朱婷婭，李玲麗

(臨海市婦幼保健院 超聲科，浙江 臨海 317000)

乳腺癌作為常見(jiàn)的女性惡性腫瘤，在我國(guó)具有較高的發(fā)病率及死亡率[1]。乳腺癌的發(fā)生發(fā)展受癌細(xì)胞及間質(zhì)成分交互作用的微環(huán)境影響[2]，膠原纖維是乳腺癌的主要間質(zhì)成分，在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有著重要作用[3]。剪切波彈性成像 (shear-wave elastography，SWE)作為一種全新的超聲彈性成像技術(shù)，可通過(guò)定量分析腫瘤組織的硬度特征以鑒別其良惡性質(zhì)，是常規(guī)超聲檢查的有益補(bǔ)充。本研究運(yùn)用剪切波彈性成像定量分析乳腺腫瘤的彈性模量參數(shù)特征，探討其與膠原纖維面積的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2016年7月—2018年7月在臨海市婦幼保健院行手術(shù)切除治療的105例乳腺腫瘤患者作為研究對(duì)象。所選對(duì)象均為女性，年齡21～71歲、平均52.65±12.52歲，共計(jì)139個(gè)病灶，病灶最大徑線0.60～4.2 cm、平均2.32±0.86 cm。根據(jù)術(shù)后病理結(jié)果分為良性病灶組和惡性病灶組，良性病灶組56例，共計(jì)76個(gè)病灶，年齡21～71歲、平均52.14±13.38歲；惡性病灶組49例，共計(jì)63個(gè)病灶，年齡23～70歲、平均53.22±11.58歲，兩組間年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.44，P=0.661)。所有腫瘤病灶術(shù)前均接受剪切波彈性成像檢查，并對(duì)術(shù)后病理組織標(biāo)本進(jìn)行膠原纖維面積分析。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所選患者均簽署知情同意書(shū)。

1.2 檢測(cè)方法 采用AixPlorer超聲診斷儀(Super Sonic Imagine公司)，配有4 MHz～15 MHz的高頻探頭?；颊呷⊙雠P位，安靜平躺，將雙側(cè)乳房和腋窩充分暴露。首先對(duì)乳腺腫瘤病灶進(jìn)行常規(guī)超聲檢查，觀察腫瘤病灶的位置、形態(tài)、大小、包膜、邊界、內(nèi)部結(jié)構(gòu)及回聲、血供、與周?chē)M織關(guān)系等情況；然后啟動(dòng)剪切波彈性成像模式，囑患者屏氣，在不施加任何壓力情況下，在感興趣區(qū)靜置3 s，待超聲圖像穩(wěn)定后定幀并存儲(chǔ)圖像。選取感興趣區(qū)時(shí)，取樣框大小應(yīng)盡可能覆蓋腫瘤病灶。測(cè)量并記錄各彈性模量參數(shù)：彈性模量平均值、彈性模量最大值、彈性模量最小值。同一腫瘤病灶數(shù)據(jù)均重復(fù)測(cè)量3次，取平均值。見(jiàn)圖1。

1.3 膠原纖維面積分析 對(duì)術(shù)后病理組織標(biāo)本進(jìn)行Van Gieson (VG)染色[4]：將病理組織標(biāo)本進(jìn)行切片脫蠟，Weigert鐵蘇木素進(jìn)行10 min浸染后水洗，以1%鹽酸酒精進(jìn)行分化。流水持續(xù)沖洗數(shù)分鐘，VG染液進(jìn)行2 min浸染后，以95%酒精進(jìn)行分化。無(wú)水酒精進(jìn)行脫水后，以二甲苯進(jìn)行透明處理，并以中性樹(shù)膠封固后，光學(xué)顯微鏡下觀察。使用Image-Pro Plus 5.1軟件對(duì)術(shù)后病理組織標(biāo)本進(jìn)行膠原纖維面積分析。每張切片上使用高倍鏡(×400)隨機(jī)選取5個(gè)視野，計(jì)算并記錄每一個(gè)視野內(nèi)膠原纖維面積，取平均值。見(jiàn)圖2(封三)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用 Pearson 相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 術(shù)后病理結(jié)果 63個(gè)惡性腫瘤病灶中浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌49個(gè)，浸潤(rùn)性小葉癌8個(gè)，導(dǎo)管內(nèi)癌6個(gè)；76個(gè)良性腫瘤病灶中纖維腺瘤37個(gè)，乳腺腺病24個(gè)，導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤15個(gè)。良性病灶組病灶最大徑線0.60～4.2cm、平均2.34±0.91 cm；惡性病灶組病灶最大徑線0.70～3.8 cm、平均2.29±0.81 cm；病灶平均最大徑線比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.353，P=0.725)。惡性病灶組的病灶膠原纖維面積(14 475.26±5216.47 μm2)大于良性病灶組(9874.92±3837.14 μm2)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.981，P<0.001)。

2.2 彈性模量參數(shù)比較 惡性病灶組的病灶彈性模量平均值、彈性模量最大值均大于良性病灶組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；見(jiàn)表1。

表1 兩組患者彈性模量參數(shù)比較

2.3 彈性模量參數(shù)與膠原纖維面積的相關(guān)性 乳腺腫瘤病灶的彈性模量平均值(r=0.763,P<0.001)、彈性模量最大值(r=0.836,P<0.001)均與膠原纖維面積呈正相關(guān)。

3 討論

腫瘤組織中的間質(zhì)成分不僅具備腫瘤性特征，且對(duì)腫瘤細(xì)胞可產(chǎn)生力學(xué)效應(yīng)，影響細(xì)胞外基質(zhì)的反應(yīng)狀態(tài)及數(shù)量[5]。研究顯示[6-9]，乳腺癌間質(zhì)成分參與癌細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)展，乳腺癌間質(zhì)中的膠原纖維含量及構(gòu)成特征與乳腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)。因此，評(píng)估乳腺癌膠原纖維含量有著重要臨床意義。剪切波彈性成像是一種全新的超聲彈性成像技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了聲波下的觸診，其基本原理是通過(guò)計(jì)算剪切波在組織結(jié)構(gòu)中的速度變化獲得組織彈性圖像，測(cè)定組織密度獲取其彈性模量值，從而客觀定量地評(píng)價(jià)組織的硬度特征，彈性模量值越大代表組織硬度越大[10-13]。

本研究結(jié)果顯示，惡性病灶組的病灶彈性模量平均值、彈性模量最大值均明顯大于良性病灶組，原因可能一方面與乳腺癌細(xì)胞大量增殖并向周?chē)M織浸潤(rùn)、與鄰近結(jié)構(gòu)組織粘連使其活動(dòng)度下降、彈性硬度增加有關(guān)；另一方面與乳腺癌間質(zhì)微環(huán)境發(fā)生結(jié)締組織增生反應(yīng)、異常激活的成纖維細(xì)胞合成分泌大量膠原蛋白導(dǎo)致腫瘤彈性硬度增加有關(guān)；提示運(yùn)用剪切波彈性成像定量分析乳腺癌病灶的彈性模量參數(shù)特征有助于乳腺癌的鑒別診斷。

膠原纖維作為乳腺癌主要間質(zhì)成分，構(gòu)成了癌細(xì)胞的主要骨架結(jié)構(gòu)。膠原纖維是一種結(jié)構(gòu)蛋白，在細(xì)胞外基質(zhì)中含量豐富，與組織的抗張強(qiáng)度密切相關(guān)[14-15]。本研究結(jié)果顯示，惡性病灶組的病灶膠原纖維面積明顯大于良性病灶組，提示乳腺癌具有更豐富的膠原纖維含量。膠原纖維的韌性及硬度遠(yuǎn)大于癌細(xì)胞，膠原纖維含量的多少?zèng)Q定了腫瘤的組織硬度。在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，隨著膠原纖維含量增多，細(xì)胞外基質(zhì)硬度隨之增大[16-17]。本研究結(jié)果顯示，乳腺腫瘤病灶的彈性模量平均值、彈性模量最大值均與膠原纖維面積呈正相關(guān)，提示隨著彈性模量參數(shù)值越大，乳腺腫瘤的膠原纖維面積越大，這可能與乳腺腫瘤在發(fā)生發(fā)展過(guò)程中常常伴隨著大量細(xì)胞外基質(zhì)膠原表達(dá)增加、相互交聯(lián)、沉積及線性化等病理性改變有關(guān)[18-20]。本研究結(jié)果還顯示，乳腺腫瘤病灶的彈性模量最大值與膠原纖維面積的相關(guān)性較高，提示運(yùn)用彈性模量最大值更有助于反映乳腺腫瘤的膠原纖維含量狀態(tài)。

綜上，剪切波彈性成像的彈性模量平均值和最大值與乳腺腫瘤的膠原纖維面積呈正相關(guān)，可為臨床評(píng)估乳腺腫瘤膠原纖維含量以及鑒別乳腺腫瘤提供影像學(xué)參考。