亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        中藥單體環(huán)黃芪醇的制備方法*

        2019-09-19 01:51:56楚治良王好鋒王曉娜高春芳
        實用醫(yī)藥雜志 2019年9期
        關(guān)鍵詞:甲苷雙相收率

        楚治良,王好鋒,韓 靜,王曉娜,龔 慧,高春芳

        黃芪甲苷(astragaloside IV)是中藥黃芪發(fā)揮藥理活性的主要成分。研究表明,黃芪甲苷具有很好的保肝[1]、降血糖[2]、抗腫瘤[3]等生物活性。黃芪甲苷雖然有很好的生物活性,但由于它相對分子質(zhì)量和空間位阻較大,使其脂溶性和水溶性均較低,所以不利于機體的吸收和制劑的開發(fā)[4]。有報道稱,黃芪甲苷在機體內(nèi)可以經(jīng)腸道菌群降解為環(huán)黃芪醇后被吸收利用[5]。環(huán)黃芪醇是黃芪甲苷的苷元,在自然界主要存在于黃芪中,屬于環(huán)菠蘿烷型四環(huán)三萜類化合物[6](二者結(jié)構(gòu)見圖1)。由于相對分子質(zhì)量較小,使其相對黃芪甲苷而言具有更好的脂溶性,更容易透過細胞膜而被機體吸收[7]。目前研究表明,環(huán)黃芪醇可以提高端粒酶活性從而提高CD3和CD8 T細胞的增殖能力來抑制細胞的衰老[8],同時環(huán)黃芪醇展現(xiàn)出了它抗病毒的活性,因為T細胞增殖能力的加強,更有利于減少HIV病毒的產(chǎn)生[9]。

        環(huán)黃芪醇在中藥黃芪中含量很低,主要由黃芪甲苷制得。目前報道的方法主要有酶解法[10]、Smith降解法[11-13]、酸水解法[14,15]。 其中酶解法工藝簡單,但對反應(yīng)條件要求比較苛刻,并且酶的價格昂貴,不利于應(yīng)用性推廣。Smith降解法條件溫和并且收率較高,但需要氧化→還原→水解→萃取→純化五步完成[16],步驟繁瑣,成本較高。直接酸水解法操作簡單,成本較低,但由于環(huán)黃芪醇在劇烈的酸性條件下極易轉(zhuǎn)化為黃芪醇[13,17](結(jié)構(gòu)見圖 1),所以在劇烈的條件下,直接采用酸水解法,收率較低。筆者以黃芪甲苷為原料,采用溫和的雙相酸水解法制得環(huán)黃芪醇,并利用正交試驗設(shè)計法對有機相溶劑、反應(yīng)時間、水溶液中甲醇和鹽酸的體積分?jǐn)?shù)4個因素進行優(yōu)化,以獲得條件溫和、操作簡單、成本低、收率較高的環(huán)黃芪醇制備方法,最終為環(huán)黃芪醇的進一步研究提供科學(xué)資料。

        圖 1 環(huán)黃芪醇(cycloastragenol)、黃芪甲苷(Astragaloside IV)和黃芪醇(Astragenol)

        1 材料與方法

        1.1 儀器與材料電子天平 (梅特勒托利多,AB-265-S), 旋蒸儀 (德國 IKA 公司,RV10型),Waters E2695型高效液相 (Empower2色譜工作站,Waters 2424型蒸發(fā)光散射檢測器),黃芪甲苷(南京春秋生物工程有限公司,批號:HQJG20170921,HPLC≥98%),環(huán)黃芪醇 (南京春秋生物工程有限公司,批號:HHQC20170921,HPLC≥98%),苯(麥克林生化科技有限公司,分析純),三氯甲烷(上?;瘜W(xué)試劑公司,分析純),甲苯(成都市金山化工試劑廠,分析純),甲醇(洛陽昊華化學(xué)試劑有限公司,分析純),鹽酸(開封市芳晶化學(xué)試劑有限公司,分析純)。

        1.2 試驗方法

        1.2.1原理 苷類化合物,在鹽酸或硫酸的稀醇溶液中,可以水解生成苷元。如果苷元不穩(wěn)定,直接酸水解法會使苷元產(chǎn)生異構(gòu)化、脫水等反應(yīng),最終得不到真正的苷元。黃芪甲苷在劇烈的酸性條件最終主要產(chǎn)物是黃芪醇,而不是苷元環(huán)黃芪醇[13,17]。 因此采用雙相酸水解法,一相為酸水相,一相為與酸水不互溶的有機相,根據(jù)苷元環(huán)黃芪醇易溶于親脂性有機溶劑,而不易溶于水的性質(zhì),即在酸水解過程中,稀鹽酸可將黃芪甲苷水解為環(huán)黃芪醇,游離出來的環(huán)黃芪醇隨即溶于有機溶劑,使環(huán)黃芪醇不被酸水相破壞,從而提高反應(yīng)收率。

        1.2.2方法 包括:(1)雙相酸水解法。準(zhǔn)確稱量100 mg的黃芪甲苷置于500 ml圓底燒瓶中,加入100 ml含一定濃度的鹽酸和甲醇的水溶液,160 ml的有機相溶劑。在室溫條件下劇烈攪拌一定時間后靜置,收集有機相,取適量的碳酸氫鈉水溶液中和酸水相,再加入等體積的三氯甲烷萃取。合并有機相,并用飽和氯化鈉水溶液清洗兩次,再用無水硫酸鈉干燥有機相,減壓濃縮,得白色固體。殘留物用甲醇溶解并定容到10 ml,測定環(huán)黃芪醇并計算收率。其中,當(dāng)筆者將100 mg的黃芪甲苷置于500 ml圓底燒瓶中,加入100 ml含有18%鹽酸的20%甲醇水溶液(v/v),然后再加入三氯甲烷160 ml,在室溫條件下劇烈攪拌6 d時,環(huán)黃芪醇收率最高為46.27%。(2)正交試驗設(shè)計優(yōu)化反應(yīng)條件。在室溫條件下,利用正交試驗設(shè)計對雙相酸水解的有機相(A)、甲醇濃度(B)、反應(yīng)時間(C)和鹽酸濃度(D) 4個因素進行優(yōu)化。(3)色譜條件。色譜柱:XBridge C18色譜柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流動相:乙腈-水(40∶60);流速:1.0 ml/min;柱溫:30 ℃;漂移管溫度:60 ℃;進樣量:5~10 μl;氮氣壓力:25.0 psi;分析時間:16min。(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線制備。精密稱量環(huán)黃芪醇7.91 mg,加甲醇定容于10 ml容量瓶中,作為對照品溶液。 精密吸取對照溶液 3 μl、5 μl、10 μl、15 μl、20 μl依次注入液相色譜儀,記錄色譜圖。以進樣量的對數(shù)(X)為橫坐標(biāo),以峰面積的對數(shù)(Y)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(5)供試品溶液的配制。精密稱量濃縮后所得的環(huán)黃芪醇粗品10 mg,加甲醇定容于10 ml容量瓶中,即得。(6)收率計算。將雙相酸水解法制備的樣品用HPLC進行分析,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算溶液中環(huán)黃芪醇的質(zhì)量濃度,并計算收率(Z)。

        2 結(jié)果

        2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線環(huán)黃芪醇的線性回歸方程為:Y=1.1043X+4.8684(r=0.9999);環(huán)黃芪醇質(zhì)量在 2.73~15.82 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

        2.2 雙相酸水解條件的優(yōu)化按照L9(34)正交表進行試驗,試驗結(jié)果顯示(表1),試驗中所考察的四個因素對環(huán)黃芪醇收率影響的大小順序是A>B>C>D,即有機相>甲醇體積分?jǐn)?shù)>反應(yīng)時間>鹽酸體積分?jǐn)?shù);最佳的反應(yīng)條件為A1B3C3D3,即在室溫條件下,有機相為三氯甲烷、甲醇體積分?jǐn)?shù)為20%、鹽酸體積分?jǐn)?shù)為18%、反應(yīng)時間為6 d時,環(huán)黃芪醇收率最高。根據(jù)正交試驗方差分析顯示(表2),與因素B和C進行對比,因素A具有顯著的影響(P=0.041)。

        表 1 雙相酸水解法正交試驗設(shè)計與結(jié)果

        表 2 雙相酸水解的正交試驗方差分析

        3 討論

        在傳統(tǒng)的直接酸水解法制備環(huán)黃芪醇過程中,由于環(huán)黃芪醇在劇烈的酸性條件下極易轉(zhuǎn)化為黃芪醇,所以直接采用酸水解法制備環(huán)黃芪醇目標(biāo)產(chǎn)物收率較低。該試驗采用雙相酸水解法,避免了環(huán)黃芪醇在劇烈酸性條件下裂解為黃芪醇的不良反應(yīng),有效保護了環(huán)黃芪醇的穩(wěn)定性,從而提高了收率。

        該反應(yīng)在室溫條件下進行,條件溫和,可以有效地以黃芪甲苷為原料制備環(huán)黃芪醇,反應(yīng)無需加熱、回流,工藝簡單,有利于環(huán)黃芪醇的生產(chǎn)。

        該試驗利用正交試驗設(shè)計法,對雙相酸水解制備環(huán)黃芪醇的方法做了初步的研究,結(jié)果表明:有機相的種類對環(huán)黃芪醇的收率影響較大,最終確定在室溫條件下,有機相為三氯甲烷、甲醇體積分?jǐn)?shù)為20%、鹽酸體積分?jǐn)?shù)為18%、反應(yīng)時間為6 d時,用黃芪甲苷制備環(huán)黃芪醇的效果最佳,但放大和工業(yè)化等方面仍需要進一步的研究。

        猜你喜歡
        甲苷雙相收率
        熱軋雙相鋼HR450/780DP的開發(fā)與生產(chǎn)
        山東冶金(2022年2期)2022-08-08 01:50:42
        甲醇制芳烴的催化劑及其制備方法
        能源化工(2021年2期)2021-12-30 18:31:06
        曲美他嗪聯(lián)合黃芪甲苷對心力衰竭犬心肌細胞Ca2+水平的影響
        中成藥(2018年5期)2018-06-06 03:12:05
        S32760超級雙相不銹鋼棒材的生產(chǎn)實踐
        上海金屬(2016年1期)2016-11-23 05:17:28
        大數(shù)據(jù)分析技術(shù)在提高重整汽油收率方面的應(yīng)用
        DP600冷軋雙相鋼的激光焊接性
        焊接(2016年8期)2016-02-27 13:05:13
        LDX2404雙相不銹鋼FCAW焊接及存在問題
        焊接(2015年9期)2015-07-18 11:03:52
        新型N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲類化合物的合成及其抗腫瘤活性
        黃芪甲苷對特發(fā)性肺纖維化模型大鼠肺組織CD34表達的影響
        HPLC-ELSD法測定牛黃降壓丸中黃芪甲苷的含量
        久久久久成人精品免费播放| 91久久久久无码精品露脸| 亚洲天堂精品成人影院| 性一交一乱一乱一视频亚洲熟妇| 日本少妇被爽到高潮的免费| 欧美手机在线视频| 日本一级三级在线观看| 免费人成视频网站在在线| 国产欧美精品一区二区三区四区| 久久伊人精品一区二区三区| 免费无码又黄又爽又刺激| 2019最新国产不卡a| 日韩av在线毛片| 日本一区二区三区看片| 中文日本强暴人妻另类视频| 大桥未久av一区二区三区| 午夜射精日本三级| 欧美freesex黑人又粗又大 | 精品无码国产一区二区三区麻豆| 极品美女扒开粉嫩小泬图片| 中文字幕久久熟女蜜桃| 男女18禁啪啪无遮挡| 国产精品99精品一区二区三区∴ | 日本乱人伦在线观看| 夜夜综合网| 亚洲熟妇夜夜一区二区三区| 一区二区三区在线日本视频 | 国产免费av片无码永久免费| 91av国产视频| 国产精品欧美成人片| 午夜视频一区二区在线观看| 未发育成型小奶头毛片av| 幻女bbwxxxx在线视频| 99爱这里只有精品| 亚洲AV手机专区久久精品| 国产三级韩三级日产三级| 97se亚洲国产综合在线| 国产午夜亚洲精品午夜鲁丝片| 亚洲欧美日韩一区在线观看| 最新在线观看精品国产福利片| 饥渴少妇一区二区三区|