邱大健 張怡 華益民

（四川大學(xué)華西第二醫(yī)院心臟發(fā)育與早期干預(yù)研究室出生缺陷與相關(guān)婦兒疾病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 四川 成都 610041）

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥（ICP）是一種多種因素共同作用的發(fā)病機(jī)制不明的妊娠期特有嚴(yán)重并發(fā)癥，病理特征為細(xì)小膽管內(nèi)膽汁淤積，臨床表現(xiàn)主要有皮膚瘙癢、黃疸及肝臟酶學(xué)指標(biāo)及血清膽汁酸的升高，雖對母體影響不大，但容易導(dǎo)致胎兒不良結(jié)局，增加新生兒患病及死亡風(fēng)險?；诖?，本研究探討了ICP患者胎盤中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白(ERp29)及髓過氧化酶（MPO）的表達(dá)，旨在為明確ICP發(fā)病機(jī)制，為ICP的防治提供新的方向。

1.資料與方法

1.1 一般資料

本研究選取2016年1月－2019年1月在我院住院分娩的80例ICP孕產(chǎn)婦作為ICP組，均確診為ICP，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《ICP患者診療指南(第一版)》［1］；同期選取在我院因胎位不正及社會因素等原因選擇剖宮產(chǎn)的80例正常孕產(chǎn)婦作為對照組，納入標(biāo)準(zhǔn)：漢族，初產(chǎn)婦，單胎妊娠，所有孕產(chǎn)婦均在我院建檔并按時產(chǎn)檢且臨床資料完整，本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)，所有孕產(chǎn)婦及家屬知情同意并自愿參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：孕周＞40周者，妊娠期高血壓疾病者，肝膽疾病者，合并嚴(yán)重內(nèi)科疾病者，有口服避孕藥史者，免疫系統(tǒng)及血液系統(tǒng)疾病者，合并其他影響ICP診斷疾病者，不能配合完成研究者。ICP組年齡22～31歲，平均年齡（26.5±2.1）歲；孕周36+3～40周，平均孕周（37.9±1.1）周。對照組年齡22-33歲，平均年齡（27.2±2.8）歲；孕周37+1～40周，平均孕周（38.7±0.7）周。兩組一般資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，差異不顯著（P＞0.05），組間具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 生化指標(biāo)檢測 剖宮產(chǎn)前所有受試者均晨起空腹采靜脈血，用于檢測血清總膽汁酸(TBA)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)等，具體操作按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.2 胎盤標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測 剖宮產(chǎn)胎盤娩出即刻，避開鈣化區(qū)及梗死區(qū)，在胎盤組織母體面中央?yún)^(qū)取大小約1 cm×1cm×1cm的組織兩塊，一塊用于制作組織切片，一塊用于提取組織總蛋白。采用免疫組織化學(xué)方法檢測胎盤組織ERp29及MPO表達(dá)陽性率（高倍鏡下取10個視野，平均陽性細(xì)胞數(shù)占比＞30%即為陽性），Western blot檢測胎盤組織ERp29及MPO蛋白表達(dá)（以tubulin作為內(nèi)參）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組TBA、AST及ALT比較結(jié)果

ICP組血清TBA、AST及ALT水平均顯著高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組血清TBA、AST及ALT比較結(jié)果（±s）

表1 兩組血清TBA、AST及ALT比較結(jié)果（±s）

組別 n TBA（μmol/l） AST（IU/L） ALT（IU/L）ICP組 80 71.21±5.63 127.96±6.64 181.63±11.58對照組 80 3.12±0.45 14.95±2.63 11.39±1.52 t 107.8294 141.5302 130.3733 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 兩組胎盤組織ERp29及MPO表達(dá)陽性率

ICP組胎盤組織ERp29表達(dá)陽性率顯著高于對照組（P＜0.05），MPO表達(dá)陽性率顯著低于對照組（P＜0.05），見表2。

表2 兩組胎盤組織ERp29及MPO表達(dá)陽性率[n(%)]

2.3 兩組胎盤組織ERp29及MPO蛋白表達(dá)

ICP組胎盤組織ERp29蛋白表達(dá)量顯著高于對照組（P＜0.05），MPO蛋白表達(dá)量顯著低于對照組（P＜0.05），見表3。

表3 兩組胎盤組織ERp29及MPO蛋白表達(dá)（±s）

表3 兩組胎盤組織ERp29及MPO蛋白表達(dá)（±s）

組別 n ERp29 MPO對照組 80 0.23±0.07 0.63±0.05 ICP組 80 0.59±0.06 0.28±0.02 t 34.9251 53.1318 P＜0.05 ＜0.05

3.討論

ICP的發(fā)生發(fā)展與胎盤功能密切相關(guān)，且高膽酸水平對導(dǎo)致胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，由此我們推測，高膽酸誘導(dǎo)的胎盤凋亡可能參與了ICP的發(fā)生發(fā)展。ERp29屬于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白的一種，在氧化應(yīng)激的誘導(dǎo)及細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用，ERp29過表達(dá)可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制其增殖［2］。MPO屬于過氧化物酶，可通過抑制caspase-3的活化達(dá)到抑制細(xì)胞凋亡的目的，目前，MPO已經(jīng)被證實(shí)在多種惡性腫瘤中過表達(dá)。

本研究結(jié)果提示，ERp29、MPO的表達(dá)參與ICP的發(fā)生發(fā)展，可能成為該病治療的新靶點(diǎn)。