曹紅

【摘要】 目的 分析酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)對(duì)結(jié)核性腦膜炎的診斷價(jià)值。方法 118例疑似結(jié)核性腦膜炎患者， 根據(jù)實(shí)際治療和回訪結(jié)果將患者分為實(shí)驗(yàn)組（結(jié)核性腦膜炎患者， 62例）和對(duì)照組（非結(jié)核性腦膜炎患者， 56例）。兩組患者均進(jìn)行酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)， 比較兩組患者腦脊液、外周血的診斷陽(yáng)性率。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組患者中腦脊液指標(biāo)呈陽(yáng)性60例（96.8%）， 對(duì)照組患者中腦脊液指標(biāo)呈陽(yáng)性2例（3.6%）。實(shí)驗(yàn)組患者腦脊液診斷陽(yáng)性率高于對(duì)照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=102.504， P=0.000<0.05）。實(shí)驗(yàn)組患者中外周血指標(biāo)呈陽(yáng)性56例（90.3%）， 對(duì)照組患者中外周血指標(biāo)呈陽(yáng)性0例（0）。實(shí)驗(yàn)組患者外周血診斷陽(yáng)性率高于對(duì)照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=96.266， P=0.000<0.05）。結(jié)論 采用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)診斷結(jié)核性腦膜炎效果良好， 提高了患者腦脊液和外周血的診斷陽(yáng)性率， 值得在臨床診斷中應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù);診斷陽(yáng)性率;結(jié)核性腦膜炎

醫(yī)學(xué)上定義的結(jié)核性腦膜炎屬于炎癥性疾病， 形式上為非化膿， 主要是由結(jié)核桿菌引起的， 發(fā)病率與死亡率高。據(jù)研究發(fā)現(xiàn)， 結(jié)核桿菌會(huì)發(fā)生基因突變的情況導(dǎo)致病癥加重， 加之抗結(jié)核藥物療效有限， 該疾病患者的發(fā)病率和死亡率逐年上升[1]。所以結(jié)核性腦膜炎的早期診斷尤為重要， 及早發(fā)現(xiàn)及早治療， 預(yù)后效果更好。一些結(jié)核性腦膜炎患者早期難以發(fā)現(xiàn)典型癥狀， 導(dǎo)致診斷錯(cuò)誤， 錯(cuò)失治療良機(jī)， 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)是通過探測(cè)結(jié)核性感染患者的特異性T細(xì)胞進(jìn)行診斷的， 據(jù)以往研究證明其可靠科學(xué)、安全性高。本文主要是研究酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)對(duì)結(jié)核性腦膜炎的診斷應(yīng)用， 旨在提高結(jié)核性腦膜炎的診斷陽(yáng)性率， 及早診斷患者病情， 使得患者能夠在最佳時(shí)期內(nèi)治療， 從而避免患者病情加重甚至死亡?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2017年1月～2018年1月本院收治的118例疑似結(jié)核性腦膜炎患者作為研究對(duì)象， 納入標(biāo)準(zhǔn)：有頭疼發(fā)熱、腦膜刺激征等臨床現(xiàn)象， 通過影像分析高度疑似結(jié)核性腦膜炎的初治患者， 所有患者均為初治病例， 均自愿參加本次研究;排除標(biāo)準(zhǔn)：排除妊娠、嚴(yán)重臟器疾病、人類免疫缺陷病毒（HIV）合并感染的患者。根據(jù)最終治療和回訪結(jié)果分為研究組（62例）和對(duì)照組（56例）。研究組患者中， 男33例， 女29例;平均年齡（45.3±7.8）歲。對(duì)照組患者中， 男30例， 女26例;平均年齡（44.1±8.9）歲。兩組患者性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)了此次研究。

1. 2 方法 兩組患者均采用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。具體如下：①采集制作細(xì)胞工作液。首先采集患者的腦脊髓6 ml和外周血8 ml， 將液體注入試管里， 注意在試管里添加肝素抗凝劑， 使用專用的檢測(cè)試劑盒， 保障操作在二級(jí)生物安全柜里進(jìn)行， 再加入定量的細(xì)胞培養(yǎng)液， 使離心混合， 約10 min， 把中層的白細(xì)胞移至規(guī)格為15 ml的離心管里。調(diào)整細(xì)胞密度時(shí)加入無血清培養(yǎng)液， 達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)時(shí)開始檢測(cè);②進(jìn)行酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)。檢測(cè)的每個(gè)標(biāo)本都只用2個(gè)檢測(cè)孔， 均注射入靶向抗原， 把細(xì)胞培養(yǎng)液（無抗原）注射到陰性對(duì)照孔里， 把植物血凝素注射到陽(yáng)性對(duì)照孔里， 均加入制作好的細(xì)胞工作液， 嚴(yán)格操作， 最后統(tǒng)計(jì)斑點(diǎn)數(shù)， 得出結(jié)果。所有反應(yīng)孔里斑點(diǎn)數(shù)目去掉陰性孔里斑點(diǎn)數(shù)目為結(jié)果， 最終斑點(diǎn)數(shù)≥40個(gè)為陽(yáng)性。

1. 3 觀察指標(biāo) 比較兩組患者的酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)結(jié)果， 包括腦脊液、外周血的診斷陽(yáng)性率。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組患者腦脊液診斷陽(yáng)性率比較 實(shí)驗(yàn)組患者中腦脊液指標(biāo)呈陽(yáng)性60例（96.8%）， 對(duì)照組患者中腦脊液指標(biāo)呈陽(yáng)性2例（3.6%）。實(shí)驗(yàn)組患者腦脊液診斷陽(yáng)性率高于對(duì)照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=102.504， P=0.000<0.05）。

2. 2 兩組患者外周血診斷陽(yáng)性率比較 實(shí)驗(yàn)組患者中外周血指標(biāo)呈陽(yáng)性56例（90.3%）， 對(duì)照組患者中外周血指標(biāo)呈陽(yáng)性0例（0）。實(shí)驗(yàn)組患者外周血診斷陽(yáng)性率高于對(duì)照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=96.266， P=0.000<0.05）。

3 討論

我國(guó)是一個(gè)結(jié)核菌感染率較高的國(guó)家， 結(jié)核性腦膜炎作為一種傳染性疾病， 發(fā)病率高， 死亡率高， 常見于青壯年， 在臨床上會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、頭疼、腦積水等癥狀， 受結(jié)核桿菌的感染會(huì)影響到神經(jīng)系統(tǒng)， 對(duì)患者的危害不容小視。需要說明的是近年來濫用抗生素得現(xiàn)象越來越重要， 而濫用抗生素會(huì)導(dǎo)致結(jié)核桿菌基因突變， 成為一種對(duì)人體危害更大、更難治療的傳染病。目前醫(yī)學(xué)界也沒有完全掌握治療該疾病的辦法， 加之患者的早期診斷比較困難， 所以導(dǎo)致了結(jié)核性腦膜炎的發(fā)病率和死亡率逐年升高。

傳統(tǒng)診斷結(jié)核性腦膜炎的方法是涂片鏡和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）法， 涂鏡片檢測(cè)結(jié)合性腦膜炎的方式不僅診斷陽(yáng)性率低， 而且培養(yǎng)周期過長(zhǎng)， 總的來說這種方式不利于及早診斷患者， 容易延誤了患者的病情， 讓患者錯(cuò)過治療的黃金時(shí)期， 進(jìn)而使患者加重病情， 甚至面臨死亡的危險(xiǎn)。PCR法檢測(cè)結(jié)核性腦膜炎的方式雖然診斷陽(yáng)性率較高， 但是由于輔助手段缺乏特異性， 容易加大臨床治療的困難性， 更有可能造成患者顱腦不可逆的創(chuàng)傷， 對(duì)患者的危害過大。所以這兩種檢測(cè)方法應(yīng)該隨著醫(yī)療水平的提高被淘汰或者優(yōu)化。

酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)是一種新型的檢測(cè)技術(shù)， 其既能診斷活動(dòng)性的結(jié)核感染， 也能診斷非活動(dòng)性的結(jié)核感染， 其可以從單細(xì)胞水平來檢測(cè)分泌抗體和細(xì)胞因子的細(xì)胞， 此外， 其還能夠準(zhǔn)確檢測(cè)到免疫細(xì)胞被結(jié)核桿菌致敏的情況， 檢測(cè)指標(biāo)為腦脊液和外周血的陽(yáng)性率， 統(tǒng)計(jì)斑點(diǎn)數(shù)確定結(jié)果， 從而診斷出患者是否屬于結(jié)核性腦膜炎患者[2]。相比較傳統(tǒng)的涂片鏡和PCR法等檢測(cè)方法而言， 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)能夠提高腦脊液、外周血的診斷陽(yáng)性率， 精確度更高， 方便簡(jiǎn)單， 培養(yǎng)周期短， 安全性高[3]。需注意的是在檢測(cè)過程中對(duì)工作人員的技術(shù)要求較高， 醫(yī)護(hù)人員應(yīng)該嚴(yán)格十分熟練流程操作， 按照酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)的程序進(jìn)行操作， 整個(gè)檢測(cè)過程醫(yī)護(hù)人員要佩戴專業(yè)服裝， 手部消毒， 戴上無菌手套， 實(shí)現(xiàn)無菌操作[4-6]。此外， 在采集腦脊液和外周血的過程中注意嚴(yán)格按照醫(yī)院的采血規(guī)定， 最后準(zhǔn)確地計(jì)算結(jié)果， 有利于提高檢測(cè)的精確度， 及早發(fā)現(xiàn)患者病情， 及早進(jìn)行治療[7， 8]。

綜上所述， 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)對(duì)結(jié)核性腦膜炎的診斷應(yīng)用價(jià)值大， 診斷陽(yáng)性率高， 且安全性高， 科學(xué)性強(qiáng)， 能夠讓結(jié)核性腦膜炎患者在早期就及時(shí)發(fā)現(xiàn)病情， 并且及時(shí)干預(yù)治療， 降低了結(jié)核性腦膜炎的死亡率， 在臨床診斷上值得推廣應(yīng)用。

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[收稿日期：2018-11-07]