李彩云

[摘要] 目的 制定醫(yī)療機構制劑術元健脾止痛丸質量標準草案中含量測定的方法與指標。方法 分析處方，選取陳皮中的橙皮苷為指標成分，采用HPLC法，進行方法學考察，對制劑中橙皮苷含量測定方法進行研究。結果 建立了制劑的含量測定方法并制定了質控指標。結論 通過三批中試樣品的測定，驗證了所建立的含量測定方法的穩(wěn)定性和可靠性，質控指標的合理性。

[關鍵詞] 醫(yī)療機構制劑;水丸;橙皮苷;含量測定;HPLC

[中圖分類號] R286.0 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2019）03（b）-0102-03

該文所研究的“術元健脾止痛丸”屬于醫(yī)療機構制劑新品種的研發(fā)，該文就該制劑質量標準草案中“含量測定”項目的測定方法及指標進行研究。

該制劑處方由麩炒白術、醋延胡索、 醋香附、麩炒蒼術、黨參、黃芪、陳皮、木香、砂仁、炒枳實、焦山楂、焦神曲、焦麥芽、炒雞內金、海螵蛸、煅牡蠣、黃連、炙甘草等18味中藥組成，參照《中國藥典》[1]各藥材飲片下含量測定方法，該文選擇陳皮中的橙皮苷的含量作為該制劑的含量測定指標，采用HPLC法，通過方法學考察，建立了該制劑中橙皮苷的HPLC含測方法。具體實驗如下。

1? 實驗材料

1.1? 供試藥品

術元健脾止痛丸：中試生產樣品三批，批號為：20160201、 20160202、20160203。

1.2? 儀器與試藥

儀器：島津LC-2010A高效液相色譜儀;Sartorius CP225D電子天平對照品及來源：橙皮苷，中國藥品生物制品檢定所，批號為0721-9909。

試劑：乙腈為色譜純，甲醇、乙醇為分析純，水為娃哈哈純凈水。

2? 實驗方法

2.1? 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙腈-0.01%磷酸水（20：80）為流動相;檢測波長為283 nm。理論板數(shù)按橙皮苷峰計算應不低于2 000。

2.2? 耐用性試驗

使用三種色譜柱：Inertsil ODS-3 5 μm;250×4.6 mm;依利特Hypersil BDS C18;5 μm;4.6×250 mm;Kromasil 100A C18;5 μm;250×4.6 mm，按上述色譜條件進行測試是可行的。

2.3? 供試品溶液制備方法的考察

2.3.1 提取溶劑的考察? 對照品溶液的制備：精密稱取橙皮苷對照品（批號：0721-9909）5.2 mg，置50 mL量瓶中，用甲醇溶解后得到濃度為0.104 0 mg/mL的對照品溶液。

供試品溶液的制備：取該品10 g，精密稱定，精密加人甲醇、80%甲醇、50%甲醇各50 mL，加熱回流1 h，放冷后再稱重量，分別用甲醇、80%甲醇、50%甲醇補至原重，取續(xù)濾液后即得。3種濃度的甲醇提取效果相當。沒有明顯差別，可確定甲醇為提取溶劑。

2.3.2 提取方法的考察? 供試品溶液的制備：取本品適量，研細，取約10 g，精密稱定，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，分別超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）20、30、40 min，加熱回流分時段提取出，放冷后稱重，用甲醇補至原重量，取續(xù)濾液即得。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，計算含量。見表1。

由測定結果可知，加熱回流1.0、1.5、2.0 h提取結果相當，故確定提取方法為加熱回流提取1 h。

2.3.3 取樣量的考察? 供試品溶液的制備：分別取研細的本品約5 g、10 g、15 g，加入甲醇50 mL，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取續(xù)濾液即得。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10 μL，注入液相色譜儀，測定，計算含量。三種取樣量測定結果差異不大，其中10 g的峰面積與對照品溶液峰面積大小接近，為了最大限度的減小系統(tǒng)誤差，確定取樣量為10 g。

2.3.4 供試品溶液的制備[2]? 取本品適量，研細，取約10 g，精密稱定，精密加人甲醇50 mL，密塞，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用甲醉補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4? 線性關系的考察

分別精密吸取濃度為0.104 0 mg/mL的橙皮苷對照品溶液各2、4 、6、8、10、12 μL，注入液相色譜儀，分別測定峰面積積分值。以橙皮苷對照品的進樣濃度為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程。測定結果見表2。

回歸方程y=1 484 364.05x+73.47，相關系數(shù)r=0.999 9。

試驗結果表明，橙皮苷進樣濃度在0.041 6～0.145 6 mg/mL之間進樣量與峰面積積分值呈良好的線性關系。

2.5? 儀器精密度試驗

精密吸取橙皮苷對照品溶液（0.104 0 mg/mL）10 μL，連續(xù)進樣6次，測其峰面積積分值。見表3。

試驗結果顯示儀器精密度良好。

2.6? 樣品穩(wěn)定性試驗

取本品適量，每隔5 h進樣1次測定橙皮苷的峰面積積分值，共考察25 h，以觀察供試品溶液在檢測過程中待測成分的穩(wěn)定性。見表4。

試驗結果表明供試品溶液在25 h內穩(wěn)定性良好，能夠滿足測定需要。

2.7? 樣品測定

按確定的方法和條件，對所收集到的3批樣品進行測定，見表5。

根據(jù)上述3批樣品的含量測定結果，并結合《中國藥典》中“陳皮”中橙皮苷的含量限度為2.5 mg/g，本品每g水丸中含陳皮0.086 g，按檢出率70%計算暫定本品每g含陳皮以橙皮苷計，應不得少于0.16 mg，實際測定值也均大于此值，故標準定為不得少于0.16 mg。

3? 討論

醫(yī)療機構制劑質量標準是反映醫(yī)療機構制劑質量特性的技術參數(shù)、指標，執(zhí)行標準是控制醫(yī)院制劑質量的有效手段，因此，質量標準的高低，決定著醫(yī)療機構對自制制劑質量控制的效力[3]，故本制劑質量標準的起草過程中，采用含量測定代替浸出物含量來控制藥品的質量，為全省醫(yī)療機構制劑的質量標準提高工作提供了一定的參考。

中藥制劑的質量受中藥原材料的影響較大，同樣都是合格的藥材，不同批次的藥材中有效成分的含量差別可能較大，甚至同一批次不同部位的藥材差別也較大[4-5]。因此本文含量指標的確定時，在確保制劑質量的前提下，將指標定的相對較低，即根據(jù)藥典中規(guī)定的指標成分的最低含量的基礎上，再按照藥材原粉入藥提取率不得低于70%，換算后得出的。

因基層醫(yī)療機構制劑室條件有限，制劑生產規(guī)模較小，為降低制劑成本，該文在選擇含量測定指標成分時，在能夠反映制劑質量的前提下，選擇操作比較簡單，實驗成本較低的橙皮苷作為指標成分。

[參考文獻]

[1]? 國家食品藥品監(jiān)督管理局.《中國藥典》[S].北京：化學工業(yè)出版社，2015：179-181.

[2]? 嚴曉麗，閆倩倩，劉曉政，等.高效液相色譜法測定衢枳殼中新橙皮苷及柚皮苷[J].食品研究與開發(fā)，2018，39（21）：161-167.

[3]? 陳家潤，江映珠，吳雪龍.廣東省醫(yī)療機構制劑質量標準修訂存在問題及對策[J].中國藥事，2016，30（3）：209-214.

[4]? 王美紅，張曉芹，王慧玉.中草藥醫(yī)院制劑的研究進展與發(fā)展趨勢[J].中醫(yī)藥管理雜志，2018，26（20）：11-13.

[5]? 嚴倩茹，鄔偉魁.中藥制劑含量均勻度研究[J].藥學研究，2018，27（9）：28-30.