閆曉藝 陳 濤 劉永宏

延安市公安局刑事警察支隊，陜西 延安 716000

在兇殺、盜竊、強奸等各類刑事案件和交通肇事案件現(xiàn)場，經(jīng)常會有微量的動植物油脂物證遺留在案件現(xiàn)場或作案工具上，因此就需要對遺留在案件現(xiàn)場、作案工具上的油脂殘漬、斑跡物證進(jìn)行檢驗，以確定油脂的種類。微量動植物油脂物證的種屬認(rèn)定能為縮小案件范圍、判斷案件性質(zhì)、還原原始現(xiàn)場提供科學(xué)的依據(jù)。近年來對于油脂的研究，主要集中在油脂的安全檢驗方面，比如油脂的保存、品質(zhì)的檢驗、摻偽的鑒別等。

一、動植物油脂概述

動植物油脂的主要成分為三脂肪酸甘油酯(triacylglycerol)，簡稱甘三酯(TAG)，其分子結(jié)構(gòu)如圖1所示。此外還含有極少量而組成又非常復(fù)雜的非甘油三酯成分，包括甘油二脂肪酸酯、甘油一脂肪酸酯、脂肪酸、磷脂、色素、甾醇、三萜醇、脂溶性色素等。

在自然界中，甘三酯的鏈長差異比較大，但要數(shù)16個、18個和20個碳原子的鏈最為常見。比如在天然脂肪酸中，常見的只有月桂酸(C12：0)、豆蔻酸(C14：0)、棕櫚酸(C16：0)、硬脂酸(C18：0)、花生酸(C20：0)、山崳酸(C22：0)。在飽和脂肪酸中主要分布著軟脂酸(C16：0)和硬脂酸(C18：0)，它們在所有動植物油脂中大量存在。其中軟脂酸是豬油脂、牛油脂(25%-30%)、棕櫚油(30%-50%)的主要成分；相較于軟脂酸，硬脂酸主要存在于動物油脂中，如豬油脂、牛油脂(12%-20%)，羊油脂(約35%)。

不飽和脂肪中的油酸(9c-18：1)幾乎在所有動植物油脂中都存在，它是大多數(shù)植物油脂的主要脂肪酸。如在茶油、橄欖油中含量高達(dá)80%以上，芝麻油、花生油、葵花籽油也含有相當(dāng)數(shù)量的油酸；動物油脂中的豬油脂、羊油脂、牛油脂中含量也高達(dá)40%。還有一種常見的不飽和脂肪酸——亞油酸(9c，12c-18：2)，它在液體植物油中廣泛存在著，一般植物油的含量為40%，在葵花籽油、玉米油、大豆油、芝麻油中含量則約為40%-50%。而在動物油脂和含有油酸較多的植物油脂中(橄欖油、棕櫚油、茶油等)亞油酸含量卻僅為10%。另外是一些叫多烯酸的脂肪酸，如花生四烯酸(20：4(n-6))主要存在于海洋魚油中，陸地動物油脂中雖然廣泛存在，但是含量卻普遍低于1%；陸地植物油脂中也很少，僅微量存在于苔蘚及蕨類種子油中[1]。對刑事案件現(xiàn)場發(fā)現(xiàn)的油脂進(jìn)行成分分析，含量分析可以確定油脂種類縮小案件偵查范圍。

二、動植物油脂檢驗方法概述

(一)液相色譜法

高效液相色譜(HPLC)更適合分析難揮發(fā)、極性強的物質(zhì)。由于使用氣相色譜分析油脂常存在靈敏度不佳，衍生化重現(xiàn)性不理想，最終導(dǎo)致其方法的穩(wěn)定性不好。趙海珍[2]建立了一種采用高效液相色譜法分析豬油甘油三酯中的脂肪酸組成及其位置分布的方法，其利用2-溴苯乙酮僅同游離脂肪酸作用的特點，將脂肪酸酯化為苯乙酰甲酯，然后進(jìn)行HPLC分析。丁怡[3]使用2，4-二溴苯乙酮衍生化試劑進(jìn)行柱前衍生，C18反相柱等度洗脫分析，可以做到使油酸、亞油酸、軟脂酸、硬脂酸4種脂肪酸和十七烷酸(內(nèi)標(biāo))達(dá)到基線分離，分析時間短，重現(xiàn)性好。實踐中，研究人員發(fā)現(xiàn)衍生化方法雖然有效，但是需要進(jìn)行反應(yīng)，比較耗時。于是出現(xiàn)了液相色譜電化學(xué)檢測方法。由于應(yīng)用這種方法所需要的油脂樣品很少，所以甚至可以用來測定人體皮膚表面脂質(zhì)中游離的脂肪酸。張東[4]等采用高效液相色譜-串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜法分析了常見植物油如大豆油、芝麻油、花生油、特級初榨橄欖油、葵花籽油、玉米油、油茶籽油、棉籽油和菜籽油的甘油三酯。結(jié)果顯示每種植物油甘油三酯的種類和含量均不相同。該方法測定甘油三酯有效可行，可為甘油三酯結(jié)構(gòu)信息研究及油脂摻偽鑒別提供基礎(chǔ)支持。

(二)氣相色譜法分析油脂成分

三脂肪酸甘油酯是不適合用GC直接分析，先采用甲基化試劑對脂肪酸進(jìn)行衍生化，使之成為相應(yīng)的脂肪酸甲酯，進(jìn)而易于進(jìn)行氣相色譜分析，韓菊[5]通過優(yōu)化色譜分析條件，采用氫氧化鉀-甲醇法進(jìn)行甲酯化，用SE-30毛細(xì)管柱進(jìn)行氣相色譜分析，確定了大豆油、棉籽油、花生油、小米乳芽油、豬油中脂肪酸的組成及含量。對于動物油，徐競[6]采用極性毛細(xì)管柱氣相色譜法，測定了兔肉脂肪酸組成的相對百分含量和實際含量，得到了油酸、豆蔻酸、棕櫚油酸、棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸、亞麻酸和花生酸的相對含量，且具有較好的精密度、重復(fù)性和可靠性。由此說明采用氫氧化鉀-甲醇法進(jìn)行的甲基化法對動物、植物油脂中脂肪酸的測定均是有效的。

(三)色-質(zhì)聯(lián)用法

利用色譜技術(shù)可實現(xiàn)對甘三酯的高效分離，而質(zhì)譜檢測器(MS)具有更高的靈敏度，如果結(jié)合兩者的優(yōu)點，將它們應(yīng)用于甘油三酯的分析鑒定必將是一個非常好的選擇。氣相色譜儀與質(zhì)譜檢測器聯(lián)用已經(jīng)應(yīng)用到油脂的檢測中，回瑞華[8]采用索氏提取法提取不同產(chǎn)地稻米中的脂肪油，后進(jìn)行甲酯化處理，利用GC-MS法對其脂肪酸的成分和相對百分含量進(jìn)行分析測定，取得了很好的效果。趙先恩等[9]通過對比分別采用柱前衍生化高效液相色譜熒光檢測法與氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測定藏藥波棱瓜籽油脂中脂肪酸的成分的不同，結(jié)果顯示用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法分析的靈敏度明顯低于柱前衍生高效液相色譜熒光檢測法，對于含量較低的低碳脂肪酸和高碳脂肪酸氣相色譜質(zhì)譜法無法檢測，只能檢測含量非常高的C18：3等。

(四)光譜分析方法及其他

紅外光譜(IR)，是根據(jù)光譜中吸收峰的位置與形狀來推斷未知物結(jié)構(gòu)，依照特征吸收峰的強度來測定混合物中各組分的含量，方便快捷、靈敏度高、試樣用量少、能分析各種形態(tài)的試樣，于燕波等人應(yīng)用NIRS技術(shù)建立了快速測定植物油中4種脂肪酸含量的方法，東野廣智等人以FTIR和FT-Raman實現(xiàn)了亞麻油組分定性分析。Raman信號較弱，適合用在水溶液體系；NIRS和MIRS信號較強，但水溶液對NIRS和MIRS干擾較為嚴(yán)重。所以三種方法各有優(yōu)劣，應(yīng)該有機結(jié)合，互為補充。

三、展望

隨著刑事科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，通過對兇殺、焚尸案件現(xiàn)場中提取的各類油脂檢驗，分析油脂成分含量，油脂成分種類將對刑事案件的偵破提供更加有力的證據(jù)。但同時也對油脂的檢驗技術(shù)提出了更高的要求，單指標(biāo)檢驗技術(shù)已經(jīng)不能滿足于油脂物證的分析要求。目前微量油脂物證的分析向多元化發(fā)展，新的研究中已經(jīng)利用油脂中的磷脂、色素、甾醇、三萜醇、脂溶性色素等來進(jìn)行刑事技術(shù)的鑒別分析。