白亞麗 范榕 趙雅寧 戈艷蕾 張馨

(華北理工大學(xué)，河北 唐山 063000)

凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體(LOX)-1是氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在動(dòng)脈粥樣硬化(AS)斑塊細(xì)胞表面的主要受體，參與AS斑塊形成及破裂。LOX-1在細(xì)胞表面大量表達(dá)后經(jīng)蛋白酶水解釋放可溶性LOX(sLOX)-1，血清sLOX-1水平能夠反映LOX-1的表達(dá)水平〔1〕。近年來學(xué)者對(duì)sLOX-1在急性冠脈綜合征(ACS)、阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)、2型糖尿病(T2DM)等中的變化進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)血清sLOX-1的變化是ACS的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子〔2～4〕。研究發(fā)現(xiàn)OSAHS與機(jī)體的糖代謝密切聯(lián)系，糖尿病(DM)合并OSAHS的患者血糖控制差〔5〕。OSAHS越嚴(yán)重，血糖控制越差，發(fā)生DM慢性并發(fā)癥的危險(xiǎn)性也越高，但血清sLOX-1在DM合并OSAHS的患者中如何變化尚不清楚。下肢血管病變(PAD)是DM常見的大血管并發(fā)癥之一。本研究探討T2DM合并OSAHS患者血清sLOX-1水平的變化及與PAD形成的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象 選取華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院2015年3月至2016年10月就診的T2DM患者，行夜間連續(xù)7 h以上多導(dǎo)睡眠圖監(jiān)測(cè)，依據(jù)OSAHS入選標(biāo)準(zhǔn)，篩選出T2DM伴OSAHS患者171例為觀察組，單純T2DM患者231例為對(duì)照組，兩組性別、年齡、DM病程、糖化血紅蛋白(HbA1c)、有無慢性病等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)血糖監(jiān)測(cè)符合世界衛(wèi)生組織(WHO)1999年制定的T2DM診斷標(biāo)準(zhǔn)；②OSAHS患者符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)睡眠呼吸障礙學(xué)組制定的OSAHS診治指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)；③知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①急慢性感染性疾病、腫瘤及腫瘤術(shù)后；②服用鎮(zhèn)靜、助眠等神經(jīng)、精神類藥物者；③嚴(yán)重心、肝、腎功能不全者；④妊娠期患者；⑤合并甲狀腺功能異?；蛴衅渌麅?nèi)分泌疾病。

表1 兩組一般資料比較

慢性病包括高血壓、高脂血癥

1.2PAD檢測(cè) 入組患者均于入院當(dāng)日或次日采用德國(guó)西門子AcusonSequoia C512型彩色多普勒超聲診斷儀，7.5～11.0 MHz線陣探頭，患者分別采用俯臥位和仰臥位，檢測(cè)動(dòng)脈包括雙側(cè)股淺動(dòng)脈、脛后動(dòng)脈及足背動(dòng)脈?；颊呔扇A北理工大學(xué)附屬醫(yī)院超聲診斷室同一位醫(yī)師負(fù)責(zé)且檢測(cè)前未被告知患者分組情況。PAD的診斷標(biāo)準(zhǔn)：將PAD的性質(zhì)分為4種，并依據(jù)病變的嚴(yán)重程度評(píng)分，①血管內(nèi)膜厚度：不厚(內(nèi)膜增厚<1.0 mm)為0分，輕度增厚(內(nèi)膜增厚1.0～1.2 mm)為1分，中重度增厚(內(nèi)膜增厚>1.2 mm)為2分；②動(dòng)脈硬化程度：正常為0分，輕度硬化(動(dòng)脈內(nèi)膜回聲強(qiáng)但未增厚，無斑塊)為1分，中重度硬化(輕度伴有斑塊或狹窄)為2分；③斑塊：正常(未發(fā)現(xiàn)斑塊)為0分，單發(fā)為1分，多發(fā)斑塊為2分，彌漫性斑塊為3分；④狹窄：無狹窄為0分，輕度狹窄(狹窄程度為30%～50%)為1分，中重度狹窄(狹窄程度為51%～75%)為2分，閉塞(無血流)為3分。含有1種及以上則可診斷為PAD，得分越高血管病變?cè)街亍?/p>

1.3多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè) 符合入組的T2DM患者入院后均采用YH1000多導(dǎo)睡眠儀(澳大利亞Compumedics公司)進(jìn)行多導(dǎo)睡眠圖(PSG)監(jiān)測(cè)，內(nèi)容包括口鼻氣流、體位、胸腹呼吸運(yùn)動(dòng)、鼾聲、呼吸暫停低通氣指數(shù)(AHI)及最低血氧飽和度(LSaO2)等，監(jiān)測(cè)當(dāng)日患者禁飲酒、濃茶、咖啡，禁服用鎮(zhèn)靜催眠類藥物，2 w內(nèi)無上呼吸道感染。所有研究對(duì)象需行整夜連續(xù)監(jiān)測(cè)，時(shí)間不少于7 h。數(shù)據(jù)經(jīng)睡眠分析軟件初步分析后由人工進(jìn)一步糾正，最終由專業(yè)醫(yī)師確定監(jiān)測(cè)結(jié)果。主要采集AHI及LSaO2為主要參考指標(biāo)。

1.4血清sLOX-1水平監(jiān)測(cè) 所有患者于入院后次日晨抽取空腹靜脈血2 ml，以3 000 r/min離心20 min，分離血清，取上清液放置于-80℃下保存待測(cè)。待標(biāo)本收齊后解凍統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)測(cè)定，試劑盒由天津?yàn)笊镏破房萍加邢挢?zé)任公司提供。本研究依照兩組患者血清sLOX-1的檢測(cè)結(jié)果按照P50分層：血清sLOX-1水平超過P50者為異常。

1.5血液生化指標(biāo)檢測(cè) 所有患者于入院后次日清晨空腹(入院當(dāng)日晚8點(diǎn)起禁飲食)抽取靜脈血，采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定HbA1c水平。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)，χ2檢驗(yàn)，Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者PAD檢出率、血清sLOX-1水平比較 觀察組PAD檢出率明顯高于對(duì)照組(P<0.00)；與對(duì)照組比較，觀察組患者血清sLOX-1水平顯著升高(P<0.001)，見表2。

表2 兩組PAD檢出率、血清sLOX-1水平比較

2.2觀察組患者AHI、LSaO2與血清sLOX-1水平的相關(guān)性分析 觀察組AHI與血清sLOX-1含量呈正相關(guān)(r=0.791,P=0.000)，LSaO2與患者血清sLOX-1含量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.705,P=0.000)。

2.3觀察組內(nèi)不同水平sLOX-1患者PAD發(fā)生率的比較 sLOX-1異常組PAD檢出率〔n=81,67例(60.9%)〕顯著高于正常組〔n=90,43例(39.1%)〕(χ2=8.475,P=0.004)。

2.4觀察組PAD單因素分析 觀察組患者依據(jù)有無PAD分為PAD組和無PAD組，兩組在DM病程、HbA1c、OSAHS病情方面，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01) ，見表3。

表3 觀察組PAD單因素分析〔n(%)〕

2.5觀察組PAD多因素分析 觀察組內(nèi)以是否有PAD(有=1，無=0)為因變量，以DM病程、HbA1c、AHI、LSaO2、sLOX-1為自變量進(jìn)行Logistic回歸分析，多因素分析結(jié)果顯示：DM病程、AHI、LSaO2、sLOX-1為OSAHS合并T2DM PAD的影響因素，見表4。

表4 觀察組PAD多因素分析

3 討 論

LOX-1最早在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)，后來又發(fā)現(xiàn)在巨噬細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞中也有表達(dá)，具有結(jié)合、內(nèi)吞、降解ox-LDL的功能〔6,7〕。近年來有研究顯示sLOX-1與OSAHS也具有一定相關(guān)性。Xu等〔8〕研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)OSAHS患者血清sLOX-1水平顯著高于對(duì)照組，且升高程度與OSAHS的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。也有學(xué)者指出〔9〕重度OSAHS男性血清中的sLOX-1 表達(dá)水平升高，在經(jīng)過氣道正壓通氣(CPAP)治療1個(gè)月后，患者sLOX-1 水平顯著下降。這表明，sLOX-1可能成為評(píng)價(jià)OSAHS嚴(yán)重程度和預(yù)后的新型指標(biāo)。本研究結(jié)果提示血清sLOX-1水平在合并OSAHS后顯著升高，且隨著OSAHS病情加重，血清sLOX-1水平越高。OSAHS引起DM患者血清sLOX-1升高的機(jī)制可能為：①間歇低氧：OSAHS患者慢性間歇性低氧激發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)可誘導(dǎo)急性期蛋白基因及相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)增加，進(jìn)而誘導(dǎo)LOX-1的上調(diào)〔10〕。②炎癥反應(yīng)：OSAHS屬于炎癥性疾病，研究發(fā)現(xiàn)IL-6水平的升高可刺激LOX-1的表達(dá)上調(diào)〔11〕。③交感神經(jīng)興奮：OSAHS反復(fù)的低氧/復(fù)氧可導(dǎo)致交感神經(jīng)興奮，研究顯示〔12〕交感神經(jīng)興奮可通過誘導(dǎo)血管緊張素Ⅱ的表達(dá)引起sLOX-1的釋放。此外本研究還說明OSAHS加重了DM患者PAD的發(fā)生，可能與血清sLOX-1的升高有關(guān)。

PAD是T2DM患者致死、致殘的重要原因，其病理基礎(chǔ)是AS〔13〕，氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、胰島素抵抗在AS發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。本研究結(jié)果可得出血清sLOX-1水平與OSAHS病情呈正相關(guān)關(guān)系，當(dāng)OSAHS病情越嚴(yán)重，血清sLOX-1水平越高，患者下肢血管病變?cè)絿?yán)重。本研究多因素分析結(jié)果說明血清sLOX-1參與了OSAHS合并T2DM患者血管病變的發(fā)生發(fā)展過程。機(jī)制可能為：被轉(zhuǎn)運(yùn)到血管內(nèi)皮細(xì)胞的ox-LDL一方面可抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的活性功能，促進(jìn)單核細(xì)胞和血小板活化，加速單核細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附和聚集，促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成，觸發(fā)AS〔14〕；另一方面，LOX-1還可介導(dǎo)ox-LDL促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，加速動(dòng)脈硬化的進(jìn)程〔15〕。此外，本研究多因素分析顯示，長(zhǎng)期的高糖刺激不僅導(dǎo)致胰島β細(xì)胞功能進(jìn)行性下降，同時(shí)患者炎癥水平、糖脂代謝紊亂程度也不斷加重，因此下肢動(dòng)脈硬化的發(fā)生率也隨之增高。間歇低氧可導(dǎo)致機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)，脂質(zhì)過氧化，細(xì)胞黏附因子表達(dá)增強(qiáng)，導(dǎo)致單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附、聚集，引發(fā)血管內(nèi)皮損傷；此外頻繁低氧還導(dǎo)致炎性因子水平增高，引發(fā)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致大量單核巨噬細(xì)胞向血管內(nèi)膜浸潤(rùn)，促進(jìn)動(dòng)脈硬化及血栓形成。本研究中HbA1c僅在單因素分析中有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但并未進(jìn)入多因素回歸模型，考慮與樣本量較少有關(guān)。

綜上，OSAHS加重T2DM患者PAD的程度，因此對(duì)于就診的T2DM患者若懷疑合并OSAHS疾病應(yīng)及早進(jìn)行篩查，以便及時(shí)給予有效干預(yù)，從而改善DM患者預(yù)后及血管并發(fā)癥的嚴(yán)重程度。檢測(cè)OSAHS合并T2DM患者血清sLOX-1水平對(duì)患者的PAD程度具有警示作用。