周景林 趙紅慶 鄒林 高潔 高翔 王萍 王瑜 田佩瑤 馬騰蛟 宋月 李金 石偉先

流感是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病，對于有慢性病(如高血壓、糖尿病)的老年人、孕婦等高危人群會造成較大的危害。流感病毒易變異，易通過免疫逃避在人群中流行[1]。在溫帶地區(qū)流感的流行具有明顯的季節(jié)性，北京市地處北方，每年秋冬季為流感流行高峰季節(jié)?，F(xiàn)通過了解北京市通州區(qū)健康人群流感抗體水平，對流感流行趨勢進行預(yù)測預(yù)警，為制定有效防控措施提供科學(xué)依據(jù)。

1 對象與方法

1.1調(diào)查對象與內(nèi)容 2017年4月，通過多階段整群隨機抽樣法于通州區(qū)人口密集的城鎮(zhèn)梨園鎮(zhèn)、永順鎮(zhèn)及人口密度較低的鄉(xiāng)鎮(zhèn)永樂店鎮(zhèn)、西集鎮(zhèn)農(nóng)村,抽取60歲以下健康成人及兒童居民作為調(diào)查對象，共調(diào)查510人。獲得知情同意后對調(diào)查對象進行面訪，填寫調(diào)查問卷，調(diào)查內(nèi)容包括：姓名、性別、年齡、一年內(nèi)季節(jié)性流感疫苗接種史。

1.2標(biāo)本采集與血清抗體檢測 采集靜脈血5 mL，分離血清。血清處理程序參考《全國流感監(jiān)測技術(shù)指南(2017版)》進行。利用血凝抑制實驗(hemagglutination inhibition，HI)檢測甲型H1N1、甲型H3N2、乙型Victoria系、乙型Yamagata系(以下簡稱H1N1、H3N2、BV、BY)4種季節(jié)性流感病毒抗體，制備4個凝集單位抗原，雞胚分離株甲型/Michigan/45/2015(H1N1) pdm09、甲型/ Hong Kong/4801/2014 (H3N2)、乙型/Brisbane/60/2008(BV)、乙型/Phuket/3073/2013(BY)由國家流感中心提供，各抗原相應(yīng)的陽性血清(英國生物制品檢定所生產(chǎn))作為陽性對照，實驗時每板加入陽性對照血清，各板陽性血清滴度相差2倍以上視為結(jié)果無效。HI滴度為抑制紅細胞凝集的血清最大稀釋度的倒數(shù)，HI滴度≥1∶40判定為陽性，HI滴度<1∶10以5計，計算幾何平均滴度(geometric mean titer，GMT)。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 采用EpiData 3.1軟件建立數(shù)據(jù)庫，SPSS 20.0軟件進行統(tǒng)計分析。不同組間的抗體陽性率比較，采用Pearsonχ2檢驗；不同組間血清抗體滴度(GMT)水平比較，正態(tài)分布數(shù)據(jù)兩組間比較采用獨立t檢驗，多組間比較采用ANOVA檢驗，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)比較采用非參數(shù)Kruskal WallisH檢驗。通過非條件Logistic回歸分析人群血清抗體陽性的影響因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1總體檢測情況 所調(diào)查的510人中375人有至少一種陽性抗體，總體陽性率為73.53%， H1N1、H3N2、BV、BY抗體陽性率分別為48.63%、59.01%、3.33%和16.27%，不同亞型病毒抗體陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=487.9，P<0.001，表1)。人群H1N1、H3N2、BV、BY四種抗體HI滴度分布見圖1。GMT分析結(jié)果顯示，H3N2抗體的GMT最高， BV抗體GMT最低(表2)。經(jīng)非參數(shù)Kruskal WallisH檢驗，不同亞型病毒抗體GMT間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(H=658.694，P<0.001)。

2.2影響人群季節(jié)性流感抗體水平的單因素分析

表1 2017年通州區(qū)不同分組健康成人及兒童血清中季節(jié)性流感抗體陽性率比較

2.2.1不同區(qū)域人群抗體水平比較：共計調(diào)查城鎮(zhèn)260人，其中190人至少一種抗體為陽性，陽性率為73.08%；鄉(xiāng)村250人，其中186人至少一種抗體陽性，陽性率為74.40%。城鎮(zhèn)人群H3N2抗體陽性率及H1N1、H3N2、BY抗體GMT水平均高于鄉(xiāng)村人群，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，表1和2)。

2.2.2不同性別人群抗體水平比較：共計調(diào)查男性256人，其中183人至少一種抗體為陽性，陽性率為71.48%；女性254人，其中192人至少一種抗體陽性，陽性率為75.59%。四種亞型抗體陽性率及抗體GMT水平在不同性別間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，表1和2)。

圖1 2017年通州區(qū)健康成人與兒童血清中流感病毒抗體水平

2.2.3不同年齡組人群抗體水平比較：共計調(diào)查5歲及以下兒童116人，6～18歲中小學(xué)生129人，19～25歲青年72人，26～59歲成人193人，各年齡組至少一種抗體陽性人數(shù)分別為60人、126人、57人和117人，陽性率分別為51.72%、97.67%、79.17%和60.62%；6～18歲中小學(xué)生四種抗體陽性率及GMT均為最高，5歲及以下兒童抗體陽性率及GMT均為最低，各年齡組H1N1、H3N2、BY抗體檢測陽性率及4種抗體GMT水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001，表1和2)。

表2 2017年通州區(qū)不同分組健康成人及兒童血清中季節(jié)性流感抗體水平比較

2.2.4不同疫苗接種史成人抗體水平比較：510人中在過去一年內(nèi)接種過流感疫苗的有257人，其中254人至少有一種抗體陽性，陽性率為98.83%；253人在過去一年內(nèi)未接種過流感疫苗，其中199人至少有一種抗體陽性，陽性率為78.66%；統(tǒng)計分析結(jié)果顯示，過去一年內(nèi)有流感疫苗接種史人群組的四種抗體陽性率及GMT均高于無疫苗接種史組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001，表1和2)。

2.3影響健康成人季節(jié)性流感抗體陽性率的多因素分析 多因素非條件Logistic回歸分析結(jié)果顯示，過去一年內(nèi)接種過流感疫苗是H1N1抗體陽性率較高的影響因素；H3N2抗體陽性率較高的影響因素包括年齡(19～25歲青年、26～59歲成人)及過去一年內(nèi)接種過流感疫苗；BY抗體陽性率較高的影響因素包括年齡(6～18歲中小學(xué)生)及過去一年內(nèi)接種過流感疫苗(表3)。

3 討論

3.1通州區(qū)流感活動為典型的季節(jié)性流行，一般每年10月份開始增多，12月-次年1月達到高峰，3月份開始消退。2017-2018年流感監(jiān)測季中流感病毒活動強度明顯高于往年同期水平，病原學(xué)監(jiān)測結(jié)果顯示，2017-2018年監(jiān)測季BY、H1N1、H3N2、BV核酸檢測陽性率分別為37.44%、11.40%、10.23%和1.63%，同時，由流感病毒引起的集中發(fā)熱疫情數(shù)量也遠遠超過往年同期水平，其中，58.82%為BY導(dǎo)致，而北京市2012-2015年流感暴發(fā)疫情91.18%由甲型H3N2引起[2]。本研究結(jié)果顯示，健康人群中H3N2、H1N1流感病毒保護性抗體較高，而人群中BV、BY保護性抗體陽性率較低，提示人群血清抗體監(jiān)測可為流感病毒流行預(yù)警提供較好的科學(xué)依據(jù)。雖然BV的人群抗體陽性率最低，但BV在人群中流行強度并不高，其原因有待進一步研究。

3.2人群流感抗體水平與年齡、疫苗接種及既往感染等因素有關(guān)[3]。本研究也顯示，接種流感疫苗是預(yù)防流感的有效手段。2016-2017年，北半球流感疫苗成分為A/California/7/2009 (H1N1)、A/Hong Kong/4801/2014 (H3N2)、B/Brisbane/60/2008-like virus(BV)，本研究除使用以上三種毒株以外，同時使用B/Phuket/3073/2013毒株檢測了BY抗體水平，結(jié)果顯示，人群中BY抗體陽性率高于BV的，其原因可能與通州區(qū)2015-2016年及2016-2017年流感流行季中流行的乙型流感病毒以BY為主有關(guān)，也可能與免疫記憶相關(guān)。有研究表明，對于曾感染過BY或接種過BY成分疫苗人群，接種含BV組分的疫苗時，人體產(chǎn)生對BV的免疫應(yīng)答反應(yīng)會喚醒機體對BY的較強免疫記憶，從而導(dǎo)致BY抗體陽性率高于BV[4]。

表3影響北京市通州區(qū)健康成人及兒童季節(jié)性流感抗體陽性率的多因素分析

注：NS*=not statistically significant，表示差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

3.3研究結(jié)果顯示，6～18歲中小學(xué)生疫苗接種率及四種季節(jié)性抗體水平均高于其他年齡組，這與北京市近年來推行的中小學(xué)生免費接種流感疫苗政策相關(guān)。本研究中男性與女性間季節(jié)性流感病毒抗體差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與流感病毒對人群的感染無性別差異相關(guān)報道結(jié)果一致[5]。文獻報道不同地區(qū)流感流行強度大小與當(dāng)?shù)厝丝诿芏群腿丝诹鲃宇l率呈正相關(guān)[6]，本研究中單因素分析結(jié)果顯示人口較為密集的城鎮(zhèn)人群甲型H1N1、H3N2、BY抗體水平高于人口密度較低的鄉(xiāng)村，而多因素分析結(jié)果則顯示區(qū)域差異不是影響抗體水平的主要因素。