溫麗芳 喬小青 張旭光

[摘要]目的：研究復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊對(duì)高血糖小鼠的降糖效果。方法：采用胰島損傷高血糖模型，設(shè)0.057、0.113、0.340g/kg·BW三個(gè)劑量組，相當(dāng)于復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊的人體推薦劑量的5、10、30倍，連續(xù)給予小鼠灌胃30天，觀察高血糖模型動(dòng)物降糖實(shí)驗(yàn)、糖耐量實(shí)驗(yàn)以及正常小鼠的降糖實(shí)驗(yàn)的降糖效果。結(jié)果：高血糖模型小鼠空腹血糖結(jié)果顯示，各劑量組實(shí)驗(yàn)前后血糖下降率與高糖對(duì)照組比較，差異均有顯著性意義（p<0.05）;糖耐量實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各劑量組高糖對(duì)照組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）;正常小鼠空腹血糖實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常動(dòng)物高劑量組給樣后血糖與溶劑對(duì)照組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。結(jié)論：復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊輔助降血糖功能動(dòng)物試驗(yàn)陽性。

[關(guān)鍵詞]蜂膠;鉻酵母;小鼠;降血糖

[中圖分類號(hào)]R285 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]2096-5249（2019）15-0060-02

糖尿病是一種常見的內(nèi)分泌疾病，現(xiàn)已成為繼心血管疾病、腫瘤之后危害人類健康的第三大殺手。目前全球糖尿病患者已超過1.2億人，我國患者人群居世界第二，目前中國的糖尿病發(fā)病率高達(dá)9.6%，未來50年內(nèi)糖尿病仍將是中國一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。從調(diào)查數(shù)據(jù)看中國的糖尿病現(xiàn)狀已非常嚴(yán)峻內(nèi)，目前中國已成為全球范圍糖尿病增長最快的地區(qū)并且成為世界糖尿病第一大國。本實(shí)驗(yàn)將以復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊為受試物，探討其對(duì)高血糖小鼠的降糖效果，為復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊的推廣提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料和方法

1.1儀器與試劑：日立7060型全自動(dòng)生化分析儀、四氧嘧啶（美國Sigma公司）、葡萄糖（廣州化學(xué)試劑廠）、血糖測(cè)定試劑盒（中生北控生物科技股份有限公司）

1.2受試樣品：復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊（廣東佰嘉藥業(yè)有限公司提供），680mg/粒（含巴西綠蜂膠250mg，鉻酵母55mg），每日1次，每次1粒，折合人體推薦劑量（成人按60kg體重計(jì)）0.0113g/kg·BW。

1.3動(dòng)物：SPF級(jí)昆明種雄性小白鼠，6-8周齡、體重26±2g，由廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（粵）2011-0002號(hào)，質(zhì)量合格證編號(hào)：NO 440072000116361。顆粒飼料由廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.4試驗(yàn)方法

1.4.1受試物制備：每日稱取0.680g受試樣品，用聚乙二醇調(diào)配至20.0ml作為高劑量組受試物，然后量取2.5、5.0ml高劑量組受試物，用聚乙二醇調(diào)配至15.0ml制成低、中劑量組受試物。

1.4.2給予受試物途徑：各劑量組和正常動(dòng)物高劑量組按每日一次，每次0.1ml/10g-BW灌胃給予受試物，溶劑對(duì)照組和高糖對(duì)照組按同等容量灌胃給予聚乙二醇。

1.4.3高血糖小鼠造模：按照國食藥監(jiān)?；痆2012]107號(hào)附件3《輔助降血糖功能評(píng)價(jià)方法》，按照胰島損傷高血糖模型進(jìn)行試驗(yàn)。最后選取血糖值10-25mmol/L的動(dòng)物為高血糖模型成功動(dòng)物。

1.4.4劑量設(shè)計(jì)：設(shè)0.057、0.113、0.340g/kg.BW三個(gè)劑量組、相當(dāng)于人體推薦劑量的5、10、30倍，另設(shè)溶劑對(duì)照組、高糖對(duì)照組、正常動(dòng)物高劑量組。由于受試物不溶于水和植物油，故采用聚乙二醇作溶劑。

1.4.5高血糖模型動(dòng)物降糖實(shí)驗(yàn)：高血糖模型動(dòng)物分高糖對(duì)照組和三個(gè)樣品劑量組，每組12只，調(diào)整組間血糖值相差小于1.1mmol/L劑量組分別給予不同劑量受試物，模型對(duì)照組按同等容量灌胃給予溶劑，試驗(yàn)共30天，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)動(dòng)物禁食5小時(shí)后測(cè)定空腹血糖值，比較各組動(dòng)物血糖值及血糖下降百分率。

血糖下降百分率=（實(shí)驗(yàn)前血糖-實(shí)驗(yàn)后血糖）/實(shí)驗(yàn)前血糖值×100%

1.4.6高血糖模型動(dòng)物糖耐量實(shí)驗(yàn)：高血糖模型動(dòng)物分高糖對(duì)照組和三個(gè)樣品劑量組，劑量分組及受試樣品給予時(shí)間同1.4.5，每組12只。禁食5小時(shí)后，劑量組分別給予不同劑量受試物，高糖對(duì)照組按同等容量灌胃給予溶劑。20分鐘后各鼠經(jīng)口給予2.0g/kg.BW的葡萄糖（用純凈水配制），測(cè)定給葡萄糖后0、0.5、2小時(shí)三時(shí)間點(diǎn)的血糖值，計(jì)算各劑量組與高血糖模型對(duì)照組三時(shí)間點(diǎn)的血糖曲線下面積。

血糖曲線下面積=1/4x（0小時(shí)血糖+4×0.5小時(shí)血糖+3x小時(shí)血糖）

1.4.7正常動(dòng)物降糖實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)設(shè)正常動(dòng)物高劑量組和溶劑對(duì)照組。將正常小鼠隨機(jī)分成2組，每組12只，測(cè)定禁食5小時(shí)后的空腹血糖值，正常動(dòng)物高劑量組每日經(jīng)口灌胃給予0.340g/kg.BW受試物（相當(dāng)于推薦日服量的30倍），溶劑對(duì)照組按同等容量灌胃給予溶劑，試驗(yàn)共30日，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)動(dòng)物禁食5小時(shí)后測(cè)定空腹血糖值，觀察受試樣品對(duì)正常動(dòng)物空腹血糖的影響。

2試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1受試樣品對(duì)高血糖模型小鼠空腹血糖的影響：從表l、2可見，各劑量組實(shí)驗(yàn)后血糖與高糖對(duì)照組比較降低;各劑量組實(shí)驗(yàn)前后血糖下降率與高糖對(duì)照組比較，差異均有顯著性意義（p<0.05）。表明試驗(yàn)結(jié)果為陽性。

2.2受試樣品對(duì)高血糖模型小鼠糖耐量的影響：從表3、4可見，各劑量組三時(shí)點(diǎn)血糖曲線下面積與高糖對(duì)照組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。

2.3受試樣品對(duì)正常小鼠空腹血糖的影響：由表5可見，正常動(dòng)物高劑量組給樣后血糖與溶劑對(duì)照組比較，差異無顯著性意義（p>0.05），表明復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊對(duì)正常小鼠空腹血糖無明顯影響。

2.4受試樣品對(duì)高血糖模型小鼠實(shí)驗(yàn)前、后體重的影響：由表1、4可見，各劑量組小鼠實(shí)驗(yàn)前后體重與高糖對(duì)照組比較，差異無顯著性意義（P>0.05），表明復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊對(duì)高血糖模型動(dòng)物體重?zé)o明顯影響。

3結(jié)論

對(duì)SPF級(jí)昆明種小鼠每日經(jīng)口給予0.057、0.113、0.340g/kg-BW劑量的復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊，為推薦日服量的5、10、30倍，試驗(yàn)時(shí)間共30天。結(jié)果顯示：

受試樣品能夠增加高血糖模型小鼠的空腹血糖下降率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。

受試樣品未能減少高血糖模型小鼠的血糖曲線下面積，糖耐量實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性。

受試樣品對(duì)正常小鼠的空腹血getff沒有明顯影響。

根據(jù)國食藥監(jiān)?；痆2012]107號(hào)附件3的《輔助降血糖功能評(píng)價(jià)方法》判定標(biāo)準(zhǔn)，復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊輔助降血糖功能動(dòng)物試驗(yàn)陽性。

4討論

巴西綠蜂膠是蜂膠的一個(gè)酒神菊屬品種，多項(xiàng)研究資料表明，蜂膠能夠有效降低小鼠、人體的血糖水平。日本也有兩項(xiàng)研究證實(shí)，巴西綠蜂膠同樣具有降血糖功能。鉻是人和動(dòng)物必需的微量元素之一，對(duì)維持生物體正常的生理代謝有重要的意義。生物體缺鉻會(huì)出現(xiàn)膽固醇或血糖升高、生長遲緩、免疫下降等癥狀，在吸收和生物利用能力方面，有機(jī)形式比無機(jī)形式更有利于吸收和利用…。研究證明，鉻酵母可改善糖代謝和微循環(huán)，降低血糖水平。

本次實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果，復(fù)方蜂膠鉻酵母軟膠囊具有輔助降血糖功能，與巴西綠蜂膠和鉻酵母這兩種原料本身具有調(diào)節(jié)血糖功能，結(jié)果是一致的。