潘 虎, 蒲繼鋒,代艷娜, 張一帆, 白軍平, 楊曉鳳, 田 云

(1.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測研究所，西藏 拉薩 850032；2. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南 長沙 410128；3. 四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測試中心，四川 成都 610066)

白酒在發(fā)酵過程中會產(chǎn)生微量甲醇等有害物質(zhì)，甲醇毒性極強(qiáng)，具有明顯的麻醉作用[1]。甲醇在人體內(nèi)可被氧化為甲醛、甲酸等高毒物質(zhì)，特別是可對視神經(jīng)造成較大損傷，誤飲過量的甲醇會引起失明和中毒死亡[2]。攝取5 g甲醇就會使人體嚴(yán)重中毒，飲用量超過12.5 g就可導(dǎo)致人體死亡[3]，市場上各種劣質(zhì)白酒中含有大量的甲醇，由飲酒而造成的人員甲醇中毒事件屢見不鮮[4-5]，故建立快速、有效的酒精中微量甲醇的測定方法十分必要。本文建立了GC-FID法快速測定白酒中甲醇?xì)埩袅康耐鈽?biāo)分析方法，以期為白酒中甲醇?xì)埩袅康臏y定及白酒品質(zhì)的判定提供可靠的研究方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

氣相色譜儀：安捷倫7890B；色譜柱：DB-WAX毛細(xì)管色譜柱(60 m×0.25 mm×0.25 μm)；甲醇標(biāo)準(zhǔn)品購置于上海安譜實驗科技股份有限公司，規(guī)格：10 000 mg/L；乙醇為成都市科龍化工試劑廠提供色譜純(純度≥99.8 %)；去離子水由本實驗室制備。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

乙醇溶液(40 %，體積分?jǐn)?shù))：量取40 mL乙醇，用去離子水定容至100 mL，混勻備用。甲醇標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(5000 mg/L)：量取12.5 mL甲醇標(biāo)準(zhǔn)品用乙醇溶液定容至25 mL，-20 ℃儲藏備用。甲醇系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別吸取0.5、1.0、2.0、4.0、5.0 mL甲醇標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液用乙醇溶液定容至25 mL，依次配置成甲醇含量為100, 200, 400, 800, 1000 mg/L的甲醇系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。

表1 甲醇的回收率和相對偏差(n=3)

1.3 白酒樣品預(yù)處理[6]

分別吸取試樣10.0 mL待測樣品或甲醇系列標(biāo)準(zhǔn)工作液于試管中，搖勻裝入進(jìn)樣小瓶上機(jī)檢測。以甲醇色譜峰面積為縱坐標(biāo)，以甲醇系列標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4 氣相色譜條件

色譜柱為DB-WAX毛細(xì)管色譜柱(60 m×0.25 mm×0.25 μm)；載氣為氮氣(純度為99.999 %)，流速為1.0 mL/min；氫氣(純度為99.999 %)流速為30 mL/min；空氣流速為300 mL/min；分流模式(分流比為20∶1)；進(jìn)樣量1 μl；進(jìn)樣口溫度為250 ℃；升溫程序如下：初始柱溫為40 ℃、保持1 min，以4.0 ℃/min的速率升至130 ℃，再以20 ℃/min的速率升至200 ℃、保持5 min；檢測器溫度為250 ℃；檢測器為氫火焰離子化檢測器(FID)。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

在選擇的GC-FID條件下，甲醇和乙醇分離效果良好，未出現(xiàn)雜質(zhì)干擾峰，表明本檢測方法的氣相色譜條件合理可行，甲醇的保留時間為8.116 min，乙醇的保留時間為9.305 min(圖1)。

2.2 方法的線性范圍、相關(guān)系數(shù)及檢出限

分別配制質(zhì)量濃度為100、200、400、800、1000 mg/L的甲醇標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行FID測定，以甲醇的質(zhì)量濃度C(mg/L)為橫坐標(biāo)(X軸)，峰面積A為縱坐標(biāo)(Y軸)得到線性方程(圖2)。由圖2可以看出，標(biāo)準(zhǔn)曲線在100～1000 mg/L范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性方程為Y=0.2931X-3.0734，相關(guān)系數(shù)r值為0.9998，滿足儀器分析相關(guān)系數(shù)要求，按照3倍信噪比計算本方法的檢測限為7.5 mg/kg。

圖1 甲醇標(biāo)準(zhǔn)色譜圖(800 mg/L)Fig.1 Standard chromatography of methanol at 800 mg/L

圖2 甲醇的線性方程Fig.2 The linear equations of methanol

2.3 方法的精密度和準(zhǔn)確度

在白酒樣品中添加200、400和800 mg/L的甲醇標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行回收率試驗(n=3)，得到平均加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。結(jié)果表明甲醇的回收率分別為100.9 %、104.3 %和100.3 %，RSD值分別為1.3 %、2.6 %和1.6 %(表1)，本方法適用于白酒中甲醇的殘留分析要求。

3 結(jié) 論

本文利用GC-FID法測定白酒樣品中甲醇含量，采用外標(biāo)法對甲醇含量進(jìn)行精確定量[7]，該方法的相關(guān)系數(shù)、精密度和準(zhǔn)確度均符合甲醇?xì)埩舴治鲆螅^GB5009.266-2016采用的叔戊醇內(nèi)標(biāo)法更簡便、快速，本方法可用于白酒樣品中甲醇?xì)埩舻目焖俜治鰴z測。