潘 登，張支鳳，吳康樂，楊樹龍，張德卓

（甘肅省血液中心，甘肅 蘭州 730046）

乙型肝炎由乙型肝炎病毒（HBV）感染所致，調查顯示我國普通人群的乙肝病毒流行率約為7.2%[1]。乙肝病毒可以通過血液傳播備受人們的關注[2]。隨著無償獻血事業(yè)的迅速發(fā)展，獻血隊伍不斷壯大，血液質量日益提高，血液經采集到臨床經過了層層篩查，血站承擔了采集、保存、檢驗、制備、供應等各個環(huán)節(jié)的工作。因此，為保證臨床用血安全，減少因輸血導致的HBV感染，從2015年起，按照《血站技術操作規(guī)程（2015版）》的要求，從以前的“兩遍ELISA檢測”改為“兩遍ELISA檢測+一遍核酸檢測”的模式。本中心自執(zhí)行全面開展核酸檢測工作以來，將2015—2017年甘肅省紅十字血液中心無償獻血者HBV感染情況進行調查分析，現報告如下。

1 方法與材料

1.1 對象

選取2015年1月至2017年12月甘肅省紅十字血液中心檢測的169 808份無償獻血者標本作為研究對象。

1.2 儀器與試劑

HBsAg體外診斷ELISA購于北京萬泰和廈門新創(chuàng)公司，HBV/HCV/HIV-1核酸檢測試盒購于上?？迫A公司，HBsAg及HBV DNA質控品購自北京康徹斯坦生物技術有限公司（以上試劑均為批批檢合格，且在有效期內使用），STAR全自動加樣系統（奧斯邦HAMILTON），FAME24/20全自動酶免系統（奧斯邦HAMILTON），科華核酸血液篩查系統。

1.3 實驗方法

1.3.1 血清學檢測 對所有樣本使用兩個不同廠家的ELISA試劑進行HBsAg的檢測，若兩遍檢測結果為反應性的標本及單側試劑為反應性的標本判定為ELISA檢測陽性。

1.3.2 病毒核酸檢測 若兩遍檢測結果無反應性的標本及單側試劑為反應性的標本，使用上?？迫A公司的全自動血液核酸檢測系統，進行HBV/HCV/HIV-1項目8混樣分項目檢測，檢測結果為陽性的pool繼續(xù)做拆分實驗，拆分鑒別試驗反應性的標本判為HBV DNA陽性，陰性則判為HBV DNA陰性。

1.4 質量控制

依據本實驗項目質量控制的要求，試劑盒中的陰陽性對照符合預期要求，室內質控符合L-J質控曲線中的在控，則本次實驗有效。否則，本次實驗無效，分析原因并重新實驗。同時，參加國家衛(wèi)健委臨檢中心的室間質評和本省臨檢中心的室間質評，通過參比，結果合格。

1.5 統計分析

采用SPSS 19.0軟件進行數據整理和統計分析，采用χ2檢驗對影響獻血人群HBV感染的情況進行分析，檢驗水準為α＝0.05。

2 結果

2.1 無償獻血者HBV總體感染情況

甘肅省紅十字血液中心2015—2017年無償獻血者共計169 808人份，總陽性率 0.393%，ELISA 陽性率為 0.359%，核酸陽性率為 0.034%，見表 1。

表1 甘肅省紅十字血液中心2015—2017年無償獻血者HBV感染總體情況[n（%）]

2.2 獻血者HBV感染的一般人口學特征（見表2）

通過分析獻血人群中HBV不合格人數比例發(fā)現，HBV感染者獻血人群的特征為18～25歲、男性、中專及以下、漢族、其他、初次獻血。

表2 甘肅省紅十字血液中心2015—2017年獻血者人口學特征

2.3 影響無償獻血者HBV感染率的單因素分析（見表3）

表3 獻血者HBV感染率的單因素分析

通過獻血者的單因素分析發(fā)現，年齡、性別、受教育程度、婚姻狀況、職業(yè)和獻血方式影響了獻血人群中HBV的感染，而民族并非是影響獻血人群HBV感染的因素。

3 討論

甘肅省紅十字血液中心自2015年開始使用“兩遍酶免+一遍核酸”的檢測策略篩查HBV，即對所有檢測樣本使用兩遍酶免進行檢測，對酶免檢測結果為陰性的標本再次進行核酸檢測，文獻表明核酸檢測技術具有高度敏感性和特異性，能顯著縮短血液感染病毒檢測窗口期[3]。本調查研究為方便統計，使用2015—2017年以來的HBV檢測數據進行分析，以檢測陽性數字等同于感染人數，了解最新的獻血人群HBV感染分布規(guī)律。

3.1 優(yōu)化獻血前檢測項目可以有效降低HBV篩查陽性率

本中心2015年1月—2017年12月共檢測169 808份無償獻血標本，檢出HBV陽性668份，其中ELISA陽性610份，NAT陽性58份，HBV平均陽性率為0.393%，低于國內如廣州0.9%[4]，杭州 13.08%[5]，滄州 0.51%[6]，重慶市江津區(qū) 1.17%[7]。由于各地人群HBV流行率不同，血站采用的檢測流程和檢測試劑不同，各地HBV陽性率差異較大，本站對獻血者進行獻血前體檢，分別用干式生化法檢測ALT和金標法檢測HBV的聯合篩查，合格后進入獻血環(huán)節(jié)。

3.2 血站全面開展核酸檢測有助于提高用血安全

本中心2015年1月—2017年12月HBV DNA核酸檢測陽性率為0.034%，低于2010—2013年濟南地區(qū)NAT檢測陽性率 0.067%[8]，2012—2013 年青島地區(qū) NAT 檢出率 0.068%[9]，常州NAT檢出率0.1%[10]。這可能與人群地域差異有關，各地使用的核酸檢測試劑和檢測策略有差異，同時流行率在很大程度上取決于所使用的血清學和NAT檢測方法的靈敏度[11]，核酸檢測實驗室在加強實驗室管理的同時，要做好核酸樣本管理，從采集、離心溫度和轉速設置、保存和運輸溫度監(jiān)控、檢測時間控制等方面做好控制，做好檢測過程質量控制，制定質控規(guī)則和監(jiān)控指標，優(yōu)化檢測流程，不斷提高HBV DNA試劑的檢測下限，在選擇探針時必須至少覆蓋HBV基因組的3個基因區(qū)，并在驗證時應能至少檢測出基因組的兩個區(qū)[12]。筆者對蘭州地區(qū)2004—2010年無償獻血者HBsAg檢測結果進行統計分析[13]，2015—2017年間的 HBV 陽性率（0.393%）與 2004—2010年間的陽性率（0.454%）有顯著差異（χ2＝9.416，P＜0.05），分析可能的原因有：固定獻血者數量逐漸增加并日趨穩(wěn)定，無償獻血宣傳、科普充分，低危獻血者參加無償獻血，檢測試劑特異性提高。但是檢測陽性率降低與輸血感染HBV殘余風險關系還需收集更多實驗數據進行分析，但是全面開展核酸檢測對于發(fā)現隱匿性乙肝人群具有不可替代的檢測優(yōu)勢，同時開展核酸檢測可以有效縮短HBV檢出的窗口期，降低輸血傳播風險。

3.3 依據獻血者陽性檢測率分布趨勢大數據制定更有效的獻血者招募策略

本中心2015年1月—2017年12月獻血人群169 808人次的 HBV 感染情況分析表明：18～25歲、26～35歲、36～45歲、46～55歲4個年齡段獻血人數由高到低分布，HBV陽性率逐步升高；男性獻血者HBV陽性率明顯高于女性；中專及以下學歷獻血者比例將近一半，HBV陽性率在4個學歷分類中最高；漢族與其他少數民族獻血者HBV陽性率無顯著差異；單身獻血者HBV陽性率比已婚獻血者高；在職業(yè)分類中，公司職員HBV陽性率較高；初次獻血者與重復獻血者的HBV陽性率無顯著差異；統計數據表明蘭州地區(qū)獻血者HBV感染者人群呈現一定規(guī)律，蘭州地區(qū)漢族與其他少數民族獻血者HBV陽性率無顯著差異；初次獻血者與重復獻血者的HBV陽性率無顯著差異，與南京地區(qū)[14]、四川綿陽[15]無償獻血人群HBV感染情況調查統計結果不同。少數民族人群在蘭州地區(qū)占一定比例，可以繼續(xù)加大少數民族人群招募力度；做好保留重復獻血者隊伍的同時，應大力發(fā)展初次獻血者隊伍。

綜上所述，乙型病毒性肝炎（乙肝）是最突出的公共衛(wèi)生問題之一，作為經血傳染病，應當做好管理，提高輸血安全性，需繼續(xù)大力宣傳無償獻血，在低危人群中采集血液，做好獻血前獻血者征詢，婉言勸退高危獻血人群，建立一支穩(wěn)定的自愿無償獻血者隊伍，采用特異性好、靈敏度高的HBV篩查試劑，全面進行核酸檢測，提高實驗室管理水平。由于本次調查對所有陽性結果未進行確認檢測，調查感染人群中存在假陽性結果，還需進一步增加檢測方法，不斷完善調查結果。