藺曉月 馬慧玲 陳 靜 王苗利 張 月 孫圣福

（山東省動物疫病預防與控制中心 山東 濟南 250022）

為了解牛傳染性鼻氣管炎在山東省的規(guī)模化牛場的流行情況，本研究采用ELISA方法對山東省的24個牛場的707份牛血清進行牛傳染性鼻氣管炎血清學調查。結果顯示，24個牛場中17個牛場存在牛傳染性鼻氣管炎抗體陽性，場群陽性率為70.83%，205份樣品為陽性，個體陽性率為29%。表明牛傳染性鼻氣管炎在山東省被調查場中內普遍流行。此調查結果為山東省牛傳染性鼻氣管炎的流行病學研究提供了數(shù)據(jù)基礎，為防控牛傳染性鼻氣管炎提供科學依據(jù)。

牛傳染性鼻氣管炎是由牛傳染性鼻氣管炎病毒(Infectious Bovine rhinotracheitis virus，IBRV)引起的一種牛的急性接觸性傳染病，主要以呼吸困難、發(fā)熱、鼻炎、鼻竇炎、喉炎以及氣管炎為主要臨床癥狀，母牛還表現(xiàn)為膿皰性外陰道炎[1]。犢牛感染IBRV常因并發(fā)細菌性肺炎或腸炎而死亡，死亡率為85%～100%[2]。IBRV對成年牛的致死率較低，但該病毒可以潛伏于動物機體的三叉神經，可使病畜長期攜帶病毒，并在動物免疫力下降或受到應激時通過呼吸道排毒，感染牛群中的其他易感牛，給該病的防控造成極大困難。另外，公牛的精液也可攜帶IBRV，使得該病可以垂直傳播[3]。牛傳染性鼻氣管炎(IBR)1955年在美國首先被發(fā)現(xiàn)，次年首次分離到IBRV，除意大利、奧地利、挪威等少數(shù)國家已經消滅該病外，其他國家均有該病的報道，IBR被OIE列為須通報的疫病之一，在我國被列為二類動物疫病。1980年，我國首次在進口的奶牛中分離到IBRV[4]，并且在奶牛、黃牛、水牛及耗牛體內均檢測到IBRV的存在[5]。顏邦芬等[6]的調研報告顯示，全國29個省(市、自治區(qū))的IBR的陽性率為12.1～77.8%，表明IBR在我國牛群中廣泛流行。

為初步了解IBR在山東省規(guī)?；龅牧餍星闆r，為了下一步對省內規(guī)模牛場該病的流行病學調查提供數(shù)據(jù)，本研究抽查了全省的24個規(guī)模化牛場的血清樣品，采用ELISA方法進行該病的抗體檢測，以發(fā)現(xiàn)該病在這些牛場的感染狀況。

1 材料和方法

1.1 被檢血清 采集的血樣來自山東省6個地市的15個規(guī)模化奶牛場、9個規(guī)?；馀觯灿?07份(奶牛血清442份，肉牛血清265份)。所采血樣經無菌分離血清后于-20℃保存待檢，檢測前置于室溫條件下自然解凍。

1.2 主要試劑 傳染性牛鼻氣管炎病毒gE抗體檢測試劑盒，由IDEXX公司提供。

1.3 主要儀器 酶標儀，Thermo MK3。

1.4 操作方法 按試劑盒說明書的方法進行。

2 結果

通過對山東省的24個規(guī)?；鲅鍖W調查結果顯示：存在205頭IBRV抗體陽性牛，個體陽性率為29%，而場群陽性率達到70.83%，并且不同的場陽性率差別較大，除有7個場點未檢測到抗體外，17個陽性場群陽性率從3.33%到93.1%不等(表1)。相對于肉牛場，奶牛場IBRV抗體場陽性率較高，達到80%，但兩種場個體陽性率差異不大(表2)。對樣品的陽性區(qū)域進行分析顯示，6個地市樣品中均能檢出IBRV抗體，其中泰安和東營的檢出率較高，均在50%以上；而濟南的檢出率最低，僅為0.83%(附圖)。

表1 規(guī)?；雠魅拘员菤夤苎讬z測結果

表2 IBRV抗體群陰性率和個體陽性率 （%）

附圖 山東省不同地市IBRV抗體檢測結果

3 討論

3.1 關于ELISA方法和結果分析 ELISA診斷方法是近年來血清學檢測實驗室中常用的方法，具有敏感性高、特異性強、操作簡便等優(yōu)點，在疾病監(jiān)測中而被廣泛應用[7，8]。目前，市場上已有多種商品化ELISA試劑盒用于檢測IBRV gE或gB抗體。IBRV感染牛以后，可潛伏于神經系統(tǒng)內，使感染變的呈持續(xù)性、間歇性，因免疫不能有效阻止野毒感染，也不能阻止?jié)摲诓《镜某掷m(xù)性感染，因此防治該病最主要的措施就是對牛群進行定期檢疫，控制傳染源。朱海明[9]等對我國北京、天津、山東、河南、河北、四川、云南等7個省市牛群IBRV的感染情況調查結果顯示，IBRV的平均感染率為29.45%，其中天津、山東、河南、云南等4個省市IBRV的感染率超過30%；希尼尼根[10]等報道，內蒙古自治區(qū)IBRV的平均感染率為29.5%；石冬梅[11]等報道，河南省奶牛場場陽性率為100%，個體陽性率為59.29%；皮泉[12]等報道，貴州省奶牛IBRV抗體總體陽性率為82.50%。根據(jù)此次血清學調查結果顯示，山東省被檢的24個規(guī)?；鲋?，17個牛場存在IBRV抗體陽性牛，群陽性率達到70.83%，表明IBV在山東仍廣泛存在。而陽性場內個體陽性率從3.33%～93.10%，表明該病在牛場內的流行率差別較大。

3.2 從IBR得到的啟示 IBR對肉牛的肥育率，對奶牛的產奶量影響極大。本研究發(fā)現(xiàn)15個奶牛場和9個肉牛場，群陽性率分別為80%和55.56%，說明奶牛場IBRV的感染率較高，應著重加強日常生物安全工作。鑒于本病嚴重的危害性，難以根除性，各個牛場在引種時應嚴格檢疫，防止引進陽性牛和陰性感染牛，并及時淘汰本場陽性感染牛。

3.3 IBRV差異的原因分析 本研究發(fā)現(xiàn)泰安和東營IBRV感染率較高，應加強本地區(qū)牛場的生物安全控制及監(jiān)測。雖然其他地市IBRV抗體檢出率較低，但由于IBRV感染具有一定的潛伏期，有些?？贵w檢測為陰性，但此時仍可能為潛伏期感染，而這種牛一旦受到應急刺激，體內病毒量會上升隨之抗體滴度也上升。因此，即使通過ELISA檢測IBRV抗體呈陰性，也難以斷定牛群的感染狀態(tài)。由此可見，在本病的監(jiān)測中，應將病原學診斷和血清學診斷結合起來，嚴格檢疫，及時淘汰隱性感染牛，最終達到跟除IBR的目的。