賀國(guó)強(qiáng) 吳尚軍 胡曉艷 趙?？?鄧德江 魏金康

（北京市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣站，北京朝陽(yáng)100029）

代料栽培黑木耳以其生產(chǎn)周期短、收益高等優(yōu)點(diǎn)取代了木段栽培方式。代料栽培黑木耳的培養(yǎng)料加入一定量豆粕、黃豆粉、麩皮等含氮量較高的氮源物質(zhì)，雖可促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)和提高黑木耳產(chǎn)量，但也增加了生產(chǎn)成本?；钚噪模╞iopeptides）是指對(duì)生物機(jī)體的生命活動(dòng)有益或具有生理作用的肽類(lèi)化合物，是蛋白質(zhì)中20個(gè)天然氨基酸以不同組成和排列方式構(gòu)成的從二肽到復(fù)雜的線性、環(huán)形結(jié)構(gòu)的不同肽類(lèi)的總稱，也是源于蛋白質(zhì)的多功能化合物[1]。活性肽可以由豆粕經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵后噴霧干燥制備，其成分較為復(fù)雜。經(jīng)微生物發(fā)酵后豆粕大分子蛋白得到有效地降解，發(fā)酵產(chǎn)物中小分子蛋白肽顯著增加，同時(shí)發(fā)酵產(chǎn)物中蛋白酶活性和益生素含量顯著增加，制得的肽產(chǎn)品具有較好的生理特性和加工特性[2-3]。前期的試驗(yàn)表明，在PDA中加入活性肽，黑木耳菌絲萌發(fā)快，菌絲生長(zhǎng)速度快而且濃密，但有關(guān)活性肽在黑木耳栽培料中應(yīng)用研究尚未見(jiàn)報(bào)道。為此，筆者進(jìn)行了用活性肽部分或全部取代黑木耳培養(yǎng)料中豆粕栽培黑木耳試驗(yàn)，以期為黑木耳代料栽培培養(yǎng)料的開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株及培養(yǎng)材料

黑木耳黑29，引自黑龍江省微生物所。活性肽為豆粕微生物發(fā)酵液噴霧干燥制成，由北京菇友生物科技公司提供。豆粕為生產(chǎn)用商品豆粕粉。培養(yǎng)料配方:以樺木、柞木木屑為主料，麩皮、豆粕等為輔料，按照木屑86.5%，麩皮10%，豆粕2%，石膏1%，石灰0.5%的配方配制培養(yǎng)料，然后裝袋。栽培袋規(guī)格16.5 cm×36 cm，裝袋后料柱高20 cm。

1.2 試驗(yàn)方法

用活性肽部分或全部取代豆粕，共設(shè)4個(gè)處理:處理①，培養(yǎng)料中僅加豆粕（添加量為培養(yǎng)料干重的2%），處理②，培養(yǎng)料中僅添加活性肽（添加量為培養(yǎng)料干重的0.3%）；處理③，培養(yǎng)料中既不加活性肽也不加豆粕（CK）；處理④，培養(yǎng)料中添加豆粕（添加量為培養(yǎng)料干重的1%）及活性肽（添加量為培養(yǎng)料干重的0.15%）。每個(gè)處理3次重復(fù)。以干料計(jì)算，投料約600 kg。拌料裝袋后，按常規(guī)方法滅菌、接種、發(fā)菌。開(kāi)口出耳時(shí)各處理隨機(jī)排列。

1.3 考察內(nèi)容及方法

發(fā)菌期記錄菌絲生長(zhǎng)情況，包括菌絲日均長(zhǎng)速、菌絲滿袋所需時(shí)間、菌絲長(zhǎng)勢(shì)、菌絲顏色。

菌絲日均長(zhǎng)速的測(cè)定方法:待菌絲由接種部位長(zhǎng)過(guò)袋肩部時(shí)，用筆劃線標(biāo)記菌絲生長(zhǎng)位置，并記錄日期；當(dāng)菌絲快長(zhǎng)至菌袋底部時(shí)再次用筆劃線標(biāo)記菌絲生長(zhǎng)位置，并記錄日期。兩次劃線的間距除以兩次測(cè)量的間隔天數(shù)就得到菌絲日均長(zhǎng)速。

催芽時(shí)，觀察記錄耳芽形成時(shí)間、耳芽整齊度。耳芽形成時(shí)間是從開(kāi)口催芽起，至有耳芽開(kāi)始形成的天數(shù)。耳芽整齊度指開(kāi)口第20天，形成耳芽的孔數(shù)占所開(kāi)孔數(shù)量的百分比。耳片適采時(shí)，測(cè)定記錄耳片的鮮耳長(zhǎng)度、鮮耳寬度、鮮耳厚度，并統(tǒng)計(jì)每袋的鮮耳產(chǎn)量、干耳產(chǎn)量。稱取一定量晾干后的干耳，用溫水泡發(fā)過(guò)夜，瀝去多余水分，稱重，計(jì)算泡發(fā)率。計(jì)算公式為Y=m1∕m。式中:Y為樣品泡發(fā)率；m1為樣品濕重，單位g；m為樣品干重，單位g。

每個(gè)處理取200 g干耳，進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分分析。可溶性總糖的測(cè)定用硫酸蒽酮法；粗蛋白:采用GB 5009.5－2016測(cè)定；粗脂肪:采用GB 5009.6－2016測(cè)定；灰分:采用GB 5009.4－2016測(cè)定；鐵:采用GB 5009.268－2016測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加活性肽對(duì)黑木耳菌絲生長(zhǎng)的影響

由表1可知，黑木耳菌絲生長(zhǎng)最佳為處理①（培養(yǎng)料中添加2%豆粕），日均長(zhǎng)速為0.34 cm∕d，較顯著高于其他處理，且菌絲粗壯、濃密；從菌絲滿袋時(shí)間來(lái)看，最佳為處理①，滿袋時(shí)間為40 d；其次為處理④，滿袋時(shí)間為44 d，顯著快于其他處理。綜合可知，處理①為黑木耳菌絲生長(zhǎng)的最佳試驗(yàn)配方。

表1 添加活性肽對(duì)黑木耳菌絲生長(zhǎng)的影響

2.2 添加活性肽對(duì)黑木耳子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響

由表2可見(jiàn)，出現(xiàn)耳芽時(shí)間最早為處理②，現(xiàn)耳芽時(shí)間為11 d。耳芽整齊度由高到低依次為處理②=處理④＞處理①＞處理③。從鮮耳朵長(zhǎng)度來(lái)看，最佳為處理④，達(dá)4.22 cm，但與處理②差異不顯著；從鮮耳朵寬來(lái)看，最佳為處理③，達(dá)5.32 cm，但與其他處理差異不顯著。從鮮耳厚來(lái)看，最佳為處理②、④，達(dá)1.74 cm、1.72 cm，二者無(wú)顯著性差異，與其他處理差異較為顯著。

表2 不同處理黑木耳子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育情況

2.3 添加活性肽對(duì)黑木耳產(chǎn)量的影響

由表3可知，幾個(gè)處理的平均每袋鮮耳產(chǎn)量、平均每袋干耳重順序?yàn)棰伲劲埽劲冢劲?；產(chǎn)量最高的為處理①（培養(yǎng)料中添加2%豆粕），分別為312 g、53.2 g；最低為處理③，分別為195 g、34.2 g；二者與其他處理差異顯著。因此，培養(yǎng)料中不加活性肽和豆粕都會(huì)影響黑木耳產(chǎn)量，而且添加豆粕的效果略優(yōu)于活性肽。

表3 不同處理黑木耳產(chǎn)量及泡發(fā)率

2.4 添加活性肽對(duì)黑木耳主要營(yíng)養(yǎng)成分的影響

從表4可知，各處理黑木耳的可溶性總糖含量由高到低依次為處理②＞④＞①＞③，最高為處理②，為33.1 mg∕g；粗蛋白含量由高到低依次為處理②＞④＞①＞③，最高可達(dá)14.4%；粗脂肪含量由高到低依次為處理②＞④=①＞③；灰分含量由高到低依次為處理④＞②＞③＞①；鐵含量由高到低依次為處理②＞④＞①＞③。

表4 不同處理黑木耳主要營(yíng)養(yǎng)成分

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明:活性肽可以部分替代豆粕作為培養(yǎng)料的輔料栽培黑木耳；培養(yǎng)料最佳氮源添加比例為0.15%活性肽，1%豆粕。

添加活性肽可以加快黑木耳菌絲生長(zhǎng)，縮短菌絲發(fā)滿袋的時(shí)間，但其促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)的作用不及添加豆粕。添加活性肽的黑木耳菌絲長(zhǎng)勢(shì)更佳，菌絲濃密、潔白，這與PDA加入活性肽可促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)結(jié)果一致。

輔料是在栽培基質(zhì)組成中配量較少、含氮量較高、用來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基質(zhì)的碳氮比的物質(zhì)。如糠、麩、餅肥、禽畜糞、大豆粉、玉米粉等。活性肽含氮量高，粗蛋白高達(dá)24.3%，總氮4.55%，C∶N比為7.17，符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，可以作為輔料（氮源）添加物使用。

試驗(yàn)表明，添加豆粕或活性肽，均可以顯著提高黑木耳的產(chǎn)量，添加2%豆粕效果優(yōu)于添加0.3%的活性肽。但活性肽的成本（每袋0.03元）僅為豆粕（每袋0.1元）的30%。

活性肽和豆粕混合使用增產(chǎn)效果優(yōu)于活性肽單獨(dú)使用。單純使用活性肽的作用不如豆粕，表明活性肽不能完全取代豆粕。研究表明，黑木耳栽培培養(yǎng)料中氮源偏少會(huì)影響黑木耳產(chǎn)量和品質(zhì)[4]。試驗(yàn)表明0.3%活性肽添加量與添加2%豆粕相比，培養(yǎng)料氮含量稍顯不足，因此影響了黑木耳產(chǎn)量。

研究表明，不同氮源對(duì)子實(shí)體中膠原蛋白含量的影響存在差異[5]。添加活性肽處理組的黑木耳產(chǎn)量雖低于豆粕，但試驗(yàn)獲得的黑木耳除灰分指標(biāo)外，可溶性總糖、粗蛋白、粗脂肪含量、鐵含量均隨著活性肽的添加量的增加而上升，表明添加活性肽可以改善黑木耳的品質(zhì)。