羅曉莉 肖燕萍 林穎烽

[摘要] 目的 通過(guò)Meta分析系統(tǒng)性評(píng)價(jià)長(zhǎng)鏈非編碼RNA尿路上皮癌相關(guān)1基因（lncRNA-UCA1）對(duì)膀胱癌的診斷價(jià)值。 方法 檢索PubMed、Web of Science、EMBASE、CNKI、萬(wàn)方、維普等數(shù)據(jù)庫(kù)，收集lncRNA-UCA1用于膀胱癌診斷的相關(guān)文獻(xiàn)，起止時(shí)間為建庫(kù)至2018年7月31日。根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)篩選文獻(xiàn)、提取資料；應(yīng)用QUADAS-2條目工具評(píng)價(jià)文獻(xiàn)質(zhì)量，采用Meta-Disc 1.4和Stata 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，合并UCA1用于膀胱癌診斷的統(tǒng)計(jì)量。 結(jié)果 共納入6篇文獻(xiàn)，其共含膀胱癌患者919例，非癌對(duì)照418例。lncRNA-UCA1用于區(qū)分膀胱癌和非癌對(duì)照的合并敏感度為0.78（95%CI：0.76～0.80），特異度為0.87（95%CI：0.85～0.90），曲線下面積（AUC）為0.93。亞組分析結(jié)果顯示，基于GAPDH為內(nèi)參的lncRNA-UCA1檢測(cè)效能（AUC：0.98）高于非GAPDH（AUC：0.85）；以尿液為檢測(cè)基質(zhì)的lncRNA-UCA1分析具有較高的診斷效能（敏感度：0.78；特異度：0.86；AUC：0.93）。結(jié)論 lncRNA-UCA1對(duì)膀胱癌有較高的臨床輔助診斷價(jià)值。

[關(guān)鍵詞] 長(zhǎng)鏈非編碼RNA；尿路上皮癌相關(guān)1基因；膀胱癌；診斷；Meta分析

[中圖分類(lèi)號(hào)] R737.14 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2019）04（b）-0077-05

Meta-analysis of the value of long-chain non-coding RNA-UCA1 in the diagnosis of bladder cancer

LUO Xiaoli* XIAO Yanping* LIN Yingfeng* CUI Zhaolei CHEN Yan

Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology Research， Department of Clinical Laboratory， Fujian Cancer Hospital and Fujian Medical University Cancer Hospital， Fujian Province， Fuzhou 350014， China

[Abstract] Objective To systematically evaluate the diagnostic value of long-chain non-coding RNA urothelial carcinoma associated gene 1 （lncRNA-UCA1） for bladder cancer by meta-analysis. Methods PubMed， Web of Science， EMBASE， CNKI， Wanfang and VIP databases were retrieved. Literatures related to the use of lncRNA-UCA1 in the diagnosis of bladder cancer were collected， starting from the establishment of the database until July 31， 2018. According to inclusion and exclusion criteria， literatures were screened and data were extracted； QUADAS-2 item tool was used to evaluate the quality of literature， Meta-Disc 1.4 and Stata 12.0 software were used for statistical analysis， and statistics on UCA1 for the diagnosis of bladder cancer were combined. Results A total of 6 articles were included， including 919 cases of bladder cancer and 418 cases of non-cancer control. The combined sensitivity of lncRNA-UCA1 was 0.78 （95% CI： 0.76-0.80）， specificity was 0.87 （95% CI： 0.85-0.90）， and area under curve （AUC） was 0.93. Subgroup analysis showed that the detection efficiency of lncRNA-UCA1 based on GAPDH as internal reference （AUC： 0.98） was higher than that of non-GAPDH （AUC： 0.85）； the detection efficiency of lncRNA-UCA1 based on urine as detection matrix was higher （sensitivity： 0.78； specificity： 0.86； AUC： 0.93）. Conclusion lncRNA-UCA1 has high clinical value in the diagnosis of bladder cancer.

[Key words] Long-chain non-coding RNA； Urothelial cancer-related gene 1； Bladder cancer； Diagnosis； Meta-analysis

膀胱癌發(fā)生于膀胱黏膜，是我國(guó)泌尿系最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其在西方國(guó)家的發(fā)病率僅次于前列腺癌[1]。臨床上，膀胱鏡檢查是診斷膀胱癌的最主要方法，常與尿細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合應(yīng)用。然而，膀胱鏡為侵入性檢查，而尿細(xì)胞學(xué)檢查雖具有很高的特異性（96%），但其檢測(cè)的靈敏度低（44%）（尤其是在低度惡性腫瘤診斷中）[2]。尿路上皮癌相關(guān)1基因（UCA1）是一種在膀胱癌組織中高表達(dá)的長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）。研究[3-7]發(fā)現(xiàn)，lncRNA-UCA1可能膀胱癌診斷的潛在標(biāo)志物。有研究[8]表明，lncRNA-UCA1在診斷膀胱癌中有高度特異性，尤其是對(duì)膀胱癌G2～G3期的病例有極高的敏感度，提示lncRNA-UCA1有助于膀胱癌的早期診斷。本研究擬通過(guò)定量Meta分析，系統(tǒng)性評(píng)價(jià)lncRNA-UCA1對(duì)膀胱癌的綜合診斷效能。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

以“尿路上皮癌相關(guān)1基因”“膀胱癌”“診斷”和“l(fā)ncRNA-UCA1”“bladder cancer”“diagnosis”等為檢索主題詞，單個(gè)或組合形式檢索PubMed、Web of Science、EMBASE、CNKI、萬(wàn)方、維普等電子數(shù)據(jù)庫(kù)，檢索時(shí)間為建庫(kù)至2018年7月31日的中英文文獻(xiàn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究對(duì)象為臨床已經(jīng)病理確診的膀胱癌患者；②研究對(duì)病例組、對(duì)照組的類(lèi)型及例數(shù)界定明確；③研究提供足夠數(shù)據(jù)用于直接或間接構(gòu)建2×2診斷四格表。排除標(biāo)準(zhǔn)：①非臨床診斷研究，如基礎(chǔ)研究、綜述、病例報(bào)告、信件、評(píng)論、會(huì)議摘要等；②提供的數(shù)據(jù)不能構(gòu)建2×2診斷四格表；③重復(fù)發(fā)表的論文。

1.3 資料提取

2名研究人員獨(dú)立提取文獻(xiàn)內(nèi)容，相互核對(duì)結(jié)果一致。提取的數(shù)據(jù)包括：標(biāo)題、第一作者、出版年份、研究人群、樣本量（包括對(duì)照組和病例組）、cut-off值、樣本類(lèi)型、內(nèi)參基因類(lèi)型和檢驗(yàn)方法。

1.4 質(zhì)量評(píng)價(jià)

采用QUADAS-2量表評(píng)價(jià)文獻(xiàn)質(zhì)量。根據(jù)每部分納入的相關(guān)性問(wèn)題（共7項(xiàng)），回答“是”“否”和“不確定”，對(duì)應(yīng)每項(xiàng)偏倚風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)判定為“低（1分）”“高（0分）”或“不確定（0分）”，7項(xiàng)的總得分≥4分，即認(rèn)為文獻(xiàn)研究質(zhì)量較高[9-10]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用Meta-Disc 1.4和Stata 12.0軟件進(jìn)行Meta分析。合并敏感性、特異性、診斷比值比（DOR）、陽(yáng)性似然比（PLR）和陰性似然比（NLR），匯總受試者工作特征曲線（ROC）曲線及其相應(yīng)的95%CI；通過(guò)Spearman秩相關(guān)、Cochran-Q和I2檢驗(yàn)評(píng)估研究間異質(zhì)性，P < 0.05或I2 > 50%提示研究間有異質(zhì)性。研究間存在異質(zhì)性時(shí)，采用隨機(jī)效應(yīng)模型合并統(tǒng)計(jì)量[11-12]。通過(guò)亞組分析和敏感性分析探討異質(zhì)性來(lái)源；Deek′s漏斗圖用于分析發(fā)表偏倚，以P < 0.05被認(rèn)為研究間存在發(fā)表偏倚[13]。

2 結(jié)果

2.1 納入文獻(xiàn)

本研究共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)61篇，依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，剔除重復(fù)文獻(xiàn)3篇；通過(guò)閱讀標(biāo)題和摘要排除11篇；剩余13篇文獻(xiàn)進(jìn)行全文評(píng)估，進(jìn)一步剔除不符合文獻(xiàn)7篇，最終納入文獻(xiàn)共6篇。見(jiàn)圖1。

2.2 文獻(xiàn)特點(diǎn)和質(zhì)量評(píng)估

本研究共納入膀胱癌患者919例，非癌對(duì)照418例，納入文獻(xiàn)的特征見(jiàn)表1。采用QUADAS-2條目對(duì)納入文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估，納入的6篇文獻(xiàn)中除文獻(xiàn)[3]，其他評(píng)分均高于4分，提示研究的質(zhì)量較高。見(jiàn)圖2。

2.3 異質(zhì)性分析

經(jīng)Spearman分析，相關(guān)系數(shù)r = -0.303、P = 0.339，提示本研究不存在閾值效應(yīng)以及其引起的異質(zhì)性。非閾值效應(yīng)產(chǎn)生的異質(zhì)性由Cochran-Q值和I2檢驗(yàn)值評(píng)估，結(jié)果顯示Cochran-Q = 80.93，P = 0.0000，I2 = 86.4%，表明存在由非閾值效應(yīng)引起的異質(zhì)性。見(jiàn)表2。

2.4 診斷性能

因研究間異質(zhì)性的存在，故選用隨機(jī)效應(yīng)模型合并效應(yīng)量。lncRNA-UCA1用于診斷膀胱癌的ROC曲線AUC為0.93，合并敏感度為0.78（95%CI：0.76～0.80），特異度為0.87（95%CI：0.85～0.90），DOR為44.90（95%CI：18.23～110.56），PLR為8.7（95%CI：4.34～15.38），NLR為0.21（95%CI：0.13～0.33）。見(jiàn)圖3。本研究將內(nèi)參基因類(lèi)型和標(biāo)本類(lèi)型分別對(duì)亞組進(jìn)行分析，結(jié)果表明，基于GAPDH為內(nèi)參照的lncRNA-UCA1檢測(cè)效能高于非GAPDH；此外，以尿液為檢測(cè)基質(zhì)的lncRNA-UCA1分析也具有較高的診斷效能。見(jiàn)表3。

2.5 敏感性分析和Meta回歸分析

通過(guò)敏感性分析，發(fā)現(xiàn)納入的文獻(xiàn)[5]數(shù)據(jù)為離群值（圖4），提示其可能是研究異質(zhì)性的來(lái)源之一。對(duì)該數(shù)據(jù)進(jìn)行剔除，重新合并效能，結(jié)果顯示合并敏感度提高至0.82（95%CI：0.80～0.84），DOR提高為47.01（95%CI：18.16～121.69）。設(shè)置Meta回歸分析對(duì)研究人群、標(biāo)本類(lèi)型、基因類(lèi)型等變量進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，研究間異質(zhì)性來(lái)源可能與研究的內(nèi)參基因類(lèi)型有關(guān)[相對(duì)比值比（RDOR）=3.7，95%CI：0.91～15.03，P = 0.0641]。

2.6 發(fā)表偏倚

采用Deek′s漏斗圖評(píng)估納入文獻(xiàn)的潛在發(fā)表偏倚，其P = 0.37，提示本研究納入文獻(xiàn)不存在發(fā)表偏倚。

3 討論

膀胱癌是最常見(jiàn)的男性泌尿生殖系腫瘤之一[14-16]。目前，膀胱癌的診斷手段主要包括膀胱鏡、隨機(jī)膀胱活檢和尿細(xì)胞學(xué)檢查，然而前兩種方法具有侵入性和不適感，而細(xì)胞學(xué)檢查由于觀察者之間的高變異性檢查的敏感度低[17-18]。lncRNA-UCA1在膀胱癌的診斷中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，但因研究間的樣本量、人群等差異，其診斷價(jià)值尚存爭(zhēng)議。因此，本研究按照診斷性薈萃指南[19]，系統(tǒng)性評(píng)估了lncRNA-UCA1對(duì)膀胱癌的診斷效能。

本研究的合并靈敏度為0.78，特異度為0.87，AUC為0.93，提示lncRNA-UCA1在膀胱癌的診斷中是具有很高價(jià)值的生物學(xué)標(biāo)志物。此外，DOR值可以說(shuō)明診斷結(jié)果與疾病之間的關(guān)聯(lián)程度[20-22]。本研究UCA1診斷膀胱癌的總體準(zhǔn)確性是可信的。此外，合并的PLR為8.17，提示與無(wú)癌癥患者比較，lncRNA-UCA1在診斷膀胱癌時(shí)分析效能高出8倍；NLR為0.21，提示lncRNA-UCA1在診斷膀胱癌中可能存在21%的假陽(yáng)性率，提示還不足以完全排除膀胱癌。而SROC曲線位置靠近左上角，AUC為0.93，提示lncRNA-UCA1在膀胱癌中的診斷價(jià)值很高?？傊?，本研究的研究結(jié)果提示，lncRNA-UCA1可作為膀胱癌早期診斷的輔助生物標(biāo)志物推廣使用。

本研究亞組分析結(jié)果顯示，基于GAPDH為內(nèi)參照的lncRNA-UCA1檢測(cè)效能明顯高于非GAPDH，提示GAPDH可作為lncRNA-UCA1檢測(cè)較好的內(nèi)參基因。本研究納入的樣本類(lèi)型包括尿液和組織，當(dāng)僅以尿液為檢測(cè)基質(zhì)時(shí)，lncRNA-UCA1分析具有較高的診斷效能（敏感度：0.78；特異度：0.86；AUC：0.93），效能與整體合并的效應(yīng)量相當(dāng)。因本研究?jī)H納入1項(xiàng)樣本類(lèi)型為組織的研究，故未進(jìn)行亞組分析。

本研究存在較明顯的異質(zhì)性，主要來(lái)自非閾值效應(yīng)。同時(shí)，本研究進(jìn)行了亞組分析和來(lái)源分析，證實(shí)異質(zhì)性是由非閾值效應(yīng)引起的，且所涉及的不同內(nèi)參基因類(lèi)型對(duì)膀胱癌診斷有不同的影響，這可能是異質(zhì)性的主要來(lái)源。此外，由于lncRNA-UCA1的研究數(shù)量較少，可能存在尚未發(fā)表的文獻(xiàn)對(duì)本研究lncRNA-UCA1診斷價(jià)值的結(jié)果造成影響。另外，本研究納入的樣本類(lèi)型中僅1篇研究是組織來(lái)源的，其納入總研究后，可能會(huì)增大合并統(tǒng)計(jì)量的異質(zhì)性。

綜上所述，本研究證實(shí)lncRNA-UCA1是一個(gè)新型的無(wú)創(chuàng)性腫瘤標(biāo)志物，具有較高的敏感度和特異度，對(duì)膀胱癌具有一定的臨床輔助診斷價(jià)值。

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（收稿日期：2018-08-31 本文編輯：王 蕾）