李 楨，趙珊珊，潘慶杰

（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東青島 266109）

種公馬配種可靠性評(píng)定（breeding soundness evaluation,BSE）最早于1975年正式用于種公馬繁殖力的評(píng)定。評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：一匹合格的種公馬在自然交配的情形下，一個(gè)配種期可使40 匹及以上的母馬中的75%的母馬受孕，或者在人工授精的情形下可使120匹母馬受孕；并且種公馬要表現(xiàn)出正常的性欲，陰莖外觀(guān)與功能正常，無(wú)生殖道感染，睪丸外觀(guān)與功能正常，間隔1 h 連續(xù)兩次采精，第二次采精的精液中直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)、形態(tài)與功能正常的精子（progressively motile, morphologically normal sperm,PMMNS）數(shù)不低于10 億個(gè)。自從該標(biāo)準(zhǔn)公布以來(lái)，PMMNS 數(shù)一直是種公馬配種可靠性評(píng)定的最重要指標(biāo)[1]。

種公馬配種可靠性評(píng)定的目的，是確定種公馬的精神狀態(tài)與生理狀況是否能夠保證將充滿(mǎn)活力的精子、沒(méi)有傳染病原的精液輸送到母馬的生殖道或人工采集到假陰道。評(píng)定結(jié)果主要用于以下三個(gè)方面：一是對(duì)種公馬未來(lái)的繁殖力進(jìn)行估計(jì)，二是用于種公馬交易前的常規(guī)評(píng)估，三是確定導(dǎo)致種公馬繁殖力低下的因素[2]。評(píng)定人員不僅評(píng)估精子的質(zhì)量和數(shù)量（以及精子承受低溫或冷凍儲(chǔ)存的能力），還測(cè)定種公馬的性欲和交配能力，鑒別那些可能會(huì)遺傳給后代或會(huì)降低種公馬生育能力的先天缺陷、可能通過(guò)性傳播途徑傳染的傳染病及其他任何可能會(huì)降低種公馬使用壽命的物理因素[3]。同時(shí)，該方法也用于預(yù)測(cè)在標(biāo)準(zhǔn)的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下一匹種公馬的配種力與繁育效益[4]。

種公馬配種可靠性評(píng)定的指標(biāo)越多，涉及到的影響因素也會(huì)越多，對(duì)評(píng)定結(jié)果的影響也會(huì)越大，例如種公馬的價(jià)值、評(píng)定的目的（如買(mǎi)賣(mài)、臨床診斷）、常規(guī)的發(fā)情季評(píng)定等。但任何對(duì)種公馬配種可靠性的評(píng)定至少要包括對(duì)種公馬全面的體況檢查與精液品質(zhì)評(píng)定。一般來(lái)說(shuō)，主要包括種公馬的歷史背景調(diào)查、身體外觀(guān)、生殖器、性欲和精液評(píng)定。評(píng)定者根據(jù)上述指標(biāo)對(duì)種公馬做出合格（satisfactory）、存疑（questionable）或不合格（unsatisfactory）的判定。種公馬精液質(zhì)量的合格標(biāo)準(zhǔn)：第一，種公馬相隔1 h兩次采精，第2次采集的精液中PMMNS 至少要有10 億個(gè)；第二，有兩個(gè)睪丸且睪丸的直徑最低要達(dá)8.0 cm；第三，產(chǎn)生與睪丸大小對(duì)應(yīng)的正常數(shù)量的精子[5]。

1 種公馬的歷史背景調(diào)查

評(píng)定之初，要確認(rèn)種公馬的身份，包括名字、年齡、品種、注冊(cè)號(hào)、體表形態(tài)學(xué)標(biāo)記、品種標(biāo)記以及毛旋；完整的種公馬背景信息應(yīng)包括使用現(xiàn)狀、血統(tǒng)、以往的配種表現(xiàn)、先前的繁殖力檢查結(jié)果、患病情況、受傷、藥物使用、疫苗接種、繁育管理（當(dāng)前與之前）以及現(xiàn)有的健康管理方案。

2 常規(guī)檢查

常規(guī)的體檢主要包括種公馬的體況評(píng)分，是否存在任何影響交配成功的缺陷或損傷（背部或腿部受傷），以及遺傳缺陷（隱睪癥、鸚鵡嘴、搖擺綜合征）。除了常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室檢查（如馬傳貧、血常規(guī)、血清、尿液分析、糞便蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)）外，循環(huán)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)等更應(yīng)詳細(xì)檢查。

在常規(guī)檢查時(shí)，應(yīng)特別注意馬的被毛和皮膚質(zhì)量、蹄和腿的品相、眼睛及其他身體部位。此外，應(yīng)徹底評(píng)估馬是否存在遺傳缺陷，例如，在美國(guó)，所有可能用于繁殖的種公馬正式配種前都要測(cè)定是否患有遺傳性局部皮膚功能退化（HERDA）和多糖貯積性肌肉萎縮（PSSM）。

3 生殖器官檢查

主要包括對(duì)種公馬生殖系統(tǒng)，包括外部和內(nèi)部生殖器官進(jìn)行評(píng)估。

陰莖必須能完全縮回體內(nèi)，各外生殖器官不應(yīng)有任何異常腫脹或增生的現(xiàn)象。外生殖器官包括陰莖、陰囊和睪丸等都應(yīng)該觸診正常。一種觀(guān)點(diǎn)認(rèn)為，種公馬必須有兩個(gè)睪丸，只有一個(gè)睪丸的公馬不應(yīng)該用于配種。

如果可能的話(huà)，應(yīng)該評(píng)估種公馬的內(nèi)生殖器官。有時(shí)候由于種公馬的性情、非常規(guī)的保定手段、設(shè)備等原因，可能會(huì)導(dǎo)致內(nèi)生殖器官的檢查難以進(jìn)行，此時(shí)絕不應(yīng)該以犧牲種公馬與檢查人員的安全為代價(jià)而冒險(xiǎn)進(jìn)行內(nèi)生殖器官檢查。直腸觸診和超聲檢查都可用于評(píng)估內(nèi)部生殖器官結(jié)構(gòu)，包括腹股溝內(nèi)環(huán)和各種附屬器官（如膀胱、尿道球腺和前列腺）的異常情況。

本項(xiàng)檢查一定要確保安全，由于有些種公馬在檢查人員檢查其內(nèi)生殖道時(shí)會(huì)發(fā)生咬、踢等行為，必要的時(shí)候可使用鼻拘或者使用鎮(zhèn)靜藥物。

4 性欲與交配能力評(píng)估

對(duì)種公馬進(jìn)行采精的過(guò)程也是一個(gè)可以對(duì)種公馬性欲與交配能力進(jìn)行評(píng)估的機(jī)會(huì)。在采精之前可對(duì)種公馬執(zhí)行如下操作：第一步，對(duì)種公馬試情，為采精做準(zhǔn)備；第二步，用中性肥皂和溫水清洗種公馬陰莖，特別注意尿道憩室，檢查是否有垢粒（beans）；第三步，徹底沖洗陰莖，用濕棉布擦干。

種公馬的性欲判別可以使用發(fā)情母馬來(lái)試情，同時(shí)可以測(cè)試其勃起與保持勃起的能力。隨后，可以評(píng)定種公馬爬跨母馬或臺(tái)馬的能力、將陰莖插入母馬或人工陰道的能力、抽插及完全射精的能力。

5 精液的評(píng)價(jià)

對(duì)精液進(jìn)行評(píng)價(jià)主要是評(píng)定精子品質(zhì)。評(píng)定時(shí)要求所有設(shè)備用具在37 ℃且沒(méi)有任何殺傷精子的因素下進(jìn)行。相關(guān)指標(biāo)的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)如下。

5.1 活力

在精液稀釋之前，首先進(jìn)行精子運(yùn)動(dòng)性能檢測(cè)。正常精子應(yīng)該運(yùn)動(dòng)迅速，而且60%～70%的精子應(yīng)在進(jìn)行直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)（或時(shí)而呈現(xiàn)大的環(huán)形運(yùn)動(dòng)），若低于該參考數(shù)的精液質(zhì)量需要進(jìn)一步分析。

5.2 形態(tài)

精子形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，與精子的頭頸部相連的中段部分常略偏一側(cè)，故精子常呈大的環(huán)形運(yùn)動(dòng)狀態(tài)。

5.3 濃度

種公馬每毫升精液中通常有0.8～1.0 億個(gè)精子，但在某些情形下精子濃度范圍擴(kuò)至0.5～9.5 億個(gè)/mL。

5.4 精液量

根據(jù)美國(guó)的相關(guān)資料顯示，種公馬每次射精的精液量參考范圍是20～200 mL,但目前生產(chǎn)中測(cè)定的一匹種公馬一次射精量通常在30～60 mL。

5.5 精液的外觀(guān)

正常的精液呈現(xiàn)淡乳白色，不應(yīng)該有任何“棕色或灰色”，否則意味著精液中有污垢，清洗陰莖可以減少精液被污染的機(jī)會(huì)。

6 配種可靠性評(píng)定（BSE）的新發(fā)展

自1975 年以來(lái)，不斷有新技術(shù)引入種公馬配種可靠性的評(píng)估中，以提高評(píng)估精子濃度、活力和形態(tài)的客觀(guān)性和準(zhǔn)確性[6]。這些方法包括精子濃度的熒光測(cè)定、計(jì)算機(jī)輔助精子活力分析（computer-assisted sperm motility analysis,CASA）和用于評(píng)估精子形態(tài)的差異干涉對(duì)比（differential interference contrast,DIC）的顯微鏡技術(shù)。然而與傳統(tǒng)的技術(shù)相比較，在應(yīng)用這些新技術(shù)于種公馬配種可靠性的評(píng)定時(shí)出現(xiàn)了一些新的問(wèn)題。例如，以10 億個(gè)/mL 精子的標(biāo)準(zhǔn)判定一匹種公馬合格、存疑或不合格時(shí)，新技術(shù)的使用導(dǎo)致評(píng)定合格的種公馬數(shù)量減少[7]；CASA 技術(shù)用于評(píng)定種公馬精液品質(zhì)時(shí)，相關(guān)參數(shù)在配種季和非配種季之間變化顯著，在非配種季的測(cè)定值更低[8]。精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析（sperm chromatin structure assay, SCSA）用于測(cè)定精子DNA在酸性溶液中經(jīng)過(guò)一個(gè)短期的培養(yǎng)后發(fā)生變性的易感性。該技術(shù)基于這樣一個(gè)假說(shuō)，精子DNA 在酸性溶液中發(fā)生變性的可能性更高而變得不穩(wěn)定，結(jié)果會(huì)導(dǎo)致精子受精力的下降[9]。

此外，人們?cè)谏a(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，在基于使用鮮精或凍精的配種方案中，種公馬精液評(píng)估應(yīng)有一定的限制條件。許多種公馬在某農(nóng)場(chǎng)或者具體環(huán)境條件下表現(xiàn)出繁殖力與精液品質(zhì)非常優(yōu)秀，但保存精液（無(wú)論是凍精還是冷藏鮮精）繁殖力或精液質(zhì)量都難以令人滿(mǎn)意。因此，如果條件允許，這些種公馬需要進(jìn)行重新鑒定，并對(duì)精液的處理方法進(jìn)行改進(jìn)，以最大程度地發(fā)揮種公馬的繁殖力[4]。因此，人們?cè)谠u(píng)定種公馬，特別在使用任何新技術(shù)時(shí)，對(duì)使用該技術(shù)得到的結(jié)果的解讀對(duì)種公馬配種可靠性的評(píng)定有重要影響。而且，母馬及飼養(yǎng)管理因素也應(yīng)該包括在種公馬配種可靠性的評(píng)定中。

7 結(jié)語(yǔ)

2020 年9 月，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部與國(guó)家體育總局聯(lián)合印發(fā)《全國(guó)馬產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃（2020—2025）》，規(guī)劃中明確提出要加強(qiáng)馬匹育種創(chuàng)新。種公馬選育、評(píng)定、使用的創(chuàng)新必然是馬匹育種創(chuàng)新的主要環(huán)節(jié)，因?yàn)榉N公馬的性能表現(xiàn)直接影響下一代的繁育效率與育種進(jìn)展。中國(guó)有眾多的地方馬種資源，每個(gè)品種的繁殖性能有屬于本品種的特點(diǎn)。因此，有必要對(duì)各地方品種種公馬的繁殖性能評(píng)價(jià)建立相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)，包括評(píng)價(jià)項(xiàng)目、技術(shù)路線(xiàn)、實(shí)施主體、新技術(shù)的運(yùn)用等，為中國(guó)馬匹育種創(chuàng)新提供重要的技術(shù)保障。