朱風(fēng)華，陳 甫，徐進(jìn)棟，朱連勤*

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東青島 266109；2. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，山東青島 266109；3. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)與信息科學(xué)學(xué)院，山東青島 266109）

畜牧生產(chǎn)中常用的飼料原料及配合飼料被霉菌毒素污染問題較為普遍，這是由于農(nóng)作物（玉米、油菜、花生、水稻、小麥、棉花等）在生長、收獲過程中，尤其是在洪澇、蟲害等環(huán)境脅迫下，極有可能遭遇來自空氣傳播或者蟲害攜帶的產(chǎn)毒真菌污染[1]。該類真菌在代謝過程中產(chǎn)生大量的次級代謝產(chǎn)物——霉菌毒素會進(jìn)一步污染農(nóng)作物，同時(shí)被污染的谷物產(chǎn)品在收獲、加工及貯藏過程中的溫、濕度常常有利于霉菌的繁殖，從而使谷物被多種毒素污染。本實(shí)驗(yàn)室對2017 年飼料原料調(diào)查發(fā)現(xiàn)，對畜禽飼料污染嚴(yán)重的嘔吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）和黃曲霉毒素B1（AFB1）檢出率分別為23.92%、49.21% 和40.85%，超標(biāo)率分別為5.84%、41.55%和10.00%[2]。由于每年的氣候條件有所變化，飼料加工及儲藏的環(huán)境不一，飼料原料被毒素污染的狀況也有所不同，2018 年繼續(xù)對收集于山東各地的飼料原料及配合飼料進(jìn)行霉菌毒素污染狀況檢測，為確保飼料及養(yǎng)殖業(yè)飼料質(zhì)量安全提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集與制備 2018 年1—12 月，于山東省各地規(guī)?；瘎游镳B(yǎng)殖場、飼料廠采集樣本3 669 個(gè)，其中原料2 237 份：玉米1 521 份、玉米副產(chǎn)物677 份（玉米DDGS 458 份、玉米蛋白粉54 份、玉米胚芽餅粕165 份），花生餅粕10 份、其他29 份（米糠及粕7 份、小麥14 份、小麥胚芽8 份）；配合飼料1 432 份（奶牛精料補(bǔ)充料16 份、產(chǎn)蛋鵪鶉12 份、雛雞68 份、生長及產(chǎn)蛋雞257份、雛鴨132 份、生長及產(chǎn)蛋鴨352 份、仔豬80 份、生長豬246 份、青年母豬202 份、育肥豬67 份）。

樣品采集方法按GB/T 14699.1-2005《飼料采樣》進(jìn)行。樣品采集后，風(fēng)干飼料用四分法縮減取樣約200 g，粉碎過20 目篩后，裝入自封袋貼好標(biāo)簽，置于-20℃冰箱備用。

1.2 檢測項(xiàng)目與方法 利用上轉(zhuǎn)發(fā)光（UPT）競爭抑制免疫層析法，采用多參數(shù)控溫測定試劑盒（AFB1、ZEN、DON）提供的方法分別檢測飼料中AFB1、ZEN、DON 含量，按照試劑盒中固體樣品前處理方法進(jìn)行，AFB1、ZEN 分別用70%甲醇制取提取液，DON用去離子水制取提取液。本試驗(yàn)檢測樣品利用試劑盒中的參數(shù)卡1 進(jìn)行。上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫分析儀為北京熱景生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)。

1.3 霉菌毒素的檢出限及回收率 3 種霉菌毒素的檢出限及回收率見表1。

表1 3 種霉菌毒素的檢出限及回收率

1.4 限量值和參考標(biāo)準(zhǔn) 飼料原料限量值和參考標(biāo)準(zhǔn)見表2。

表2 飼料原料限量值和參考標(biāo)準(zhǔn)

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 采用 SAS9.3 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，描述性統(tǒng)計(jì)量采用means 過程，頻數(shù)統(tǒng)計(jì)采用freq 過程。

2 結(jié)果與分析

2.1 全部被檢飼料原料中霉菌毒素的檢測結(jié)果 如表3所示，被檢飼料原料霉菌毒素污染率為75.64%，其中DON 污染率為62.58%，超標(biāo)率為1.79%，ZEN 污染率為43.23%，超標(biāo)率為12.82%，AFB1污染率為39.20%，超標(biāo)率為7.18%。2 種毒素交叉污染較為普遍，DON、ZEN 交叉污染率為37.19%（832/2 237），ZEN、AFB1交叉污染率為24.77%（554/2 237），DON、AFB1交叉污染率 為28.83%（645/2 237），DON、ZEN、AFB13種毒素交叉污染率為21.41%（479/2 237）。

表3 所有飼料原料中霉菌毒素檢測結(jié)果

2.2 玉米中霉菌毒素檢測結(jié)果 如表4 所示，玉米3 種毒素污染以DON 為最高，污染率為51.02%，最高含量為 7 520.00 μg/kg，是限量標(biāo)準(zhǔn)的1.67 倍，超標(biāo)率為0.39%。其次，AFB1污染率為30.70%，最高含量為 100.00 μg/kg，達(dá)檢出上限，是限量標(biāo)準(zhǔn)的3.3 倍，超標(biāo)率為9.85%；ZEN 污染率為27.94%，最高含量為3 546.92 μg/kg，是限量標(biāo)準(zhǔn)的7.09 倍，超標(biāo)率為12.47%。

表4 玉米中霉菌毒素檢測結(jié)果

2.3 玉米副產(chǎn)品中霉菌毒素檢測結(jié)果 由表5 可見，各種玉米副產(chǎn)品DON 污染率最高的為DDGS，檢出率為96.29%，中值1 130.00 μg/kg，超標(biāo)率為0.23%。玉米胚芽餅粕檢出率為82.42%，最高含量為1 7040.00 μg/kg，是限量標(biāo)準(zhǔn)的3.4 倍，中值為1 250.00 μg/kg，超標(biāo)率為14.71%。玉米蛋白粉檢出率為44.44%，最高含量2 840.00 μg/kg，不超標(biāo)。

玉米副產(chǎn)物DDGS、玉米蛋白粉和玉米胚芽餅粕ZEN 的檢出率分別為74.02%、70.37%和90.91%，最高含量分別為9 438.70、1 563.56、2 328.92 μg/kg，均超過限量標(biāo)準(zhǔn)，中值分別為106.85、296.12、211.93 μg/kg，超標(biāo)率分別為1.18%、39.47%、34.67%。

AFB1污染率最高的是玉米胚芽餅粕，檢出率為79.39%，最高含量為100.00 μg/kg，達(dá)檢出上限，中值為9.65 μg/kg，超標(biāo)率9.16%。其次，玉米蛋白粉和DDGS，檢出率分別為64.81%、50.44%，最高含量都為57.87、91.42 μg/kg，中值分別為14.53、4.95 μg/kg，超標(biāo)率為2.86%和1.30%。

表5 玉米副產(chǎn)品中霉菌毒素檢測結(jié)果

2.4 花生餅粕霉菌毒素的檢測結(jié)果 由表6 可知，花生餅粕DON 檢出率為10.00%，最高含量560.00 μg/kg，不超標(biāo)；ZEN 檢出率為30.00%，最高含量71.26 μg/kg，也不超標(biāo)。AFB1污染比較嚴(yán)重，檢出率為80.00%，最高含量54.92 μg/kg，中值為26.90 μg/kg，超標(biāo)率為12.50%。

表6 花生粕霉菌毒素檢測結(jié)果

2.5 小麥及副產(chǎn)物中霉菌毒素檢測結(jié)果 由表7 所示，小麥中DON 污染率為92.86%，最高含量為5 290.00 μg/kg，中值2 900.0 μg/kg，超標(biāo)率為7.69%。小麥胚芽污染率為87.50%，最高含量為4 500.00 μg/kg，不超標(biāo)；小麥和小麥胚芽ZEN 污染率分別為35.71%、50.00%，最高含量分別為301.58、423.49 μg/kg，都不超標(biāo)。小麥胚芽中AFB1未檢出。小麥中AFB1污染率為14.29%，最高含量10.66 μg/kg，不超標(biāo)。

表7 小麥及副產(chǎn)物中霉菌毒素檢測結(jié)果

2.6 米糠粕中霉菌毒素檢測結(jié)果 米糠粕DON 污染率28.57%，含 量 為280.00～440.00 μg/kg，中 值36.00 μg/kg，超標(biāo)率0.00%。ZEN 檢出率為42.86%，最高含量123.93 μg/kg，不超標(biāo)。AFB1檢出率為42.86%，最高含量為3.81 μg/kg，也不超標(biāo)（表8）。

表8 米糠粕中霉菌毒素檢測結(jié)果

2.7 配合飼料中霉菌毒素的檢測結(jié)果

2.7.1 全部配合飼料中霉菌毒素的檢測結(jié)果 被檢飼料配合料霉菌毒素污染率為87.43%，其中DON 污染率為77.37%，超標(biāo)率為0.81%。ZEN 污染率為57.05%，超標(biāo)率為4.04%。AFB1污染率為45.88%，超標(biāo)率為2.74%。DON、ZEN 交 叉 污 染 率 為50.84%，ZEN、AFB1交叉污染率為33.87%， DON、AFB1交叉污染率為39.11%，DON、ZEN、AFB13 種毒素交叉污染率為30.94%（表9）。

表9 所有飼料配合料中霉菌毒素檢測結(jié)果

2.7.2 家禽配合飼料中霉菌毒素的檢測結(jié)果 由表10 可知，家禽配合飼料3 種毒素污染鴨飼料首當(dāng)其沖，雛鴨飼料DON 檢出率較高為93.94%，ZEN 和AFB1檢出率分別為78.79%、68.94%，DON 最高含量為2 400.00 μg/kg，不超標(biāo)。ZEN 和AFB1的最高含量分別為1 542.08、13.41 μg/kg，中值分別為200.82、6.48 μg/kg，超標(biāo)率分別為6.73%、5.49%。生長及產(chǎn)蛋鴨DON、ZEN 和AFB1檢出率分別為88.64%、72.44%和47.16%，最高含量分別為63 000.00、1 219.52、43.13 μg/kg，超標(biāo)率分別為0.64%、3.92%、3.61%。

雞配合飼料污染狀況相對嚴(yán)重，雛雞配合飼料DON、ZEN 和AFB13 種毒素檢出率分別為83.82%、85.29%和69.12%，DON 最高含量為1 440.00 μg/kg，不超國家標(biāo)準(zhǔn)；ZEN 最高含量為495.35 μg/kg，接近限量標(biāo)準(zhǔn)；AFB1最高含量為15.29 μg/kg，超標(biāo)率為10.64%；生長及產(chǎn)蛋雞DON、ZEN 和AFB13 種毒素檢出率分別為77.04%、67.32%、39.30%，DON 和AFB1最高含量分別為2 770.00、19.64 μg/kg，都未超過國家標(biāo)準(zhǔn)；ZEN 最高含量為580.32 μg/kg，中值為123.53 μg/kg，超標(biāo)率為1.16%。

產(chǎn)蛋鵪鶉ZEN 檢出率為100%、DON 為75.00%、AFB1為16.67%，但三者的最高含量都在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。

2.7.3 奶牛精料補(bǔ)充料中霉菌毒素的檢測結(jié)果 如表10所示，奶牛精料補(bǔ)充料DON、ZEN 和AFB13 種毒素檢出率分別為87.50%、68.75%、31.25%。ZEN 最高含量為480.23 μg/kg，不超標(biāo)。DON 和AFB1最高含量分別為2 140.00、10.32 μg/kg，中值分別為585.00、5.23 μg/kg，超標(biāo)率分別為21.43%、20.00%。

2.7.4 豬配合飼料中霉菌毒素的檢測結(jié)果 如表10 所示，豬配合飼料污染較嚴(yán)重的是DON，育肥豬、生長豬、仔豬、青年母豬配合飼料檢出率分別為80.60%、75.00%、64.18%、62.38%，最高含量分別為1 270.00、990.00、1 100.00、1 280.00 μg/kg，超標(biāo)率分別為1.85%、0.00%、1.10%、0.79%；育肥豬配合飼料ZEN 的檢出率26.87%，最高含量207.34 μg/kg，不超標(biāo)。仔豬、生長豬、青年母豬配合飼料檢出率分別為33.75%、38.62%、31.68%，最高含量分別為241.87、313.85、227.28 μg/kg，超標(biāo)率分別為3.70%、2.11%、17.19%；仔豬配合飼料AFB1檢出率為38.75%，最高含量21.11 μg/kg，超標(biāo)率為3.23%。生長豬、青年母豬、育肥豬配合飼料AFB1檢出率分別為46.75%、36.63%、37.31%，生長豬配合飼料最高含量為20.00 μg/kg，等于限量標(biāo)準(zhǔn)，青年母豬、育肥豬配合飼料AFB1最高含量均低于限量標(biāo)準(zhǔn)。

表10 配合飼料中霉菌毒素檢測結(jié)果

3 討 論

本調(diào)查結(jié)果顯示，2018 年作為大宗原料的玉米DON、ZEN、AFB13 種毒素的污染程度高于2017 年[2]，玉米副產(chǎn)品DDGS 中AFB1檢出率和ZEN 超標(biāo)率都高于2018 年，玉米胚芽餅粕AFB1的污染程度及DON 的超標(biāo)率高于2017 年，米糠粕DON 的超標(biāo)率高于2017 年，花生餅粕ZEN 檢出率及AFB1的超標(biāo)率高于2017 年?？梢?018 年飼料原料的霉菌毒素污染不容忽視。2018年出現(xiàn)過歷史上罕見的氣候條件，6—8 月山東省平均氣溫27.0℃，較常年偏高1.7℃，創(chuàng)歷史記錄；7 月下旬至8 月中旬，臺風(fēng)“安比”、“摩羯”、“溫比亞”相繼穿過山東。8 月17—20 日，“溫比亞”造成罕見大范圍強(qiáng)降水，全省平均降水量達(dá)135.5 mm，單站最大降水量511.2 mm，平均年日照時(shí)數(shù)為2 291.8 h，較常（2 319.6 h）偏少70.2 h，是2006 年以來連續(xù)第13年偏少。以上高溫、高濕氣候條件有利于霉菌毒素產(chǎn)生，因而造成2018 年山東省玉米等大宗原料霉菌毒素污染程度高于2017 年。

配合飼料污染狀況重于2017 年[2]，突出表現(xiàn)在奶牛精料補(bǔ)充料DON 和AFB1都超國標(biāo)；雛雞配合飼料AFB1和生長及產(chǎn)蛋雞配合飼料ZEN 超標(biāo)率皆為2017年的2.5 倍，雛鴨配合飼料DON 不超標(biāo)，其他2 種毒素及生長和產(chǎn)蛋鴨3 種毒素都超標(biāo)；豬飼料污染狀況重于2017 年，仔豬飼料最不安全，3 種毒素均超出國標(biāo)范圍，生長豬ZEN、育肥豬DON 和青年母豬配合飼料ZEN 及DON 均有不同程度超標(biāo)；產(chǎn)蛋鵪鶉飼料較為安全，3 種毒素均不超標(biāo)。

4 結(jié) 論

本調(diào)查顯示，飼料原料的AFB1污染率為39.20%，超標(biāo)率為7.18%；ZEN 污染率為43.23%，超標(biāo)率為12.82%；DON 污染率為62.58%，超標(biāo)率為1.79%。玉米及副產(chǎn)物應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注3 種毒素的污染，小麥副產(chǎn)物及米糠重點(diǎn)關(guān)注DON 污染，餅粕類飼料重點(diǎn)關(guān)注花生餅粕的AFB1污染；配合飼料中AFB1污染率為45.88%，超標(biāo)率為2.74% ；ZEN 污染率為57.05%，超標(biāo)率為4.04%；DON 污染率為77.37%，超標(biāo)率為0.81%。配合飼料應(yīng)關(guān)注鴨飼料及豬飼料3 種毒素的污染，雛雞飼料關(guān)注AFB1污染，生長及產(chǎn)蛋雞飼料ZEN 的含量，奶牛精料補(bǔ)充料關(guān)注DON 和AFB1污染。