蔡盼盼，張文強(qiáng)，張昊琳，王清輝，張國慶，陳青君※

（1. 北京農(nóng)學(xué)院植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院農(nóng)業(yè)應(yīng)用新技術(shù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 102206； 2. 承德興春和農(nóng)業(yè)股份有限公司，灤平 068250； 3. 北京農(nóng)學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院農(nóng)業(yè)部都市農(nóng)業(yè)（北方）重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 102206）

0 引 言

雙孢蘑菇味道鮮美，是一種高蛋白、低脂肪、低熱能的健康食品，深受世界各國人民的喜愛[1-2]。中國是雙孢蘑菇生產(chǎn)大國[3]，栽培上以引進(jìn)荷蘭雙孢蘑菇的栽培模式為主，采用隧道式發(fā)酵技術(shù)制作雙孢蘑菇培養(yǎng)料[4]。發(fā)酵包括2個(gè)時(shí)期：一次發(fā)酵和二次發(fā)酵。一次發(fā)酵期間，物料溫度上升到 80 ℃，使麥秸軟化[5]；二次發(fā)酵時(shí)期進(jìn)行巴氏滅菌處理（60 ℃），隨后在45～50 ℃下調(diào)節(jié)約4～5 d，再將溫度降至約25 ℃[6]。巴氏滅菌殺死一些有害微生物、線蟲、昆蟲等，調(diào)整期發(fā)酵物料中的氨氣逐漸被釋放，大量的有益微生物繁殖，為雙孢蘑菇菌絲的生長做準(zhǔn)備。發(fā)酵物料理化性狀直接關(guān)系到雙孢蘑菇的品質(zhì)和產(chǎn)量[7]。研究發(fā)現(xiàn)，在一次發(fā)酵期間，小麥秸稈碳水化合物，如纖維素和木聚糖僅在有限的程度上被降解；在二次發(fā)酵期間，高達(dá)50%的物料碳水化合物被代謝[5]。二次發(fā)酵期間秸稈的木質(zhì)纖維素成分和微生物生物量發(fā)生很大變化[8-9]，發(fā)酵的過程是微生物菌群演替的過程，微生物產(chǎn)生可降解木質(zhì)纖維素的酶，其中羧甲基纖維素酶（CMC）、纖維二糖酶、葡聚糖酶等參與分解纖維素，木聚糖酶、木糖苷酶、α-阿拉伯糖酶等參與分解半纖維素[10-12]。Jurak等[13]在雙孢蘑菇子實(shí)體生長期間的培養(yǎng)料提取物中檢測到內(nèi)切葡聚糖酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶和木糖苷酶活性，Patyshakuliyeva等[14]發(fā)現(xiàn)子實(shí)體生長期間最豐富的纖維素酶是纖維二糖水解酶、葡聚糖酶和 β-葡萄糖苷酶，半纖維素酶有木聚糖酶、木糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、葡萄糖苷酶等，木質(zhì)素降解酶有漆酶、錳過氧化物酶等，在子實(shí)體形成階段，纖維素降解 35%，半纖維素降解50%，木質(zhì)素降解40%[5]。高曉靜等報(bào)道在物料發(fā)酵期間纖維素和半纖維素的利用率可達(dá)到 40%～60%[15]，但木質(zhì)纖維素及其酶活對(duì)產(chǎn)量的影響未見報(bào)道。Kariaga等研究表明物料發(fā)酵過程中的生物、理化因素影響蘑菇菌絲對(duì)培養(yǎng)料的選擇[16]。Sharma和Kilpatrick依據(jù)雙孢蘑菇發(fā)酵物料的質(zhì)量因素預(yù)測子實(shí)體的潛在產(chǎn)量，研究的數(shù)據(jù)包括物料的含水量、pH值、含氮量、含碳量和銅、鐵和鈉含量等[17]一般常見參數(shù)，結(jié)果表明決定物料質(zhì)量的因素是多個(gè)因素的組合，但對(duì)木質(zhì)纖維素組分、相關(guān)降解酶等參數(shù)與產(chǎn)量的關(guān)系沒有提及。

針對(duì)前人對(duì)雙孢蘑菇發(fā)酵培養(yǎng)料質(zhì)量相關(guān)因素的研究結(jié)果，本研究采用隧道式發(fā)酵技術(shù)進(jìn)行雙孢蘑菇培養(yǎng)料的發(fā)酵處置，測定雙孢蘑菇培養(yǎng)料二次發(fā)酵結(jié)束后 13個(gè)理化指標(biāo)及酶活，包括水分、pH值、EC、含碳量、含氮量、木質(zhì)纖維素各組分含量和酶活，以及雙孢蘑菇產(chǎn)量，運(yùn)用主成分分析、聚類分析和多元回歸分析等多變量分析方法，探究雙孢蘑菇培養(yǎng)料二次發(fā)酵結(jié)束后各理化指標(biāo)及酶活對(duì)產(chǎn)量形成的作用和相對(duì)重要性，為評(píng)價(jià)和篩選雙孢蘑菇高產(chǎn)發(fā)酵培養(yǎng)料指標(biāo)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)采樣于2017年7－12月在河北省承德市灤平縣興春和農(nóng)業(yè)股份有限公司雙孢蘑菇工廠進(jìn)行。

發(fā)酵原料包括黍草、稻草、麥草、玉米芯、雞糞、石膏、豆粕等，采用隧道式發(fā)酵技術(shù)制作發(fā)酵物料，第1～3天將草料、玉米芯、雞糞放入混料池混合后建堆；第4～15天入一次發(fā)酵隧道，中間倒倉3次，并在每次倒倉時(shí)根據(jù)當(dāng)前含水量補(bǔ)充水分至 75%左右[18]；一次倒倉時(shí)加入石膏、豆粕；第16～22天轉(zhuǎn)入二次發(fā)酵隧道。二次發(fā)酵結(jié)束后發(fā)酵物料接種雙孢菇菌種，按照工廠化栽培工藝進(jìn)行菇房管理，栽培菌種為 Sylven A15。試驗(yàn)所需培養(yǎng)料樣品取自二次發(fā)酵結(jié)束后，從隧道前、中、后斷面各8個(gè)點(diǎn)取樣混合；結(jié)合原料來源和配合當(dāng)?shù)毓S生產(chǎn)，依據(jù)23:1～25:1碳氮比[19]制作原料配方，10批次配方如表1所示；重復(fù)3次測定；每批菇房生產(chǎn)期栽培管理一致，通過雙孢蘑菇專用空調(diào)和可編程邏輯控制器（programmable logic controller，PLC）智能化控制系統(tǒng)嚴(yán)格控制和調(diào)節(jié)雙孢蘑菇不同生長時(shí)期的溫濕度、CO2體積分?jǐn)?shù)和風(fēng)壓風(fēng)量。菌絲生長期間料溫控制在23～25 ℃[20]，空氣達(dá)到飽和含水量，CO2體積分?jǐn)?shù)在0.5%～1%；子實(shí)體生長時(shí)，菇房里的空氣溫度保持在16～18 ℃[21]，空氣相對(duì)濕度85%～95%[18]，CO2體積分?jǐn)?shù)保持在0.08%以下。菇床面積為900 m2，統(tǒng)計(jì)每批菇房產(chǎn)量。

表1 工廠化物料發(fā)酵原料配方Table 1 Formula of factory composting raw material

1.2 試驗(yàn)方法

采用pH計(jì)和電導(dǎo)率儀測定pH值、電導(dǎo)率值。用干燥稱質(zhì)量法測定含水量。用半自動(dòng)凱氏定氮法[22]測定含氮量。利用灼燒質(zhì)量法測定灰分及含碳量。采用濾袋法[23]測定樣品的纖維素和半纖維素含量。用DNS（3,5-二硝基水楊酸，3,5-Dinitrosalicylic acid）顯色法測定培養(yǎng)料中木聚糖酶酶活、羧甲基纖維素酶（CMC）酶活[24-25]。對(duì)硝基苯酚法測定纖維二糖水解酶、β-木聚糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶酶活[26-28]。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用 Excel 2007 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差，再利用SPSS19.0對(duì)二次發(fā)酵結(jié)束后培養(yǎng)料各理化性質(zhì)及酶活進(jìn)行主成分分析、聚類分析，并用多元回歸分析[29]研究其與產(chǎn)量的相關(guān)性。

2 結(jié)果與分析

2.1 二次發(fā)酵料理化性質(zhì)和相關(guān)酶活與單位面積產(chǎn)量

對(duì)10批二次發(fā)酵結(jié)束后的含水量、pH值、EC值、含碳量、含氮量碳氮比等理化性質(zhì)和羧甲基纖維素酶（CMC）、木聚糖酶、木糖苷酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、纖維二糖酶、纖維素和半纖維素相對(duì)含量分別進(jìn)行測定。由于堆肥期間木質(zhì)素幾乎不降解，分解木質(zhì)素的相關(guān)酶活性較低[5]，本次研究結(jié)果未列出。結(jié)果如表2、表3所示。

表2 二次發(fā)酵料理化性質(zhì)與雙孢蘑菇單位面積產(chǎn)量Table 2 Physicochemical properties of secondary fermentation material and yield per unit area of Agaricus bisporus

表3 二次發(fā)酵后培養(yǎng)料纖維素、半纖維素含量及相關(guān)酶活Table 3 Content of cellulose and hemicellulose in secondary fermentation materials and related enzyme activities

10批二次發(fā)酵的培養(yǎng)料含水率在65.54%～72.26%之間，pH值7.39～8.16偏弱堿性，EC值在2.05～3.37之間，氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)大多都在1.88%～2.08%，僅1批較低為1.62%，碳氮比大多都在17.10～18.55，有3批碳氮比較低，分別為 14.48:1、15.06:1、16.41:1，總體符合雙孢蘑菇二次發(fā)酵料生產(chǎn)的要求[30-31]；羧甲基纖維素酶活在1.85～2.89 U/mmol之間，木聚糖酶活在 8.24～13.52 U/mmol之間，木糖苷酶活在 23.76～52.77 U/μmol之間，α-阿拉伯呋喃糖苷酶活在82.74～254.85 U/μmol之間，差異較大；α-纖維二糖酶活在 15.81～39.21 U/μmol之間；纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)9.40%～19.38%不等，半纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)在 5.95%～14.93%；單位面積產(chǎn)量為 18.11～26.42 kg/m2。為進(jìn)一步明確雙孢蘑菇二次發(fā)酵培養(yǎng)料各種酶活、理化性狀與產(chǎn)量的關(guān)系，采用主成分分析、聚類分析、多元回歸分析進(jìn)一步分析。

2.2 主成分分析

主成分分析（principal component analysis，PCA）主要通過降維的方法，用較少的指標(biāo)來代替和綜合反映原來較多的信息[32]，提取出數(shù)據(jù)要表達(dá)的信息的主要成分。特征值的大小代表了矩陣正交化之后所對(duì)應(yīng)特征向量對(duì)于整個(gè)矩陣的貢獻(xiàn)程度。以特征值大于1為標(biāo)準(zhǔn)[32]在13個(gè)參數(shù)中提取出4個(gè)主成分，累積貢獻(xiàn)率達(dá)84.04%，可代表原始因子所代表的大部分信息。因子載荷矩陣是各個(gè)原始變量的因子表達(dá)式的系數(shù)，代表提取的公因子對(duì)原始變量的影響程度。根據(jù)0.5原則，主成分1包括纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、半纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳氮比，貢獻(xiàn)率為31.18%，主要是與碳水化合物的變化的相關(guān)參數(shù)；主成分2包括羧甲基纖維素酶、木糖苷酶、α-纖維二糖酶，貢獻(xiàn)率為18.45%，CMC、α-纖維二糖酶主要分解纖維素，木糖苷酶外切木聚糖主鏈，成分 2與培養(yǎng)料中纖維素和少量半纖維素降解有關(guān)；主成分3包括EC值、氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)，貢獻(xiàn)率為18.34%，培養(yǎng)料中的氮源經(jīng)過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為可供蘑菇菌絲利用的形態(tài)，EC值反應(yīng)了培養(yǎng)料中可溶性鹽濃度，過高則影響菌絲對(duì)礦質(zhì)元素的吸收，皆為影響發(fā)酵物料質(zhì)量的重要指標(biāo)；主成分 4主要是含水率、木聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、pH值，貢獻(xiàn)率為16.08%，含水率的多少影響料堆中氧氣的流通和微生物的活動(dòng)，間接影響秸稈的降解，木聚糖酶在分解木聚糖中起主要作用，α-阿拉伯呋喃糖苷酶則分解木聚糖側(cè)鏈，pH值影響培養(yǎng)料中微生物的生長，主成分4在降解半纖維素中起主要作用（表4）。

表4 主成分因子載荷矩陣Table 4 Principal component factor load matrix

2.3 聚類分析

聚類分析（CA）依據(jù)事物的數(shù)值特征觀察樣品間的親疏關(guān)系，而樣品間的親疏關(guān)系由樣品之間的距離衡量，一旦定義了樣品間的距離，就把距離近的樣品歸為一類[32]。用SPSS19.0計(jì)算13個(gè)指標(biāo)之間的歐氏距離[33-34]，將各樣本的距離映射到0～25之間，構(gòu)建聚類圖（圖1）。

圖1 聚類分析樹狀圖Fig. 1 Cluster analysis tree

由圖1看出，當(dāng)距離臨界值取18時(shí)，成分因子聚為4類。第1類：纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、半纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳氮比、木糖苷酶活、α-纖維二糖酶活、羧甲基素纖維素酶（CMC）活性，降解纖維素的CMC、α-纖維二糖酶以及降解少量半纖維素的木糖苷酶活性影響纖維素、半纖維素降解，從而影響纖維素、半纖維素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，即第一類與碳水化合物的變化有關(guān)；第 2類：EC值、氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)，與主成分分析的成分3相一致，為影響二次發(fā)酵培養(yǎng)料質(zhì)量的重要指標(biāo)；第3類：含水率、木聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶，在降解半纖維素中起主要作用；第4類：pH值，培養(yǎng)料中適宜的酸堿環(huán)境對(duì)微生物和雙孢蘑菇菌絲的生長有重要影響。

2.4 多元回歸分析

逐步回歸分析是分別把每一個(gè)變量都選入模型中，每次都保留系數(shù)顯著水平最高的那個(gè)變量，剔除不顯著的變量，通過多次的選入和剔除最終得到系數(shù)的顯著的回歸方程。隨機(jī)選取9批樣品，以二次發(fā)酵后的13個(gè)指標(biāo)為自變量，以單位面積產(chǎn)量為因變量進(jìn)行逐步回歸分析，得到的最優(yōu)回歸方程為：

單位面積產(chǎn)量(kg/m2)=10.134+2.762×CMC 酶活(U/mmol)+1.248×木聚糖酶酶活(U/mmol)-0.566×纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)×100%（R=0.969，F(xiàn)=25.857，P=0.002）

模型擬合優(yōu)度系數(shù)為0.969，接近于1，擬合優(yōu)度較高，方差檢驗(yàn) F=25.857對(duì)應(yīng)的 P＜0.05，回歸方程顯著成立。由回歸方程模型分析可知，二次發(fā)酵結(jié)束后的木聚糖酶酶活、羧甲基纖維素酶活、纖維素含量對(duì)雙孢蘑菇產(chǎn)量有密切影響，木聚糖酶酶活、羧甲基纖維素酶活與雙孢蘑菇產(chǎn)量存在正的線性關(guān)系，纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)與雙孢蘑菇產(chǎn)量存在負(fù)的線性關(guān)系。將剩下的 1批樣品CMC酶活2.25 U/mmol、纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)13.66%、木聚糖酶酶活 13.21 U/mmol帶入計(jì)算單位面積產(chǎn)量為25.10 kg/m2，與實(shí)際產(chǎn)量26.42 kg/m2相差不大，相對(duì)誤差絕對(duì)值不到5%，說明回歸方程的預(yù)測效果較好。

3 討 論

在實(shí)際生產(chǎn)過程中，各個(gè)階段培養(yǎng)料的理化性質(zhì)是蘑菇種植者判斷其優(yōu)劣的重要依據(jù)[35]。本研究采取10批不同原料通過二次發(fā)酵制造雙孢磨菇培養(yǎng)料，在所測的各理化性質(zhì)中，聚類分析的EC值、氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的分類與主成分分析一致，二者在主成分分析中貢獻(xiàn)率達(dá)18.34%，為二次發(fā)酵料中的重要檢測指標(biāo)。微生物經(jīng)過發(fā)酵作用將培養(yǎng)料中的氮源轉(zhuǎn)化，供雙孢蘑菇菌絲生長，氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的高低都會(huì)影響子實(shí)體的質(zhì)量和產(chǎn)量，而EC值的大小影響菌絲對(duì)鹽離子的吸收。聚類分析中pH值也占據(jù)重要的一類，是影響雙孢蘑菇產(chǎn)量的關(guān)鍵因素。pH值的高低影響堆肥中微生物和雙孢蘑菇菌絲的生長，大多數(shù)微生物最適宜生長的環(huán)境為中性或弱堿性，二次發(fā)酵后物料pH值在7.2～7.7，培養(yǎng)料內(nèi)菌絲發(fā)滿后pH值在6.2～6.6時(shí)最適宜雙孢菇菌絲的生長[36]。本試驗(yàn)10批料pH值在7.39～8.16范圍，EC值在2.05～3.37之間，氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)在1.88～2.08%，堆肥質(zhì)量符合雙孢蘑菇的生長要求。

堆肥中酶的活性影響纖維素、半纖維素的降解[37]，這些大分子物質(zhì)必須經(jīng)相應(yīng)的酶分解成葡萄糖、果糖等單糖類和小分子化合物后才能被吸收利用，為雙孢蘑菇生長提供所需的碳源。有研究發(fā)現(xiàn)纖維素、半纖維素降解與酶活性變化有關(guān)，酶活性高降解速率就快，酶活性低降解速率就慢[38-39]。但關(guān)于酶活作為培養(yǎng)料指標(biāo)的重要性和占有的份量少有報(bào)道。本研究表明，對(duì)纖維素降解起作用的 CMC、α-纖維二糖酶和分解少量半纖維素的木糖苷酶在主成分分析中貢獻(xiàn)率為18.45%，對(duì)降解半纖維素中起主要作用的木聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶與含水率、pH在主成分分析中貢獻(xiàn)率為16.08%。因此，酶活可作為二次發(fā)酵料質(zhì)量重要的檢測指標(biāo)。

碳水化合物是蘑菇利用的主要營養(yǎng)物質(zhì)。本研究的聚類分析中，纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、半纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)與碳質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳氮比以及少量纖維素降解酶歸為一類，在主成分分析中纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、半纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳氮比作為主成分1貢獻(xiàn)率達(dá)31.176%，足以說明其重要性。

含水率的多少影響發(fā)酵微生物的活力，進(jìn)而影響酶的活性。發(fā)酵成熟后，培養(yǎng)料的含水率應(yīng)達(dá)到 67～70%[40]，在63.5%時(shí)，嗜熱微生物量最多，含水率的增加或降低都會(huì)使其減少[41]。本研究中主成分 4主要是含水率、木聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、pH值，貢獻(xiàn)率為16.08%，聚類分析也將含水率、木聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶歸為一類，均說明含水率的重要性以及與降解半纖維素的密切關(guān)系。

主成分和聚類 2種分類方式的結(jié)果中也存在不同的部分。在與碳水化合物變化有關(guān)的分類上，主成分分析的結(jié)果中含有纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、半纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳氮比，聚類分析分類結(jié)果中除了這 4個(gè)指標(biāo)外還有CMC、α-纖維二糖酶等少量酶；主成分分析的主成分4中包括含水率、木聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、pH值，而聚類分析將含水率、木聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶分為一類，將pH值單獨(dú)分為一類。2種分類方式運(yùn)算方式不同造成了分類結(jié)果的不完全相同。主成分分析將變量通過線性變換轉(zhuǎn)換為兩兩不相關(guān)的變量，方差最大的一組線性組合稱為第 1主成分，次大的一組稱為第 2主成分，依次類推。各主成分的貢獻(xiàn)率反應(yīng)了原始數(shù)據(jù)的信息量占全部信息量的比例，分析結(jié)果較客觀、合理。但要保證提取的主成分累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到較高水平。聚類分析是按照選定的方法計(jì)算每兩類之間的聚類統(tǒng)計(jì)量，將關(guān)系最為密切的兩類合為一類，再與最相似的變量或小類合并，有時(shí)實(shí)踐中會(huì)發(fā)現(xiàn)他們?cè)跀?shù)據(jù)中有緊密的關(guān)系，但事物之間卻無任何內(nèi)在聯(lián)系。聚類分析本身卻無法識(shí)別這類錯(cuò)誤。聚類分析的結(jié)果直觀簡明，適合對(duì)樣本的簡單分類；主成分分析適用于對(duì)目標(biāo)降維，便于數(shù)據(jù)的進(jìn)一步觀察和處理。在本研究中，主成分分析的結(jié)果更為可信。

單位面積產(chǎn)量與二次發(fā)酵料的13個(gè)指標(biāo)進(jìn)行多元回歸分析的結(jié)果表明：羧甲基纖維素酶活、木聚糖酶酶活與雙孢蘑菇產(chǎn)量存在正線性關(guān)系，纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)與雙孢蘑菇產(chǎn)量存在負(fù)線性關(guān)系。纖維素、半纖維素被降解成可供菌絲生長利用的小分子物質(zhì)，與雙孢蘑菇子實(shí)體的生長及產(chǎn)量有密切的關(guān)系。實(shí)際生產(chǎn)中可以采用測定羧甲基纖維素酶活、木聚糖酶酶活和纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)來評(píng)價(jià)發(fā)酵料的質(zhì)量，并預(yù)測產(chǎn)量。

4 結(jié) 論

1）通過主成分分析在二次發(fā)酵料的 13個(gè)指標(biāo)中提取出 4個(gè)主成分，貢獻(xiàn)率分別為 31.176%、18.45%、18.34%、16.08%，累積貢獻(xiàn)率達(dá)84.04%，可代表原始因子所代表的大部分信息。4個(gè)主成分可分為：碳水化合物因子；主要的纖維素降解酶類；EC值、氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)；主要的半纖維素降解酶類。其結(jié)果客觀合理，更為可信。

2）聚類分析在距離臨界值取18時(shí)將13個(gè)指標(biāo)聚為4類：碳水化合物變化因子；EC值、氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)；半纖維素降解酶類；pH值。其分類結(jié)果與主成分分析結(jié)果不完全相同但都將纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、半纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳氮比以及少量纖維素降解酶等碳水化合物因子歸為一類。

3）利用多元回歸分析建立二次發(fā)酵培養(yǎng)料指標(biāo)與單位面積產(chǎn)量的關(guān)系式，單位面積產(chǎn)量與CMC酶活和木聚糖酶酶活呈正線性關(guān)系，與纖維素含量呈負(fù)線性關(guān)系（回歸模型R=0.969，P＜0.05），擬合效果較好，驗(yàn)證相對(duì)誤差絕對(duì)值＜5%。實(shí)際生產(chǎn)中可以采用測定二次發(fā)酵培養(yǎng)料的羧甲基纖維素酶活、木聚糖酶酶活和纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)來預(yù)測雙孢蘑菇可能的產(chǎn)量。