薛風(fēng)蘭

【摘 要】目的是排除獻(xiàn)血者血型鑒定的影響因素，采取積極有效的應(yīng)對措施，在血型鑒定過程中，按照國家標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，切實(shí)保證血型鑒定的100%準(zhǔn)確度，并滿足臨床輸血的安全性和有效性。

【關(guān)鍵詞】血型鑒定;ABO血型正反定型不符;影響因素;準(zhǔn)確定型;處理方法

【中圖分類號】R446.6【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1672-3783（2019）07-03--01

血液從供血者到臨床用血的過程中，正反定型是其中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。ABO 血型正反定型不一致的原因可能是操作檢驗(yàn)有誤或獻(xiàn)血者自身紅細(xì)胞或血清標(biāo)本存在問題，準(zhǔn)確的血型鑒定有助于避免ABO血型正反定型不符的出現(xiàn)，提高血液采集的有效性，進(jìn)一步保障臨床輸血安全。通過探討血型正反定型不符形成的原因，采取更加積極有效的手段，排除血型鑒定的各種影響因素，從而保證輸血的安全有效。

1 ABO血型正反定型不符的幾種原因

1·1 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程不到位

表現(xiàn)為操作者工作責(zé)任心渙散，沒有按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作，未認(rèn)真核對，不細(xì)心觀察，工作粗心大意，標(biāo)本搞錯(cuò)等，試管中未添加標(biāo)準(zhǔn)血清或待檢血清，添加血清及紅細(xì)胞標(biāo)本過程中放置混亂，這類問題出現(xiàn)時(shí)常較嚴(yán)重。還有技術(shù)水平差，血型判斷錯(cuò)誤，紅細(xì)胞懸液太濃或太淡，紅細(xì)胞和血清比例不適當(dāng)，離心速度和離心時(shí)間與要求不符，血型試劑保存不當(dāng)、室溫放置時(shí)間過久，溶血被錯(cuò)誤定性為陰性，冷抗體被誤認(rèn)為真凝集等。還有弱凝集結(jié)果判定時(shí)肉眼觀察不細(xì)致，又不用顯微鏡觀察。這些情況的發(fā)生都會(huì)導(dǎo)致血型誤判。

1·2 紅細(xì)胞標(biāo)本自身問題

極少數(shù)獻(xiàn)血者血液中存在某些ABO亞型紅細(xì)胞（如A亞型、B亞型），紅細(xì)胞表面抗體太弱，在正定型時(shí)出現(xiàn)假陰性表現(xiàn)。

出現(xiàn)紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象或自身凝集問題。由于遺傳性或獲得性原因使紅細(xì)胞表面發(fā)生異常，出現(xiàn)多凝集現(xiàn)象;也有某些疾病導(dǎo)致自身凝集現(xiàn)象而出現(xiàn)假陽性表現(xiàn)。

獻(xiàn)血者以前接受過異型輸血，其體內(nèi)有其他血型的紅細(xì)胞存在。

受到紅細(xì)胞獲得性抗原的影響，進(jìn)行鑒定時(shí)血型有可能發(fā)生改變。

紅細(xì)胞懸浮液中含有高濃度的其它血型物質(zhì)，中和了抗A及抗B血清，出現(xiàn)假陰性表現(xiàn)，如某些獻(xiàn)血者因?yàn)樽陨碓蚩稍斐裳臀镔|(zhì)濃度太高，需要多次洗滌紅細(xì)胞后再進(jìn)行鑒定。

紅細(xì)胞懸浮液里含有某種不同成分的抗體，出現(xiàn)假陽性反應(yīng)，需要最少洗滌三次紅細(xì)胞后再進(jìn)行鑒定。

攝入藥物、抗凝劑等物質(zhì)對血型結(jié)果造成影響。比如短期內(nèi)輸入大量右旋糖酐等膠體溶液，能吸附紅細(xì)胞表面的抗原，引起紅細(xì)胞聚集，可以使原有的抗原性發(fā)生改變，從而引起血型的改變。

某些疾病也會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞表面抗原減弱，在進(jìn)行血型正定型鑒定時(shí)容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

極少數(shù)獻(xiàn)血者體內(nèi)含有兩類紅細(xì)胞群體，血型鑒定時(shí)出現(xiàn)混合外觀凝集。

接受放射性照射過量可能導(dǎo)致紅細(xì)胞表面抗原發(fā)生變異，造成血型改變。

1·3 血清標(biāo)本出現(xiàn)問題

操作者在用血漿或者血清做反定型時(shí)出現(xiàn)的呈凝膠狀的纖維蛋白凝塊被誤認(rèn)為是凝集。

某些疾病會(huì)導(dǎo)致血清中蛋白比例失調(diào)，或纖維蛋白含量過高容易出現(xiàn)假凝集。

獻(xiàn)血者接受過異型輸血容易刺激機(jī)體產(chǎn)生不規(guī)則抗體。

血清中含有其他不同的凝集紅細(xì)胞的抗體，此類抗體會(huì)凝集紅細(xì)胞發(fā)生假凝集。

獻(xiàn)血者血清中的冷抗體造成的自凝現(xiàn)象，容易造成假凝現(xiàn)象，血型鑒定時(shí)用其紅細(xì)胞和生理鹽水在37℃水浴五至十分鐘做陰性對照。

輸入了異型血漿，導(dǎo)致血清中出現(xiàn)了意外抗體。

2 ABO血型正反不符的應(yīng)對措施

2·1 最有效的處理方法

（1）按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程重新鑒定血型，增強(qiáng)操作人員的責(zé)任心和技術(shù)水平，避免發(fā)生誤判情況，工作中切勿出現(xiàn)血型試劑加漏或者標(biāo)本加錯(cuò)，并通過業(yè)務(wù)技術(shù)的積累提高操作的準(zhǔn)確性和判斷力。

（2）排除標(biāo)本錯(cuò)誤或標(biāo)準(zhǔn)血清被污染引起的非特異性凝集，應(yīng)該及時(shí)更換失效的標(biāo)準(zhǔn)血清和標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞。

（3）為防止漏查冷凝集反應(yīng)，還要通過顯微鏡觀察配合肉眼觀察，確保結(jié)果判斷的準(zhǔn)確性和可靠性?？赏ㄟ^做正定鑒定時(shí)用自身紅細(xì)胞加生理鹽水作對照，做反定鑒定時(shí)用自身血清加O型紅細(xì)胞作對照。如果發(fā)現(xiàn)對照管出現(xiàn)凝集，說明血清中還有冷凝集素存在。

（4）對于篩選出的存疑標(biāo)本，應(yīng)該排除不規(guī)則抗原的存在，方法是用生理鹽水將標(biāo)本紅細(xì)胞洗滌3次，去除吸附在紅細(xì)胞表面的抗原后再重新鑒定血型。

（5）排除弱抗原抗體反應(yīng)，方法是抗原抗體反應(yīng)后應(yīng)在室溫20～24℃環(huán)境中放置半小時(shí)后，離心觀察排除冷凝集素的干擾。

（6）弱凝集現(xiàn)象遇到外力作用會(huì)使凝塊消失，所以試管從離心機(jī)取出后應(yīng)當(dāng)輕輕邊搖邊仔細(xì)觀察，并配合顯微鏡觀察。

（7）實(shí)在無法判定血型的標(biāo)本，運(yùn)用聚凝胺法、抗人球法等方法也可以作為鑒定血型的有效手段。

2·2 弱抗原所致血型正反定型不符的應(yīng)對措施

極少數(shù)獻(xiàn)血者由于自身體質(zhì)原因或疾病導(dǎo)致抗原減弱出現(xiàn)正反定型不符，可通過試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)?？乖贵w反應(yīng)時(shí)在室溫20-24℃環(huán)境中放置半小時(shí)，能夠增強(qiáng)抗A、抗B和抗A1B與紅細(xì)胞抗原的結(jié)合;在4℃放置半小時(shí)更能增強(qiáng)抗原抗體的結(jié)合，參照O型和自身紅細(xì)胞對照試驗(yàn)，排除冷凝集反應(yīng)。

2·3 非特異性凝集所致正反定型不符的處理方法

非特異性凝集主要是冷凝集素在體內(nèi)作用導(dǎo)致。冷凝集素是冷反應(yīng)型抗紅細(xì)胞抗體，在0-4℃時(shí)最易和紅細(xì)胞膜抗原結(jié)合，是免疫球蛋白IGM抗體引起的自身免疫性凝集。健康人體內(nèi)冷凝集素效價(jià)一般小于1：16，只在20℃以下反應(yīng)，4℃反應(yīng)最強(qiáng)，因此嚴(yán)重干擾了血型的鑒定，只有在37℃孵育10分鐘，凝塊減弱直至消失，這就表明該標(biāo)本有冷凝集素。

2016年1月，我站采血車去同煤集團(tuán)采血，當(dāng)時(shí)外界氣溫零下十幾度，采血車內(nèi)溫度也不太高，其中一位獻(xiàn)血著在獻(xiàn)血初篩時(shí)紙片法血型定為B型，后來站內(nèi)檢驗(yàn)科用試管法復(fù)查血型時(shí)，發(fā)現(xiàn)該獻(xiàn)血者血型其實(shí)為O型，抗B血清與該獻(xiàn)血者紅細(xì)胞血液有輕微凝集，然后放置在37℃水浴箱孵育十分鐘后發(fā)現(xiàn)凝集散開，證明該獻(xiàn)血者血液中有冷凝集素存在。

綜上所述，在AB0血型鑒定試驗(yàn)中，出現(xiàn)正反定型不符，不能立即判定血型結(jié)果，而是通過積累的豐富檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，建立和完善標(biāo)準(zhǔn)的操作流程，科學(xué)地分析ABO血型正反定型不符產(chǎn)生的真實(shí)原因，確保及時(shí)排除干擾，發(fā)現(xiàn)差錯(cuò)，并對異常結(jié)果進(jìn)行系統(tǒng)全面地分析，確保ABO血型準(zhǔn)確無誤。如果發(fā)現(xiàn)正反定型不符的血液，不能用于臨床輸注，以保障臨床用血安全。

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