謝金鑫，張敖云圖雅，佟盼盼，段利雅，盧亞賓，況 玲*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，新疆烏魯木齊830052；2.哈爾濱市阿城區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生防疫站，黑龍江哈爾濱150300)

衣原體(Chlamydia)是一種引起人類(lèi)和多種動(dòng)物感染的病原體，在世界范圍內(nèi)普遍存在衣原體感染，由于大多臨床表現(xiàn)隱匿而未能引起足夠重視。衣原體對(duì)馬具有廣泛的致病性，臨床表現(xiàn)為肺炎、鼻炎、結(jié)膜炎、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎、肝性腦病綜合癥、慢性支氣管炎、種公馬精液質(zhì)量降低、母馬繁殖率下降及流產(chǎn)等癥狀[1]。在我國(guó)衣原體的相關(guān)研究主要集中在羊、牛、豬及家禽[2-7]，而對(duì)馬衣原體的研究相對(duì)較少，且研究年代久遠(yuǎn)[8-11]。本研究采用間接血凝試驗(yàn)(Indirect hemagglutination test，IHA)調(diào)查了新疆伊寧、阿勒泰、巴音郭楞蒙古自治州(巴州)、新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第六師(第六師)、烏魯木齊市和昌吉州的伊犁馬、哈薩克馬、焉耆馬和純血馬的衣原體感染情況，相對(duì)全面地反映新疆不同地區(qū)、不同品種馬衣原體病的流行狀況。

1 材料與方法

1.1 血清樣品 2013年～2016年本實(shí)驗(yàn)室從新疆伊寧、阿勒泰、巴州、第六師、烏魯木齊市及昌吉州6個(gè)地區(qū)收集的伊犁馬、哈薩克馬(散養(yǎng))、焉耆馬(散養(yǎng))和純血種馬血清共826份，-80℃保存。

1.2 主要試劑 衣原體IHA抗原以及標(biāo)準(zhǔn)陰、陽(yáng)性血清均購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，批號(hào)為180703。

1.3 抗體檢測(cè)與結(jié)果判定 參照試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)血清樣品，并按說(shuō)明進(jìn)行結(jié)果判定。對(duì)檢測(cè)結(jié)果按照馬的品種，性別，飼養(yǎng)方式，地域等因素進(jìn)行新疆地區(qū)馬衣原體流行病學(xué)分析。

1.4 數(shù)據(jù)處理 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 不同年份馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果 2013年～2016年，新疆馬血清衣原體抗體陽(yáng)性率依次為0(0/33)、2.41%(7/290)、7.30%(23/315)和 3.19%(6/188)，平均陽(yáng)性率為4.26%(36/826)。其中伊寧地區(qū)2013年～2016年馬血清衣原體抗體陽(yáng)性率依次 為 0(0/33)、 2.84%(4/141)、 1.13%(2/177)和5.08%(6/188)(表1)，其余5個(gè)地區(qū)僅采集某一年的血清樣品，故無(wú)法比較。表明新疆地區(qū)馬衣原體感染率呈上升趨勢(shì)。

2.2 不同品種馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果 純血馬、焉耆馬、哈薩克馬和伊犁馬的衣原體抗體陽(yáng)性率分別為 8.98%(23/256)、3.13%(1/32)、4.23%(6/142)和1.52%(6/396)(表1)。純血馬的衣原體抗體陽(yáng)性率顯著高于其余3種馬(p＜0.05)，盡管焉耆馬與哈薩克馬之間差異不顯著(p＞0.05)，但其衣原體抗體陽(yáng)性率均顯著高于伊犁馬(p＜0.05)(圖1)。表明衣原體感染在馬中存在品種差異。

圖1 不同品種馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果Fig.1 The detection result of equine Chlamydia antibody in different breeds

表1 馬血清來(lái)源及其衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果Table 1 Source of equine sera and the detection results of Chlamydia antibody

2.3 不同性別馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果 公馬與母馬血清衣原體抗體陽(yáng)性率分別為41.90%(18/43)、2.30%(18/783)，二者間差異顯著(p＜0.05)(圖2)。表明衣原體感染在馬中存在性別差異。

圖2 不同性別馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果Fig.2 The detection result of equine Chlamydia antibody in different genders

2.4 不同飼養(yǎng)方式馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果 規(guī)?；B(yǎng)殖馬(伊犁馬)與散養(yǎng)馬(哈薩克馬和焉耆馬)血清衣原體抗體陽(yáng)性率分別為1.52%(6/396)、4.02%(7/174)，二者間差異顯著(p＜0.05)(圖3)。表明衣原體感染差異與馬的飼養(yǎng)方式有關(guān)。

圖3 不同飼養(yǎng)方式馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果Fig.3 The detection result of equine Chlamydia antibody in different breeding methods

2.5 新疆本土品種馬與引進(jìn)品種馬血清衣原體抗體檢測(cè) 新疆本土品種包括伊犁馬、哈薩克馬和焉耆馬，引進(jìn)品種包括純血母馬與種公馬。新疆本土品種馬與引進(jìn)品種馬血清衣原體抗體陽(yáng)性率分別為2.28%(13/570)、8.98%(23/256)，二者間差異顯著(p＜0.05)(圖4)。表明衣原體感染在引進(jìn)和本土品種馬中存在差異，應(yīng)加強(qiáng)馬匹引進(jìn)時(shí)的衣原體檢疫。

圖4 不同地域來(lái)源馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果Fig.4 The detection result of equine Chlamydia antibody in different geographical sources

2.6 不同地區(qū)馬血清衣原體抗體檢測(cè) 伊寧、阿勒泰、巴州、第六師、烏魯木齊市和昌吉州馬血清衣原體抗體的陽(yáng)性率分別為2.56%(12/469)、28.6%(18/63)、 3.13%(1/32)、 0(0/70)、 1.71%(2/117)和4.00%(3/75)，其中阿勒泰馬衣原體陽(yáng)性率最高，其與伊寧、巴州、第六師、烏魯木齊市和昌吉州相比差異顯著(p＜0.05)(圖5)。表明衣原體感染在馬中存在地區(qū)差異，阿勒泰地區(qū)純血馬居多，故衣原體陽(yáng)性率最高，進(jìn)一步證實(shí)了2.2中結(jié)論。

圖5 不同地區(qū)馬血清衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果Fig.5 The detection result of equine Chlamydia antibody in different areas

3 討論

本研究顯示新疆引進(jìn)的純血馬衣原體血清抗體陽(yáng)性率為8.98%，在全球純血馬衣原體血清抗體陽(yáng)性率(5%～18%)的范圍內(nèi)[1]，且顯著高于新疆本土品種馬(2.28%)，純血馬衣原體的高陽(yáng)性率導(dǎo)致了2015年馬衣原體血清抗體陽(yáng)性率顯著高于其它年份，使新疆馬衣原體血清抗體平均陽(yáng)性率達(dá)到了4.26%。表明純血馬衣原體高感染率對(duì)新疆馬產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有一定威脅。

謝倩報(bào)道與養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)的動(dòng)物相比，衣原體血清抗體陽(yáng)性率在散養(yǎng)動(dòng)物中更高[12]，本研究也觀察到類(lèi)似現(xiàn)象，與規(guī)?；B(yǎng)殖的伊犁馬(1.52%)相比，衣原體血清抗體陽(yáng)性率在散養(yǎng)的哈薩克馬和焉耆馬(4.02%)中更高，表明良好的養(yǎng)殖環(huán)境更有利于防控馬衣原體病。然而，本研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖條件最好的純血馬衣原體平均血清抗體陽(yáng)性率最高(8.98%)，與本土品種馬差異顯著，這可能與引種密切相關(guān)。

為了更好地改良馬匹品種，近幾年我國(guó)從澳大利亞、愛(ài)爾蘭、日本等多個(gè)國(guó)家引進(jìn)純血種公馬。我國(guó)對(duì)進(jìn)口馬的檢疫參照最嚴(yán)格的《關(guān)于中國(guó)從美國(guó)輸入馬的檢疫和衛(wèi)生要求議定書(shū)》，檢測(cè)項(xiàng)目包括非洲馬瘟、日本腦炎、馬流行性淋巴管炎、馬鼻疽、委內(nèi)瑞拉馬腦脊髓炎、馬痘、馬媾疫和蘇拉病，但目前并未將衣原體病檢測(cè)納入其中。本研究中阿勒泰吉木乃縣純血種公馬衣原體血清抗體陽(yáng)性率高達(dá)46.15%，表明引進(jìn)純血種公馬的同時(shí)還引入了種公馬攜帶的衣原體。

王瓊秋、金根源報(bào)道衣原體的感染率具有地域差異[10-11]，本研究結(jié)果顯示阿勒泰馬衣原體的感染率顯著高于伊寧、巴州、第六師、烏魯木齊市和昌吉州。分析顯示，除阿勒泰純血馬的高感染率之外，馬衣原體感染率在新疆6個(gè)地區(qū)的差異性并不顯著，表明應(yīng)重視引進(jìn)純血馬衣原體病。

通過(guò)對(duì)新疆地區(qū)馬血清樣品進(jìn)行衣原體抗體檢測(cè)，初步分析新疆馬衣原體的流行情況，可以為馬衣原體病防控提供數(shù)據(jù)支持。同時(shí)通過(guò)數(shù)據(jù)分析，發(fā)現(xiàn)41.9%的純血種公馬血清為衣原體抗體陽(yáng)性，提示在純血種公馬的引進(jìn)過(guò)程中需對(duì)衣原體的檢測(cè)加以重視，謹(jǐn)防衣原體帶來(lái)的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。