黨維霞
(寧夏固原市市場(chǎng)監(jiān)管檢驗(yàn)檢測(cè)中心 寧夏 固原 756000)
赤芍為毛茛科植物芍藥(Paeonia lactiflora Pall)或川赤芍Paeonia veitchⅡ Lynch的干燥根,作為中藥材具有散瘀止痛、清熱涼血的作用[1]。隨著中醫(yī)藥的發(fā)展及人們對(duì)中醫(yī)中藥的深入了解,對(duì)中藥材的需求量大大增加,導(dǎo)致濫采濫挖現(xiàn)象頻出,野生赤芍資源銳減,供不應(yīng)求;因此,人工種植赤芍可解赤芍藥源匱乏的燃眉之急。近年來寧夏六盤山也大面積種植芍藥,但該地區(qū)人工種植的赤芍質(zhì)量是否符合藥典規(guī)定并無考證;基于此,本研究對(duì)人工種植的赤芍的質(zhì)量參照《中國藥典》2015年版一部赤芍項(xiàng)下的檢測(cè)項(xiàng)目采用高效液相色譜、薄層色譜及色譜柱等方法進(jìn)行考察,現(xiàn)進(jìn)行匯報(bào)如下:
赤芍對(duì)照藥材、芍藥苷對(duì)照品均購自中國藥品生物制品檢定研究院,批號(hào)為121093-200402、110736-201640;含量使用甲醇為色譜純,水為超純水,其它試劑均為分析純。儀器:Canon 60D照相機(jī),OLYMPUS-SZX10顯微鏡,BP121S電子天平,METTLER TOLEDO XS205DU電子天平;KQ3200超聲波清洗機(jī),Agilengt 1260高效液相色譜,CAMAG-TLCSCAN-NER4薄層掃描儀,Agilent VWD檢測(cè)器,Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色譜柱。
樣品 GY011、GY012、GY013 采自涇源縣六盤山鎮(zhèn)種植基地;GY021、GY022、GY023采自隆德縣種苗園;GY031、GY032、GY033、GY034 采自固原市原州區(qū)河川鄉(xiāng)種植基地,所有樣品均經(jīng)固原市市場(chǎng)監(jiān)管檢驗(yàn)檢測(cè)中心副主任中藥師張文懿鑒定為正品。
1.3.1 制備供試品溶液 樣品粉末0.5g溶于10ml乙醇,振搖5分鐘,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)?ml乙醇溶解即可。
1.3.2 制備對(duì)照藥材溶液 取赤芍對(duì)照藥材1g,對(duì)照藥材溶液制備方法同1.3.1。
1.3.3 制備對(duì)照品溶液 去對(duì)照品溶于乙醇制成2mg/1ml溶液。
1.3.4 展開 吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液各4μl 分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。
1.4.1 制備對(duì)照品溶液 稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥器中干燥36h的芍藥苷對(duì)照品4.7mg,加甲醇于10mL量瓶中定容。
1.4.2 制備供試品溶液 取本品粗粉約0.5g,置具塞錐形瓶中,同時(shí)加甲醇25ml,稱重,浸泡4h,超聲處理20min,放冷,再稱重,減失的重量用甲醇補(bǔ)足,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
1.4.3 色譜條件 Kromasil C18,流動(dòng)相為甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(40:65),檢測(cè)波長為230nm,柱溫30℃,流速1.0mL·min-1,進(jìn)樣量:10μl,重復(fù)測(cè)量3次。
赤芍呈圓柱形,稍彎曲,長5~40cm,直徑0.5~3cm。表面粗糙,棕褐色;有皺紋、縱溝、橫長的皮孔樣突起及須根痕;部分表現(xiàn)為外皮易脫落。質(zhì)地硬而脆,易折斷,斷面呈現(xiàn)粉紅或粉白色,皮部窄,木部放射狀紋理明顯,部分出現(xiàn)裂隙;見圖1。氣微香,味微苦、酸澀。
圖1 赤芍
橫切面木栓層顯微鏡下顯示為數(shù)列棕色細(xì)胞,栓內(nèi)層薄壁細(xì)胞呈現(xiàn)為切向延長;韌皮部較窄,形成層成環(huán);木質(zhì)部射線較寬,導(dǎo)管群作放射狀排列,導(dǎo)管旁有木纖維;薄壁細(xì)胞含淀粉粒及草酸鈣簇晶;見表2。
圖2 赤芍顯微圖片
供試品與對(duì)照藥材、對(duì)照品色譜的相應(yīng)位置上顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn);詳見圖3。
圖3 簿層色譜圖
色譜結(jié)果顯示,芍藥苷的保留時(shí)間約為7.772min,理論板數(shù)4004>3000;芍藥苷含量高于藥典規(guī)定,見表。
表 不同產(chǎn)地的人工種植含量(%)
通過對(duì)本研究抽樣的各批次赤芍的性狀、顯微、薄層及赤芍苷的色譜鑒別,受檢的所有批次赤芍性狀、顯微、薄層色譜均符合藥典規(guī)定,芍藥苷平均含量11.5%。由此可見,寧夏六盤山地區(qū)栽培的赤芍符合藥典要求,具有藥用價(jià)值,且品質(zhì)優(yōu)良。且赤芍對(duì)土壤要求不嚴(yán),耐旱,六盤山的土壤、氣候條件正好相符。
綜上所述,寧夏六盤山地區(qū)人工栽培赤芍外形好,產(chǎn)量大,且有效成分含量等多種指標(biāo)均符合藥典規(guī)定,且芍藥苷含量遠(yuǎn)高于藥典,因此,可在寧夏六盤山地區(qū)進(jìn)行赤芍的規(guī)范化種植,以此來緩解野生資源緊缺的現(xiàn)狀。