周青 劉帥妹 張瑞金 石慧 林寧 吳玉璘 許豪勤

[摘要] 目的 探討亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性（MTHFR A1298C）與宮頸癌之間的關系，為臨床提供可靠數(shù)據以便更好地預防和治療宮頸癌。 方法 在萬方、中國知網和PubMed等數(shù)據庫檢索研究MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性與宮頸癌關系的中英文文獻，檢索時間為建庫至2018年11月12日。通讀全文最終納入Meta分析文獻共7篇，包含病例組823例和對照組1607例。應用Stata軟件在5種遺傳模型中分析，計算比值比（OR）和95%可信度區(qū)間（CI）評估關聯(lián)度，同時進行敏感性分析以及發(fā)表偏倚的評估。 結果 MTHFR基因的3種模型C vs. A（OR = 1.11，95%CI：1.02～1.22，P = 0.015），AC vs. AA（OR = 1.24，95%CI：1.02～1.52，P = 0.030）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，P = 0.013）均有明顯相關性，提示患癌風險增加。 結論 MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性可能會增加女性患宮頸癌的風險。

[關鍵詞] 亞甲基四氫葉酸還原酶;宮頸癌;基因多態(tài)性;Meta分析

[中圖分類號] R737.3? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）08（c）-0099-04

[Abstract] Objective To analyze the relationship between 5，10-Methyleneterahydrofolate reductase gene polymorphisms （MTHFR A1298C） and cervical cancer in order to provide reliable data for better prevention and treatment of cervical cancer. Methods Database of Wanfang， CNKI and PubMed were searched from the time of building database? to November 12， 2018， and a total of 7 articles about the relationship between MTHFR gene （A1298C） polymorphisms and cervical cancer were included in this Meta-analysis， including 823 cases and 1607 controls. The odds ratio （OR） and 95% confidence interval （CI） were calculated and to assess the associations， meanwhile， the sensitivity and publication bias were analyzed. Results There were significance associations in the comparison C vs. A （OR = 1.11， 95%CI： 1.02-1.22， P = 0.015）， AC vs. AA （OR = 1.24， 95%CI： 1.02-1.52， P = 0.030） and （CC+AC） vs. AA （OR = 1.15， 95%CI： 1.03-1.29， P = 0.013）. Conclusion MTHFR （A1298C） gene polymorphisms may increase the risk for cervical cancer.

[Key words] 5，10-Methyleneterahydrofolate reductase; Cervical cancer; Gene polymorphisms; Meta-analysis

宮頸癌是中國女性發(fā)病率較高的婦科腫瘤，僅次于乳腺癌位居第二，每年大約有13.5萬的新發(fā)病例，病死率占到全球的1/3，嚴重威脅女性的身體健康[1]。宮頸癌的形成經歷多步驟、多因素以及長時間內外因素相互作用。高危人乳頭瘤病毒（human papilloma viruses，HPV）持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件，但是單一的HPV感染僅能導致細胞轉化“永生化”，并不能引起上皮細胞的惡變，而基因某些位點多態(tài)性影響宮頸癌的易感性，環(huán)境與宿主內外因相互作用，使得細胞損傷程度不斷地積累，最終發(fā)生癌變。亞甲基四氫葉酸還原酶（5，10-Methyleneterahydrofolate reductase，MTHFR）功能異常導致人體內缺乏葉酸，甲基化和DNA修復異常，最終造成DNA單鏈甚至雙鏈斷裂，染色體不穩(wěn)定，細胞癌變[2]。MTHFR基因多態(tài)性使得酶活性發(fā)生變化，與宮頸癌形成以及預后狀況存在一定的關系，但因不同地區(qū)、人種以及生活環(huán)境等，導致各研究結果不一致?；诖耍狙芯坎捎肕eta分析評估MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌的關系。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索

檢索中英文數(shù)據庫中國知網、萬方和PubMed等，搜集MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性與宮頸癌相關研究的文獻。中文檢索關鍵詞：MTHFR（A1298C）、亞甲基四氫葉酸還原酶（A1298C）、多態(tài)性、宮頸癌。英文檢索關鍵詞：MTHFR（A1298C）、polymorphisms、cervical cancer。檢索時間為建庫至2018年11月12日，同時采用文獻追溯的方法，使得文獻檢索盡可能詳盡，且語種限定為中文和英文。閱讀文獻題目和摘要部分進行初步篩選，再通讀全文，最終納入7篇文獻。

1.2 納入及排除標準

納入標準：①關于MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性與宮頸癌之間關系研究;②實驗設計包括對照組和病例組;③研究對象為人類;④實驗數(shù)據齊全，包含各基因型在病例組和對照組的分布情況;⑤對照組基因型分布符合哈德溫伯格平衡定律（Hardy-Weinberg equilibrium，HWE），P > 0.05。排除標準：①綜述類和Meta分析類文獻;②未提供具體基因型分布數(shù)據;③病例報告和病例研究;④數(shù)據質量不可靠以及重復發(fā)表。

1.3 資料提取

兩名研究者獨立進行文獻的篩選以及資料提取，意見不統(tǒng)一可通過第三位研究者協(xié)助解決，確保數(shù)據的準確性。提取數(shù)據包括：第一作者、發(fā)表時間、國家、種族、實驗方法、對照組來源以及各基因型在病例組和對照組中的頻數(shù)。

1.4 文獻質量評價標準

納入文獻通過Newcastle-Ottawa-Scale（NOS）進行質量評價，NOS滿分為10分，得分>5分為高質量文獻。NOS共3個項目8個條目，包括病例組和對照組的選擇4分（病例定義和診斷是否恰當、病例的代表性、對照的選擇、對照的定義）;病例與對照的可比性2分，暴露4分（暴露的調查與評估方法、病例與對照調查方法是否相同、無應答率）[3]。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用Stata軟件計算95%可信度區(qū)間（CI）和比值比（OR）分析MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌之間的關系。MTHFR（A1298C）的AA、AC和CC三種基因型，分析純合比較模型（CC vs. AA）、等位基因比較模型（C vs. A）、顯性比較模型[（CC+AC）vs. AA]、雜合比較模型（AC vs. AA）和隱性比較模型[CC vs.（CA+AA）]五種不同遺傳模型，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。采用I2和Q檢驗評估納入文獻的異質性，P > 0.05采用固定效應模型Mantel-Haenszel;P < 0.05則采用隨機效應模型DerSimonian和Laird合并OR值，并采用亞組分析異質性來源[4]。I2值<25%表示無異質性，25%≤I2值≤50%表示存在輕度異質性，I2值>50%表示高度異質性[5]。敏感性分析通過一一剔除文獻重新進行Meta分析。通過Egger線性回歸法以及Begg秩相關法進行發(fā)表偏倚的檢測，P > 0.05表示不存在發(fā)表偏倚[6]。

2 結果

2.1 文獻檢索結果

利用關鍵詞在中英文數(shù)據庫中檢索相關文獻22篇，初步排除3篇Meta分析文獻，通讀全文根據納入與排除標準，剔除15篇：①8篇涉及MTHFR基因其他位點;②2篇綜述;③1篇研究對象不是宮頸癌;④1篇未提供原始數(shù)據。最終納入7篇文獻[7-13]?；蚍中头椒ň捎孟拗菩云伍L度多態(tài)性聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction- restriction fragment length polymorphic，PCR-RFLP），對照組來源于醫(yī)院，研究人種包含亞洲和高加索。本研究納入的7篇文獻，經NOS質量評價，得分在6～8之間。見表1。

2.2 分析結果

5種模型分析的結果顯示：C vs. A（OR = 1.11，95%CI：1.02～1.22，P = 0.015），AC vs. AA（OR = 1.24，95%CI：1.02～1.52，P = 0.030）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，P = 0.013），提示MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌發(fā)生存在明顯相關性[7-13]。亞組分析結果顯示：亞洲人種C vs. A（OR = 1.12，95%CI：1.01～1.24，P = 0.029）;AC vs. AA（OR = 1.35，95%CI：1.09～1.67，P = 0.006）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.20，95%CI：1.05～1.37，P = 0.007），結果提示MTHFR基因多態(tài)性與亞洲人宮頸癌發(fā)生存在明顯相關性[8-10，12]。高加索人CC vs.（CA+AA）（OR = 1.47，95%CI：1.02～2.13，P = 0.039），結果提示MTHFR基因多態(tài)性與高加索人宮頸癌發(fā)生存在明顯相關性[7，11，13]。見表2。

2.3 異質性與敏感性分析

MTHFR（A1298C）顯性比較模型（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，I2 = 50.9%），I2值>50%，表示存在高度異質性，亞組分析發(fā)現(xiàn)異質性來源組別高加索，通過敏感性分析一一剔除高加索組中的文獻并重新合并計算結果發(fā)現(xiàn)，Hajiesmaeil等[13]報道的文獻是主要異質性來源，剔除后異質性降低，I2值為41.6%。

2.4 發(fā)表偏倚

通過Egger線性回歸法和Begg漏斗圖檢驗，結果提示：5種比較模型漏斗圖均對稱，且5種模型Egger檢驗結果P > 0.05，因此不存在發(fā)表偏倚。見表3、圖1（C vs. A）。

3討論

人體自身不能合成葉酸，需通過從飲食中獲取，葉酸主要功能轉移體內一碳單位[14]。MTHFR是葉酸功能發(fā)揮的關鍵酶，催化5，10-亞甲基四氫葉酸還原成5-甲基四氫葉酸，為蛋白質的甲基化以及RNA、DNA的合成提供甲基，且維持體內同型半胱氨酸處于正常水平[15]。5-甲基四氫葉酸是血漿中主要的存在形式，并且是葉酸發(fā)揮作用有效成分。MTHFR基因多態(tài)性改變酶活性導致葉酸代謝異常，增加個體某些疾病發(fā)生的風險，如肺癌[16]、缺血性腦卒中[17]、復發(fā)性流產[18]、產后抑郁[19]、不良孕產史[20]、消化系統(tǒng)腫瘤[21]等。研究顯示[7-13]，MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌的發(fā)生關系密切，然而不同民族、種族、地區(qū)，以及不同生活環(huán)境導致易感性發(fā)生差異。

本研究共納入7篇病例-對照研究，包括實驗組823例，對照組1607例，Meta分析結果提示C等位基因可能會增加患宮頸癌的風險。亞組分析C等位基因并未增加高加索人患病風險，引起這種現(xiàn)象可能是由不同人種在不同的生活環(huán)境、不同的飲食方式以及工作環(huán)境等造成。隱性比較模型CC vs.（AC+AA）亞組分析發(fā)現(xiàn)純合突變基因型CC加劇高加索人患病風險，但未增加亞洲女性患宮頸癌的風險，可能原因亞洲人純合突變基因型相對較少。采用Egger線性回歸檢驗方法和Begg漏斗圖評估是否存在發(fā)表偏倚，結果顯示5個遺傳模型均不存在發(fā)表偏倚，說明該Meta分析結果可靠。

本次研究尚有不足：樣本量相對較少，還需大樣本數(shù)據來進行驗證;各種族生活方式、環(huán)境和年齡等個人信息無法獲取，還需進一步評估。

綜上所述，MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性可能會增加女性患宮頸癌的風險。MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌的關系還需進行大樣本，多地區(qū)不同種族、生活環(huán)境、工作方式等分層進一步研究證實，為臨床提供可靠數(shù)據更好地預防和治療宮頸癌。

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（收稿日期：2019-01-21? 本文編輯：任? ?念）