221700豐縣疾病預(yù)防控制中心，江蘇 徐州

結(jié)核分枝桿菌是導(dǎo)致結(jié)核病發(fā)生的主要因素，而結(jié)核病則是一種傳染性比較強(qiáng)的疾病。在過(guò)去一段時(shí)間內(nèi)結(jié)核病得到一定程度控制，但是近幾年其發(fā)病率卻不斷提高，成為當(dāng)前對(duì)人們生命健康威脅較大的傳染性疾病，得到了不少?lài)?guó)家的關(guān)注[1]。結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷是防治結(jié)核病的重點(diǎn)內(nèi)容，金標(biāo)法、抗酸染色體涂片法等都是實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的檢測(cè)方法，但是由于陽(yáng)性檢出率較低，花費(fèi)時(shí)間多，所以無(wú)法更好地滿(mǎn)足臨床實(shí)際需求[2]?；蛐酒ㄊ且环N新出現(xiàn)的結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)技術(shù)，簡(jiǎn)單快速，準(zhǔn)確度高[3]。本文將選擇實(shí)驗(yàn)室中常見(jiàn)的四種檢測(cè)技術(shù)展開(kāi)分析，具體如下。

資料與方法

2018年2月-2019年2月收治結(jié)核分枝桿菌患者120例，分為4組；經(jīng)過(guò)診斷后明確得出結(jié)核病患者52例，其中肺結(jié)核50例，其他種類(lèi)結(jié)核2例。

方法：A組、B組、C組和D組分別接受基因芯片法、金標(biāo)法、抗菌染色片涂片法和結(jié)核菌素檢測(cè)法。分枝桿菌菌種鑒定芯片從北京購(gòu)買(mǎi)，結(jié)核抗體則是購(gòu)買(mǎi)于上海，另外使用到的儀器包含PPD 皮試液、核酸快速提取儀、芯片干洗儀、微陣列芯片掃描儀。征得患者同意后，所有患者分別接受四種檢測(cè)法檢測(cè)，具體步驟如下：①A組方法為基因芯片法，先收集臨床標(biāo)本，然后再開(kāi)始核算提取工作，PCR 擴(kuò)增，雜交芯片、判讀結(jié)果等，具體操作程序按照購(gòu)買(mǎi)機(jī)器的說(shuō)明書(shū)開(kāi)展。②B組方法為金標(biāo)法，標(biāo)本需要離心之后使用。需要在反應(yīng)孔中間加上封閉液，在薄膜吸入之后繼續(xù)開(kāi)展檢測(cè)工作，選取新鮮的血清標(biāo)本，用量控制在40 μL 左右，等到薄膜吸入后加入6滴洗滌液，觀(guān)察結(jié)果，若檢測(cè)和質(zhì)控區(qū)域都呈現(xiàn)出紅色斑點(diǎn)則表示結(jié)果陽(yáng)性，若檢測(cè)區(qū)無(wú)色，質(zhì)控區(qū)紅色，則為陰性。③C組方法為抗菌染色法，需要選取標(biāo)本，在玻片正面靠右位置2/3 左右的位置，將其涂抹成卵圓形，正面朝上，等到自然干燥之后再經(jīng)火焰固定。使用不同的染液開(kāi)展檢測(cè)，A 染液使用5 min后進(jìn)行清洗工作，再使用B染液，等到玻片干燥之后再開(kāi)始鏡檢工作。④D組方法為結(jié)核菌素PPD 皮試法。在患者的左前臂掌側(cè)皮內(nèi)使用皮試液注射，用量為0.1 mL，72 h 之后觀(guān)察結(jié)果。若患者表現(xiàn)出潰破、水皰，則結(jié)果為陽(yáng)性。

評(píng)判指標(biāo)：本次研究主要是評(píng)價(jià)不同實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法對(duì)結(jié)核分枝桿菌患者靈敏度和特異度的影響。分別選擇4種不同的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法，采用靈敏度和特異度衡量實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0 軟件分析；計(jì)數(shù)資料以(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

4種檢測(cè)方法靈敏度和特異度比較：幾種實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)方法的靈敏度和特異度都比較好，但A組檢測(cè)方法的靈敏度和特異度明顯高于其他3種檢測(cè)方法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 四組靈敏度和特異度檢測(cè)結(jié)果比較(%)

討 論

結(jié)核病屬于眾多危害人類(lèi)疾病種類(lèi)中對(duì)人類(lèi)健康安全威脅最大的疾病之一。結(jié)核分枝桿菌是導(dǎo)致結(jié)核病發(fā)生的主要因素，因此快速準(zhǔn)確地檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌是防治結(jié)核病的有效途徑。本次研究中選擇了實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的集中檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌的方法，并對(duì)它們?cè)谂R床中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行比較分析。本次研究中發(fā)現(xiàn)基因芯片法的特異度明顯高于金標(biāo)法和結(jié)核菌素法。金標(biāo)法整體效果處于中上等水平?？咕旧ǖ奶禺惗缺容^高，但是其靈敏度比較低，結(jié)核菌素法和抗菌染色法恰好相反，特異度較低，靈敏度較高。雖然結(jié)核菌素法的靈敏度比基因芯片法還要高，但是PPD 呈現(xiàn)陽(yáng)性并不代表患者當(dāng)前已經(jīng)患病，只能說(shuō)明患者曾經(jīng)感染過(guò)結(jié)核分枝桿菌。根據(jù)已有調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)結(jié)核感染率占比44.2%，所以結(jié)核菌素法所檢測(cè)的結(jié)果中假陽(yáng)性率比較高，而且觀(guān)察結(jié)果需要花費(fèi)很長(zhǎng)的時(shí)間，受到外部因素干擾的影響比較大，最終檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性較低[4]。

本次實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程中，特意選擇基因芯片法，此種實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法屬于一種新型檢測(cè)方法，和PCR 技術(shù)融合起來(lái)，使特異度和靈敏度得到進(jìn)一步提升。而且芯片的背景十分清晰干凈，能夠?qū)?7種結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行特異性鑒別，所需時(shí)間在6 h左右。這些優(yōu)勢(shì)使臨床推廣難度有效降低，屬于一種十分可靠的新型實(shí)驗(yàn)室結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)技術(shù)?；诨蛐酒ㄋ邆涞膬?yōu)點(diǎn)，應(yīng)當(dāng)在臨床上大力推廣使用，提高檢測(cè)率。

綜上所述，對(duì)于結(jié)核分枝桿菌患者而言，結(jié)核菌素法、抗酸染色涂片法、金標(biāo)法和基因芯片法均是十分有效的檢測(cè)方法，具備特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)，其中GCT 法的特異性和靈敏度更高，值得在臨床上推廣使用。