蜱、馬拉硫磷、對(duì)硫磷的回收率平均水平大于80%，且RSD 值均處在3．5%以?xún)?nèi)，說(shuō)明該方法準(zhǔn)確度與精密度較好。

表1 利用優(yōu)化后的檢測(cè)方法得到的有機(jī)磷加標(biāo)回收率

3 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)對(duì)植物油樣品的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)研究，利用GPC 凝膠色譜儀對(duì)樣品進(jìn)行全面的凈化，再運(yùn)用優(yōu)化后的氣相色譜法對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行測(cè)定，組分分離度較好，能夠?qū)悠愤M(jìn)行準(zhǔn)確正確地定量，精密度及回收率與分析要求相符合，檢出限能夠達(dá)到GB2763-2016 要求，由此證明該方法符合檢測(cè)要求。但是有機(jī)磷的回收率仍有很大提高的空間，應(yīng)該更深地探討并改進(jìn)。