彭文培 陳 敏

(成都大熊貓繁育研究基地，成都，610000)

大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)是中國特有的珍稀動物，有“國寶”和“活化石”之稱。圈養(yǎng)條件下雌性大熊貓性成熟年齡為(5.7±1.1歲)，發(fā)情期主要集中在3—5月，少數(shù)在1—2月和6月[1]以及8、9月發(fā)情，除對正常的春季發(fā)情有大量研究報道外，對于大熊貓在8、9月的秋季發(fā)情情況，也有研究者進行了報道，如馮文和等[2]研究認為春季未發(fā)情的個別雌性大熊貓在秋季也可能有微弱的發(fā)情表現(xiàn)，藍景超等[3]觀察到1只由于環(huán)境、飼料等因素的改變，春季未發(fā)情的經(jīng)產(chǎn)雌性大熊貓在9月中旬出現(xiàn)了典型的發(fā)情行為且配種產(chǎn)仔，陳亞等[4]也報道了峨眉山大熊貓館發(fā)生初情大熊貓在8月下旬至9月上旬發(fā)情的情況。以上報道的大熊貓都屬1年1次的發(fā)情，本文作者在2016—2017年間于成都大熊貓繁育研究基地觀察到4只雌性大熊貓(包括初配和經(jīng)配大熊貓)1年發(fā)情2次的情況，此種情況比較罕見，國內(nèi)外鮮有記錄。為此，本文將對該4例大熊貓1年發(fā)情2次的異常情況進行介紹，旨在為圈養(yǎng)大熊貓飼養(yǎng)繁育工作提供參考。

1 觀察對象和方法

1.1 研究地點和觀察對象

成都大熊貓繁育研究基地位于四川省成都市成華區(qū)，基地占地100 hm2，環(huán)境良好，設施設備完善，基地以原成都動物園80年代搶救留下的6只病、餓大熊貓為基礎，經(jīng)過幾代人的努力，目前人工圈養(yǎng)種群數(shù)量已達184只，飼養(yǎng)技術處于領先水平。本研究所涉及的大熊貓有4只，具體情況見表1。

1.2 大熊貓日常管理

經(jīng)過調(diào)查，4只大熊貓都在基地各獸舍飼養(yǎng)過(太陽、月亮產(chǎn)房主要用于大熊貓發(fā)情配種及產(chǎn)仔使用，產(chǎn)房內(nèi)含有若干獸舍，且有獨立的配種間。每年雌性還未發(fā)情時基地便將雌性動物隨機分配到太陽、月亮產(chǎn)房內(nèi)為發(fā)情交配做好準備。每只大熊貓享有兩個連通的室內(nèi)獸舍及一個室外運動場，獸舍及運動場條件一致且符合《大熊貓國內(nèi)借展場館設計規(guī)范》(LY/T 2769—2016)的要求，配種間設置多個隔間在保證大熊貓雌雄個體互相交流信息的同時又確保其安全)，在出現(xiàn)1年發(fā)情2次的年份，發(fā)情期香冰、北川、雙欣飼養(yǎng)在太陽產(chǎn)房，婭仔飼養(yǎng)在月亮產(chǎn)房?；馗鳙F舍飼養(yǎng)管理水平、竹類投放情況一致，獸舍環(huán)境也基本一致。

1.3 發(fā)情判定方法

本研究采用行為觀察法和激素測定法同時監(jiān)測，互為補充，并綜合發(fā)情行為表現(xiàn)、激素的波動水平來判斷雌性大熊貓的最佳配種時間。行為觀察法和激素測定法參照楊勝林等[5]的方法進行，即：當觀察到大熊貓出現(xiàn)發(fā)情行為、生理變化：采食下降，走動增多，出現(xiàn)做標記、戲水等行為以及外陰腫脹、外翻等生理變化的情況下，啟動激素測定程序，進行尿中孕激素、雌激素的檢測。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)情行為表現(xiàn)

4只大熊貓在2016、2017年春季和秋季分別出現(xiàn)發(fā)情的行為特征和外陰發(fā)生明顯的生理變化。具體表現(xiàn)見表2。

表2 4只雌性大熊貓的發(fā)情表現(xiàn)情況Tab.2 The signs of estrus of gaint panda

注：表中行為表現(xiàn)縮寫參考張志和和魏輔文[6]，SM：蹭陰；MAS：自淫；AM：親近雄性；HHM：吼擊雄；WHP：待配；CH：吱吱叫；BL：咩叫
Note：The abbreviations of behavior in the table refer to ZHANG Zhihe and WEI Fuwen(2006)，SM：scent mark.MAS：masturbation.AM：approach male.HHM：howl hit male.WHP：warped-tail phenomenon.CH：chirp；BL：bleat

2.2 激素變化情況

4只雌性大熊貓在2016、2017年的春秋季發(fā)情時，其尿中雌激素也呈規(guī)律性變化(圖1)。(其中因北川在2016年12月出現(xiàn)冬季發(fā)情，當時飼養(yǎng)員未將其行為作為發(fā)情處理，尿液收集時已過高峰期，故未進行激素分析)。

圖1 4只雌性大熊貓在發(fā)情高峰尿液中的雌激素水平變化圖Fig.1 The estrogen concentration in giant panda’s urine during heat period

2.3 發(fā)情配對情況

4只雌性大熊貓均在發(fā)情高潮期時進行配對(除北川是第1只于冬季發(fā)情的雌性大熊貓，因此錯過了最佳配對時間，未能配對)，配對的雄性大熊貓均有后代。

表3 4只雌性大熊貓的發(fā)情配對情況Tab.3 The signs of mating of gaint panda

3 討論

大多數(shù)野生大熊貓的發(fā)情期出現(xiàn)在4月中旬，受棲息地緯度、海拔高度和異常氣候變化的影響，也會出現(xiàn)稍有提前(3月下旬)或延遲(5月上旬)的現(xiàn)象[7]。圈養(yǎng)條件下，據(jù)已有的研究報道，大熊貓發(fā)情時間差異較大，但也主要集中在每年的3—5月，極少數(shù)在其他月份[1-4]。本研究的4 只雌性大熊貓在1年中均出現(xiàn)2次發(fā)情行為表現(xiàn)和雌激素規(guī)律變化，其結(jié)果表明少數(shù)大熊貓也存在1年發(fā)情2次的情況，且2次發(fā)情行為表現(xiàn)明顯，這是否正常，還待進一步研究。

有研究顯示大熊貓由于哺乳影響了雌激素的分泌水平，致使其發(fā)情時間推遲至秋季[8]，但本研究這4只雌性大熊貓均未有懷孕育幼歷史，因此，該說法無法解釋這4只大熊貓12月發(fā)情的情況。此外，有資料表明飼料中的植物性雌激素可以發(fā)揮雌激素的作用，從而影響動物的生殖[9]。大豆含有較為豐富的植物雌激素[10]，基地從2005年改進大熊貓精飼料配方后，大熊貓日常精飼料中大豆比例達到16%。然而，基地圈養(yǎng)大熊貓食用的精飼料均一樣，其他雌性大熊貓也未曾出現(xiàn)1年發(fā)情2次的情況。不過大熊貓生理周期的變化是否會受食物中雌激素的影響還有待進一步考證。藍景超等[3]曾推測旅日大熊貓“梅梅”的秋季發(fā)情可能與肥胖以及減肥過程中飲食結(jié)構(gòu)變化有關，而峨眉山的“平平”也可能是因為經(jīng)歷過減肥過程致使“平平”發(fā)情延緩，出現(xiàn)8月發(fā)情的情況[4]。本文所涉及的4只熊貓，體重指標屬正常標準，均未大幅度地改變其日糧水平，因此這一原因也無法解釋本研究出現(xiàn)的特殊情況。也有報道指出，圈舍地形及圈舍植被的改變會引起發(fā)情率的提高[11]。基地為待配雌、雄個體，待產(chǎn)雌性個體設置月亮產(chǎn)房、太陽產(chǎn)房以供其配種繁育，且其圈舍植被、地形并未大范圍改變，因此圈舍條件也無法解釋其1年發(fā)情2次現(xiàn)象。另一方面，有人提出提前發(fā)情可能與氣候，溫度等有關，然而近幾年生活在臺北、香港、廣州、泰國、新加坡、馬來西亞，甚至是南半球的澳大利亞的大熊貓也能正常發(fā)情，發(fā)情時間有的正常，有的出現(xiàn)提前現(xiàn)象，與大熊貓來源地四川相比，這些地方在地理和氣候方面有非常大的差異，可見大熊貓對地理和氣候環(huán)境具有較強的適應能力[11]。

我們注意到，除大熊貓“雙欣”為初配個體外，其余個體為經(jīng)配雌性大熊貓，然均未有過懷孕育幼經(jīng)歷，尤其經(jīng)配雌性大熊貓“香冰”，多次觀察其配種后3個月左右，隨著孕激素大幅度的上升又下降，會出現(xiàn)減食、坐立不安、舔外陰等待產(chǎn)行為，甚至觀察到其有抱筍現(xiàn)象——狀似懷抱新生大熊貓的行為，卻從未生育過一次，且4只大熊貓發(fā)情期雌二醇波動均處于有關研究的發(fā)情期雌二醇含量變化范圍內(nèi)，在發(fā)情高潮中，尿中雌二醇濃度迅速升高，在發(fā)情后期又逐漸下降到發(fā)情前水平[5，12-13]。

雌激素降到最低水平時，正常情況表示已排卵，汪謙[14]認為在發(fā)情期間，有的會排出正常卵子而有的未排卵或排不出正常卵。未排卵情況出現(xiàn)尿中雌酮含量變化，可能由兩種原因引起：(1)見于無排卵性功能性子宮出血或受藥物刺激，如：HCG等；(2)卵巢腫瘤或患肝臟疾患時，因肝臟不能將雌激素滅活，尿中排出量增加[15]。這4只大熊貓均未產(chǎn)過仔，因此我們推測其生殖機能可能存在異常，導致其發(fā)情期出現(xiàn)異常情況，但具體原因有待進一步研究方能確定。