曹仲厚

（長江航務(wù)管理局疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科 湖北 武漢 430000）

1.資料與方法

1.1 一般資料

將我科2015年3月至2018年3月收治的60例小兒血管瘤患者及同時(shí)期于我科行體檢的20例非血管瘤兒童作為觀察對照，以血管瘤患者為血管瘤組，以非血管瘤患者為對照組。所有血管瘤患兒均符合小兒血管瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且為初次發(fā)病，首次就診，并除外患有其他小兒疾病者，所有患兒均由家屬簽署知情同意書。血管瘤組，男33例，女37 例，年齡1～6歲，平均（3.35±1.17）歲，病程3個月～13個月，平均（6.89±3.18）個月。血管瘤組，男33例，女37例，年齡1-6歲，平均（3.35±1.17）歲，病程3 個月-13 個月，平均（6.89±3.18）個月。對照組，男12例，女8例，年齡1-7歲，平均（3.81±1.31）歲，病程4個月～12個月，平均（6.37±3.28）個月。兩組性別、年齡及病程比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，具可比性。同時(shí)根據(jù)血管瘤分期將患者分為增生期組及消退期組，患者分別為33例及27例。

1.2 檢測方法

將所有標(biāo)本進(jìn)行10%福爾馬林固定處理，并石蠟包埋。按Trizol一步法提取標(biāo)本內(nèi)的RNA，將提取后的RNA 通過DEPC 溶液稀釋50倍，選用酶標(biāo)儀測量OD260、OD280 以及OD260/OD280，同時(shí)計(jì)算出現(xiàn)標(biāo)本的Toal RNA 含量。根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，逆轉(zhuǎn)錄后，取15ng cDNA 擴(kuò)增，擴(kuò)增有效率達(dá)95%以上時(shí)，即可排除非特異性擴(kuò)增及引物二聚體。根據(jù)樣本熒光強(qiáng)度檢測樣本PI3k 和p-Akt 表達(dá)水平。

1.3 觀察指標(biāo)

所有入選血管瘤患兒均于入選第二日進(jìn)行血管瘤標(biāo)本采集，同時(shí)對照組兒童隨機(jī)選取部位采集皮膚標(biāo)本，進(jìn)行PI3k mRNA及p-Akt mRNA檢測。同時(shí)對血管瘤組中不同分期患者PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 含量差異進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

以SPSS19.0分析，PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 均為計(jì)量數(shù)據(jù)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用t 檢驗(yàn)及ROC 分析進(jìn)行分析。當(dāng)P＜0.05時(shí)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 PI3k mRNA及p-Akt mRNA含量差異

血管瘤組患者PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 含量明顯高于對照組（P＜0.05）。

表1 PI3k mRNA及p-Akt mRNA含量差異

2.2 不同分期PI3k mRNA及p-Akt mRNA含量差異

血管瘤組患者中，增生期組患者PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 明顯高于消退期組（P＜0.05）。

表2 不同分期PI3k mRNA及p-Akt mRNA含量差異

3.討論

小兒血管瘤具有毛細(xì)血管瘤、蔓狀血管瘤、海綿狀血管瘤和混合型血管瘤、血管瘤性綜合征等幾種分型，這些腫瘤多集中于頭頸部，通常于患兒出生幾周內(nèi)出現(xiàn)，并于數(shù)個月內(nèi)快速增大，待患兒年齡超過1 歲以后，癥狀可于數(shù)年內(nèi)逐步衰退?，F(xiàn)代研究顯示，血管瘤發(fā)生發(fā)展可能與細(xì)胞間的信號傳遞以及內(nèi)皮細(xì)胞基因表達(dá)異常有關(guān)。我們的研究中，血管瘤組患者p-Akt mRNA 含量為0.068±0.015，明顯高于對照組，提示p-Akt 參與到了血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞凋亡過程中。我們對比不同分期PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 含量差異發(fā)現(xiàn)，血管瘤組患者中，增生期組患者PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 含量明顯高于消退期組，這也證明了PI3k、p-Akt 參與并介導(dǎo)了血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡過程。

綜上所述，PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 檢測對小兒血管瘤的診斷及臨床分期存在顯著意義，小兒血管瘤患者的PI3k、p-Akt 表達(dá)水平顯著高于正常兒童。且增生期患兒PI3k、p-Akt 表達(dá)水平顯著高于消退期患兒，臨床可將PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 檢測作為診斷及評估小兒血管瘤分期的依據(jù)。