喬利敏 （北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院 北京 102442）

葡萄籽提取物(GSE)是從釀酒葡萄籽中提取的一種多酚物質(zhì)混合物，主要活性成分是具有生物類黃酮結(jié)構(gòu)的葡萄籽原花青素(GSP)[1，2]，具有超強(qiáng)的抗氧化能力。已有研究表明，GSP具有抗氧化、降血脂、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等多種功能，是一種極強(qiáng)的體內(nèi)活性功能因子，作為飼料添加劑大量應(yīng)用于畜牧業(yè)生產(chǎn)[3]。目前GSP的研究多見于抗氧化[4，5]、抗炎癥[6]及免疫[7]等方面，在種雞的應(yīng)用研究，尤其是對產(chǎn)蛋高峰后期種雞生殖機(jī)理以及GSP與種雞生產(chǎn)性能和生殖激素水平分泌的相關(guān)性等方面的研究較少。因此，本試驗(yàn)以葡萄籽提取物作為飼料添加劑，以羅曼粉父母代種雞為試驗(yàn)動物，研究葡萄籽提取物對種雞產(chǎn)蛋高峰后期生產(chǎn)性能、繁殖性能及生殖激素水平的影響，以期為葡萄籽提取物在養(yǎng)禽業(yè)中的應(yīng)用提供依據(jù)和指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物及試驗(yàn)材料 試驗(yàn)動物為48周齡、體重相近的健康羅曼粉父母代種雞。葡萄籽提取物、試劑盒由北京生科宇晟科技有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)和時(shí)間 試驗(yàn)在北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院農(nóng)業(yè)發(fā)展中心—父母代種禽繁育中心養(yǎng)殖實(shí)訓(xùn)基地進(jìn)行；試驗(yàn)時(shí)間自2018年3月19日至2018年5月4日。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選用1080只48周齡常規(guī)免疫處理的健康羅曼粉父母代種雞隨機(jī)分為4個(gè)組，每組分5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)54只。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)I、II、III組分別在基礎(chǔ)日糧中添加葡萄籽提取物0.01%、0.02%、0.03%，預(yù)試期1周，使對照組與試驗(yàn)組在預(yù)試期間產(chǎn)蛋率差異不顯著(P＞0.05)，試驗(yàn)期為40d?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ)) (%)

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)種雞采用3層階梯式籠養(yǎng)，每籠3只雞。飼料為全價(jià)配合干粉料，人工喂料，每天投料2次；供試種雞自由采食和飲水；每天光照16h；每周人工授精5d，人工收集、篩選合格種蛋；按常規(guī)程序進(jìn)行雞只免疫和欄舍消毒。

1.5 測定指標(biāo)及方法 （1）生產(chǎn)性能：觀察每組雞的健康狀況。正試期以重復(fù)為單位，記錄每天飼喂量、種蛋數(shù)、商品蛋數(shù)(不合格種蛋數(shù))和蛋重，每10d結(jié)算統(tǒng)計(jì)飼料消耗量。分別計(jì)算日均采食量、蛋均重、日均產(chǎn)蛋量、產(chǎn)蛋率、料蛋比及種蛋合格率。（2）繁殖性能：分別于試驗(yàn)第2、3、4、5、6周每個(gè)重復(fù)選取168枚種蛋入孵，記錄每個(gè)重復(fù)入孵種蛋的受精蛋數(shù)、出雛數(shù)，計(jì)算種蛋受精率、受精蛋孵化率。（3）生殖激素：分別在試驗(yàn)第20、40天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取1只雞，翅下靜脈采血3ml，靜置后3000r/min離心10min，分離后血清放置在-20℃冰箱備用。用HD-F3000全自動血液生化分析儀(濟(jì)南華天恒達(dá)科技有限公司)測定血清中雌二醇(E2)、睪酮(T)和孕酮(P)含量。

1.6 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)通過Excel2007整理后，以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，單因素方差分析(one-way ANOVA)檢驗(yàn)組間差異顯著性，再進(jìn)行LSD多重比較。

表2 葡萄籽提取物對種雞生產(chǎn)性能、繁殖性能的影響 (g、%)

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄籽提取物對種雞產(chǎn)蛋高峰后期生產(chǎn)性能的影響 葡萄籽提取物對種雞產(chǎn)蛋高峰后期生產(chǎn)性能影響的數(shù)據(jù)詳見表2，經(jīng)分析可知：與對照組相比，試驗(yàn)III組的日均采食量降低了0.31%(P＞0.05)，試驗(yàn)I、II組分別提高了1.62%、2.3%(P＜0.01)；試驗(yàn)I、II、III組日均產(chǎn)蛋量與對照組相比分別升高6.35%(P＜0.05)、7.65%(P＜0.01)、3.19%(P＞0.05)；試驗(yàn)II組蛋均重較對照組提高了2.20%(P＜0.01)；3個(gè)試驗(yàn)組的料蛋比極顯著低于對照組(P＜0.01)；與對照組相比，試驗(yàn)I、II、III組的產(chǎn)蛋率分別提高了6.37%(P＜0.05)、7.64%(P＜0.01)、3.19%%(P＞0.05)。表明在日糧中添加葡萄籽提取物能夠抑制種雞產(chǎn)蛋高峰后期產(chǎn)蛋率下降，顯著提高種雞在產(chǎn)蛋高峰后期的日均產(chǎn)蛋量和產(chǎn)蛋率，提高飼料轉(zhuǎn)化率，在本試驗(yàn)條件下以添加0.02%的葡萄籽提取物效果最好。與對照組相比，試驗(yàn)II組種蛋合格率顯著高于對照組(P＜0.05)；試驗(yàn)I、II、III組種蛋受精率、受精蛋孵化率均極顯著高于對照組(P＜0.01)，表明葡萄籽提取物對產(chǎn)蛋高峰后期種雞的受精率和出雛率有明顯的改善作用。

2.2 葡萄籽提取物對種雞產(chǎn)蛋高峰后期生殖激素水平的影響 由表3可知，與對照組相比，在第20、40天，試驗(yàn)I、II、III組均極顯著提高蛋雞血清中E2含量、降低T含量(P＜0.01)；與對照組相比，在第20天試驗(yàn)II組蛋雞血清中P含量極顯著升高(P＜0.01)，試驗(yàn)I、III組升高(P＞0.05)；在第40天，試驗(yàn)I、II、III組血清中P含量與對照組相比無顯著差異(P＞0.05)；對比第20天，第40天3個(gè)試驗(yàn)組血清中E2、T及P含量均降低。

表3 葡萄籽提取物對種雞產(chǎn)蛋高峰后期生殖激素水平的影響

3 討論

3.1 葡萄籽提取物對種雞產(chǎn)蛋高峰后期生產(chǎn)性能的影響 （1）葡萄籽提取物作為一種新型的飼料添加劑對蛋雞、肉雞、育肥豬的生產(chǎn)性能均具有良好的促進(jìn)作用[5，8-11]。本試驗(yàn)選取48周齡羅曼粉種雞，在其產(chǎn)蛋高峰后期，在基礎(chǔ)日糧中添加不同水平的葡萄籽提取物40d，能夠抑制種雞產(chǎn)蛋率降低，提高產(chǎn)蛋率和日均產(chǎn)蛋量(P＜0.05)，提高飼料轉(zhuǎn)化率，極顯著降低了料蛋比(P＜0.01)。（2）在種雞產(chǎn)蛋高峰后期，隨著機(jī)體的衰老，生殖機(jī)能也逐漸衰退，腎氣衰弱，產(chǎn)蛋率逐漸下降[12]。而葡萄籽提取物主要活性成分是具有生物類黃酮結(jié)構(gòu)的葡萄籽原花青素，具有極強(qiáng)的抗氧化活性，可清除動物體內(nèi)的自由基，改善營養(yǎng)代謝環(huán)境，增強(qiáng)動物體質(zhì)和緩解不良應(yīng)激[13]。本研究中，試驗(yàn)I、II組的產(chǎn)蛋率與對照組相比，分別提高了6.37%(P＜0.05)、7.64%(P＜0.01)，隨著葡萄籽提取物添加水平的增加，試驗(yàn)III組的產(chǎn)蛋率較試驗(yàn)I、II組分別降低2.99%、4.14%(P＞0.05)，較對照組提高3.19%%(P＞0.05)。進(jìn)一步證實(shí)了葡萄籽提取物中含有的黃酮物質(zhì)具有弱雌激素活性，對動物的生產(chǎn)性能具有雙向調(diào)節(jié)作用[14]，適量的添加葡萄籽提取物顯著提高了蛋雞的生產(chǎn)性能，該研究結(jié)果與前人的報(bào)道相似，但是研究的最佳添加劑量不一致，張玉等[8]以50mg/kgGPC添加效果較好，胡如久等[9]以添加100mg/kg為宜，而在本試驗(yàn)條件下以添加0.02%的葡萄籽提取物效果最好。造成這種結(jié)果的不同可能在于試驗(yàn)選取雞的品種、日齡、添加時(shí)間、劑量以及添加物來源的不同。還有待于進(jìn)一步試驗(yàn)研究。（3）種雞的飼養(yǎng)周期長，真正體現(xiàn)其價(jià)值的指標(biāo)除了產(chǎn)蛋率以外，最重要的是其繁殖性能。葡萄籽提取物含有具生物類黃酮結(jié)構(gòu)的葡萄籽原花青素等多種活性物質(zhì)，可以保證種蛋中的營養(yǎng)成分含量；此外，諸多研究表明，葡萄籽提取物具有抗氧化、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等多種功能[15，16]，能有效緩解各種氧化應(yīng)激，提高機(jī)體抗氧化能力，提升健康水平，所以可提高雞的繁殖性能。本研究也證實(shí)了這一說法，試驗(yàn)II組種蛋合格率顯著高于對照組(P＜0.05)；試驗(yàn)I、II、III組種蛋受精率、孵化率均極顯著高于對照組(P＜ 0.01)。

3.2 葡萄籽提取物對種雞產(chǎn)蛋高峰后期生殖激素水平的影響 蛋雞卵泡的生長發(fā)育不但受垂體分泌的黃體生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)的調(diào)控，還會受到其自身卵巢激素(雌激素、孕酮、雄激素)的調(diào)控[17]。雞在產(chǎn)蛋高峰后期，各方面機(jī)能減退，體內(nèi)各種生殖激素含量降低，蛋雞卵巢中卵泡的發(fā)育也因此受到影響，排卵率下降，同時(shí)產(chǎn)蛋率下降。本試驗(yàn)中，與對照組相比，在第20、40天，試驗(yàn)I、II、III組均極顯著提高蛋雞血清中E2含量、降低T含量(P＜0.01)；試驗(yàn)II組極顯著提高種雞血清中P(第20天)和E2(第20、40天)的含量。與喬利敏等[18]、于杜鵑等[19]的報(bào)道結(jié)果一致。分析其原因，葡萄籽提取物中含有的植物類黃酮物質(zhì)具有弱雌激素活性，對動物的生產(chǎn)性能具有雙向調(diào)節(jié)作用。適量添加后與機(jī)體內(nèi)雌激素受體結(jié)合，提高雌激素和P水平，興奮下丘腦-垂體-性腺軸，刺激腺垂體釋放FSH和LH，從而促進(jìn)了卵泡成熟和排卵，提高了產(chǎn)蛋率，而雄激素睪酮可經(jīng)芳香化轉(zhuǎn)變?yōu)榇贫级鹱饔肹20]。相反試驗(yàn)III組高劑量添加的葡萄籽提取物反饋調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-卵巢軸，抑制腺垂體分泌 FSH 和LH，起抗雌激素的作用，與雌激素競爭雌激素受體，顯著降低了種雞血清中E2(第20、40天)的含量，進(jìn)而降低了雞的生產(chǎn)性能。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果證明，羅曼粉種雞產(chǎn)蛋高峰后期日糧添加葡萄籽提取物能夠提高生產(chǎn)性能和繁殖性能，顯著提高產(chǎn)蛋率、日均產(chǎn)蛋量、種蛋受精率及種蛋孵化率。本試驗(yàn)條件下，以日糧中添加0.02%葡萄籽提取物效果較好。但具體在生產(chǎn)實(shí)際中的最佳添加量仍有待進(jìn)一步研究。