丁美月，楊愛梅，舒思傳，舒曉亮

（懷化市動物疫病預防控制中心，湖南懷化 418000）

非洲豬瘟（African swine fever，ASF）是由非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的豬傳染性疾病，是歐盟和世界動物衛(wèi)生組織認定的高度接觸性傳染病[1]。ASFV 大多數(shù)分離株會使家豬出現(xiàn)急性出血熱，并引發(fā)近100%的死亡率。研究發(fā)現(xiàn)，ASFV 對所有年齡段的豬具有相同的易感性[2]。2018 年8 月我國首次報道在遼寧省沈陽市發(fā)現(xiàn)ASF 疫情，截至2019 年6 月16 日，全國共報道發(fā)生ASF 疫情137 起[3-5]。2018 年11 月18日，湖南省懷化市鶴城區(qū)排查發(fā)現(xiàn)一養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的生豬出現(xiàn)不明原因死亡，經(jīng)懷化市動物疫病預防控制中心獸醫(yī)實驗室檢驗，初診為疑似ASF 疫情，11 月20 日被中國動物衛(wèi)生與流行病學中心確診為ASFV 核酸陽性。疫情發(fā)生后，全市立即啟動Ⅰ級響應，及時組織撲殺疫點內(nèi)所有生豬，并對所有病死豬、被撲殺豬及其產(chǎn)品進行無害化處理，對排泄物、餐廚剩余物、污染或可能被污染的飼料和墊料、污水等進行無害化處理，對被污染或可能被污染的物品、交通工具、用具、豬舍、場地環(huán)境等進行徹底清洗消毒。為掌握疫病的發(fā)生原因、調(diào)查疫病可能來源和擴散風險等，將本次疫情所掌握的溯源信息進行分析，并提出相關(guān)建議。

1 材料與方法

1.1 現(xiàn)場調(diào)查

現(xiàn)場查閱發(fā)病場生產(chǎn)記錄、調(diào)運記錄，同相關(guān)人員核實豬群的飼養(yǎng)管理以及豬群發(fā)病和死亡等信息；與當?shù)孬F醫(yī)主管部門、鄉(xiāng)鎮(zhèn)動物防疫人員、村級防疫員，以及周邊村民和養(yǎng)殖戶進行座談或訪談，了解疫區(qū)和受威脅區(qū)內(nèi)的生豬存欄量、主要流行病種等；搜索相關(guān)病例，了解生豬販運經(jīng)紀人、屠宰場等相關(guān)信息。

1.2 追溯

重點了解首發(fā)病例出現(xiàn)前20 d 的情況，從生豬及豬肉產(chǎn)品調(diào)運、飼料飼喂、是否飼喂泔水以及生物安全等方面進行溯源，并采樣進行實驗室檢測，分析ASF 傳播的可能途徑。

1.3 實驗室檢測

1.3.1 樣品采集 根據(jù)追溯調(diào)查情況，在疫點周邊豬場及疫點豬場仔豬的來源豬場等有流行病學關(guān)聯(lián)的養(yǎng)豬場，以及疫點豬場泔水來源相關(guān)餐飲機構(gòu)、泔水運輸車、相關(guān)飼料銷售點、屠宰場、本市某物流公司凍庫，共采集樣品448 份（表1）。

表1 樣品來源、名稱及數(shù)量

1.3.2 檢測試劑 核酸提取試劑盒（磁珠法）：購自杭州愛康生物技術(shù)有限公司（批號20180798）；DNA 病毒PCR 反應試劑盒：購自北京世紀元亨（批號YDNA20181016P）；正向引物VP72F2a、反 向 引 物VP72R2b、TaqMan 探 針VP72P2c：國家外來動物疫病研究中心提供。

1.3.3 檢測方法 核酸提取，嚴格按照試劑盒說明書進行操作；樣品處理和試驗過程，嚴格按照中國動物衛(wèi)生與流行病學中心編制的《非洲豬瘟實驗室檢測操作程序》和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部推薦的熒光PCR方法進行。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)病情況

2018 年11 月18 日，鶴城區(qū)鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站工作人員在疫情排查時發(fā)現(xiàn)，一養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的生豬發(fā)生不明原因死亡。鶴城區(qū)動物疫病預防控制中心在接到疑似疫情報告后趕赴現(xiàn)場進行核查。據(jù)調(diào)查，該場只有一棟欄舍，存欄生豬73 頭；11 月14 日2 頭仔豬開始發(fā)病，15 日發(fā)病4 頭，16 日發(fā)病1 頭、死亡6 頭，17 日發(fā)病54 頭、死亡33 頭，18 日死亡21 頭；經(jīng)流感藥物治療無效，至11 月18 日下午，共發(fā)病61 頭、死亡55 頭。流行病學曲線見圖1。

發(fā)病豬主要癥狀表現(xiàn)為，發(fā)熱（40.5~42 ℃），耳朵、臀部及后肢皮膚發(fā)紅、發(fā)紺，部分豬只糞便中帶血、嘔吐；剖檢可見，淋巴結(jié)、心臟、大小腸、肺等器官出血。鶴城區(qū)動物疫病預防控制中心取樣并送至懷化市動物疫病預防控制中心進行實驗室檢測，并診斷為疑似ASF 疫情。11 月20 日，經(jīng)中國動物衛(wèi)生與流行病學中心檢測，確診為ASFV 核酸陽性。疫區(qū)內(nèi)共有36 家存欄50 頭以上生豬養(yǎng)殖場，包括散養(yǎng)戶存欄的1 200 余頭生豬在內(nèi)，共計存欄生豬8 147 頭，經(jīng)排查未見異常。

圖1 疫病流行病學曲線

2.2 追溯情況

2.2.1 生豬及豬肉產(chǎn)品調(diào)運 2018 年8 月，該養(yǎng)殖戶從同鄉(xiāng)某養(yǎng)殖場戶購入25 頭仔豬，幾天后因互相撕咬，死亡2 頭（已作深埋處理）；10 月8日和11 日，又從同鄉(xiāng)另一養(yǎng)殖場戶購入50 頭仔豬，至11 月18 日疫情發(fā)生時，共存欄生豬73 頭。在疫情發(fā)生前30 d 內(nèi)，該養(yǎng)殖戶未引進或購入其他生豬和豬肉產(chǎn)品。

2.2.2 飼料 2018 年10 月前，該養(yǎng)殖戶使用商品飼料喂養(yǎng)。

2.2.3 泔水飼喂和來源 2018 年10 月中旬，該養(yǎng)殖戶開始使用收購的泔水喂養(yǎng)生豬，10 月28 日接到禁止使用泔水飼養(yǎng)生豬的通知后，改用玉米粉飼喂。據(jù)調(diào)查，該場收購的泔水來自本地城區(qū)8 家餐飲機構(gòu)。對這些餐飲機構(gòu)的豬肉產(chǎn)品來源進行追溯發(fā)現(xiàn)，其主要來源于懷化市2 家屠宰場和外省，通過連鎖超市、菜市場等銷售終端購入。

2.2.4 生物安全 養(yǎng)殖場戶防疫意識淡薄，養(yǎng)殖場防疫條件差，沒有清洗消毒設施；引種前無檢疫，外來人員可隨意進出。

2.3 實驗室檢測

2.3.1 不同種類樣品檢測 采集的448份樣品中，包括58 份豬血清、348 份泔水/環(huán)境拭子、39 份豬肉產(chǎn)品和3 份飼料樣品。經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，有3 份泔水/環(huán)境拭子和10 份冷凍豬肉產(chǎn)品為ASFV 核酸陽性，個體陽性檢出率分別為0.9%（3/348）和25.6%（10/39），而血清和飼料樣品全為陰性。

2.3.2 不同場點檢測 根據(jù)追溯調(diào)查情況，分別在養(yǎng)殖場、屠宰場、凍庫、泔水運輸車輛、餐飲機構(gòu)、銷售終端和飼料銷售點采集樣品進行檢測，結(jié)果在凍庫、餐飲機構(gòu)和銷售終端檢出ASFV 核酸陽性樣品，個體陽性檢出率分別為16.7%、1.8%、7.7%（表2）。

表2 不同樣品采集場點檢測結(jié)果

3 分析與討論

3.1 疫情發(fā)生原因

檢測結(jié)果顯示，在與疫點有流行病學關(guān)聯(lián)養(yǎng)殖場采集的血清、環(huán)境拭子均為ASFV 核酸陰性，現(xiàn)場調(diào)查也未發(fā)生異常，因而可以排除生豬購入引發(fā)疫情的可能。疫點豬場近期外來人員和車輛進入很少，本地又未發(fā)現(xiàn)其他染疫豬場，因而由外來人員或車輛導致疫情傳入的可能性小。疫點豬場購置的少量商品飼料經(jīng)實驗室檢測為陰性，且未發(fā)現(xiàn)飼喂同一批次商品飼料的其他豬場發(fā)生疫情，因而由飼料導致疫情傳入的可能性小。

流行病學調(diào)查顯示：疫點豬場10 月份的一段時間內(nèi)曾使用泔水飼喂，并以泔水為主要飼料；疫點豬場泔水來源中的一家餐飲機構(gòu)，其10 份泔水/環(huán)境拭子經(jīng)實驗室檢測，有3 份為ASFV 核酸陽性；該豬場停止飼喂泔水18 d 后，11 月14 日生豬開始發(fā)病，發(fā)病時間與ASFV自然感染的潛伏期（4~19 d）相符[6]。此外，這些餐飲機構(gòu)豬肉來源的銷售終端市場，在采集的豬肉產(chǎn)品中，均檢出了ASFV 核酸。綜上所述，泔水飼喂引發(fā)此次ASF 疫情的可能性最大。

3.2 陽性肉品溯源

檢出ASFV 核酸陽性的餐飲機構(gòu)，其豬肉產(chǎn)品來源于本地終端銷售市場，而該終端銷售市場的豬肉產(chǎn)品來源于本地屠宰場和某物流公司凍庫。該屠宰場屠宰的生豬來源于本地6 個豬場，其中1 個豬場在疫區(qū)內(nèi)，所有生豬已被撲殺并無害化處理，其他5 個豬場經(jīng)現(xiàn)場排查，未發(fā)現(xiàn)異常。屠宰場環(huán)境樣品經(jīng)實驗室檢測為ASFV 核酸陰性。對某物流公司凍庫豬肉產(chǎn)品采樣進行實驗室檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)省內(nèi)和省外分別有一批凍肉被檢測出ASFV 核酸陽性。

2018 年9 10 月期間，懷化市存在從外省調(diào)入生豬進行屠宰并用于本地消費的情況，11 月后，未從外省調(diào)入生豬用于屠宰銷售。10 11 月，懷化市從外省和本省部分地市調(diào)入過冷鮮或冷凍豬肉，也有早期購入的德國和西班牙等國冷凍豬肉。依據(jù)上述情況推斷，懷化市餐飲機構(gòu)泔水中污染的ASFV，可能來自省內(nèi)其他地市輸入的豬肉，也有可能來自外省輸入的豬肉。

3.3 防控措施

本次疫情追溯情況表明，生豬及豬肉產(chǎn)品調(diào)運、泔水飼喂是此次ASF 疫情發(fā)生的主要途徑。近年來，受多重因素影響，全國生豬產(chǎn)能呈現(xiàn)“南豬北養(yǎng)、北豬南運”的新格局，生豬長距離調(diào)運是疫病跨區(qū)傳播的主要原因[7-8]。ASF 疫情出現(xiàn)后，減少活豬調(diào)運是控制疫情的重要手段[8]。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部、省、市的一系列關(guān)于加強生豬及產(chǎn)品調(diào)運監(jiān)管等工作的文件，懷化市各縣（市、區(qū)）設立了臨時檢查站，嚴格生豬及其產(chǎn)品的移動監(jiān)管，對運輸?shù)母鱾€環(huán)節(jié)加強監(jiān)控。

流行病學調(diào)查顯示，該發(fā)病豬場曾飼喂過泔水。國外有調(diào)查表明，2012 2018 年全球暴發(fā)的219 起ASF 疫情中，有45.6%是由飼喂泔水引起的[9]。懷化市《關(guān)于加強非洲豬瘟疫情應急防控工作的緊急通知》明確指出，省內(nèi)發(fā)生ASF 疫情后，全市須立即禁止用泔水和餐廚剩余物飼喂生豬，相關(guān)部門也聯(lián)合出臺了《懷化市城區(qū)泔水應急處置方案》。因此，建議繼續(xù)強化落實禁止泔水飼喂政策，防止疫情再次發(fā)生。

中小散養(yǎng)模式占據(jù)國內(nèi)生豬供應的半數(shù)左右[10]。懷化市地處山區(qū)丘陵地帶，養(yǎng)殖模式多為散養(yǎng)，養(yǎng)殖戶生物安全意識不高。為逐步改變懷化市養(yǎng)殖模式，提高養(yǎng)殖業(yè)整體動物防疫水平，在切實保護中小規(guī)模養(yǎng)豬場（戶）利益的前提下，應采取政府推動、規(guī)模場協(xié)助等模式，加快推動“兩場”周邊中小規(guī)模養(yǎng)殖場（戶）逐步棄養(yǎng)、退養(yǎng)政策的實施，構(gòu)建周邊地區(qū)生物安全屏障；進一步強化飼養(yǎng)者、經(jīng)營者主體責任，加強生物安全管理，這對ASF 疫情防控具有重要意義。