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        鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中的物理化學(xué)變化

        2019-05-05 06:56:50唐淑瑋高瑞昌曾名湧馮秋鳳陳依萍趙元暉
        食品科學(xué) 2019年7期
        關(guān)鍵詞:鹽溶魚糜肌球蛋白

        唐淑瑋,高瑞昌,曾名湧,馮秋鳳,陳依萍,趙元暉,*

        (1.中國(guó)海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,山東 青島 266003;2.江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,江蘇 鎮(zhèn)江 212013)

        魚糜是水產(chǎn)品精深加工制品,是一類低脂肪、高蛋白、低膽固醇的營(yíng)養(yǎng)健康的食品,是我國(guó)傳統(tǒng)的水產(chǎn)食品,深受消費(fèi)者喜愛[1]。近年來(lái)魚糜制品發(fā)展迅速,需求量快速增長(zhǎng)[2],但是用于加工魚糜的海水魚因?yàn)檫^(guò)度捕撈和環(huán)境污染等問(wèn)題,品種和數(shù)量都在急劇減少。海水魚原料供應(yīng)不足正逐漸成為限制魚糜加工發(fā)展的重要因素之一[3],而來(lái)源豐富的淡水魚可以緩解原料不足的問(wèn)題。袁凱等[4]以白鰱魚糜為原料,研究了其在加工過(guò)程中蛋白質(zhì)氧化規(guī)律。米紅波等[5]以草魚魚糜為原料研究了6-姜酚對(duì)草魚魚糜的影響。張文婷等[6]以羅非魚為原料研究了三聚磷酸鹽對(duì)羅非魚魚糜抗凍性的影響。何進(jìn)武等[7]以鯉魚為原料研究了糖基化大豆分離蛋白對(duì)鯉魚魚糜凝膠和乳化特性的影響。

        有“活化石”之稱的鱘魚是一種大中型淡水魚,我國(guó)鱘魚養(yǎng)殖量目前已經(jīng)達(dá)到世界鱘魚養(yǎng)殖總量的85%[8],2018年《中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒》記載,2017年鱘魚全國(guó)產(chǎn)量為83 058 t[9]。如今我國(guó)鱘魚養(yǎng)殖產(chǎn)量已成為世界第一[10],但是后期運(yùn)輸、加工還無(wú)法滿足日益增長(zhǎng)的市場(chǎng)需求[11]。目前,鱘魚加工主要集中在鱘魚魚籽醬,其次是鱘魚魚肉產(chǎn)品,如速凍鱘魚片、液熏產(chǎn)品等[12],以鱘魚為原料制備魚糜的研究鮮有報(bào)道。鱘魚魚肉營(yíng)養(yǎng)豐富,蛋白質(zhì)含量較高,富含多種必需氨基酸[13];另外,鱘魚體型較大,無(wú)肌間刺,肉含量較多,這些條件均使鱘魚適于加工成魚糜。鱘魚魚糜的加工不僅可以使鱘魚魚肉得到充分利用,還可以增加鱘魚加工產(chǎn)品的種類,使鱘魚加工產(chǎn)業(yè)鏈更加完善。

        鱘魚等淡水魚雖可以滿足魚糜凝膠的加工要求,但是淡水魚本身存在的一些問(wèn)題限制了其加工業(yè)的發(fā)展。淡水魚體內(nèi)存在內(nèi)源蛋白酶容易被激活導(dǎo)致凝膠劣化,同時(shí)其本身存在強(qiáng)烈的土腥味,影響產(chǎn)品的口感。對(duì)于淡水魚加工存在的問(wèn)題國(guó)內(nèi)已有不少報(bào)道。吳潤(rùn)鋒等[14]發(fā)現(xiàn)漂洗后四大家魚魚糜的質(zhì)量均得到了顯著改善,其凝膠強(qiáng)度、折疊柔韌性、持水性以及白度值均顯著上升,并且組織蛋白酶H幾乎被完全去除。馬瑤蘭等[15]研究了斬拌方式對(duì)白鰱魚糜凝膠品質(zhì)的影響,證明真空斬拌后魚糜凝膠品質(zhì)明顯高于常壓斬拌。張曉棟等[16]研究了漂洗、擂潰、凝膠化處理對(duì)羅非魚魚糜制品凝膠性的影響,結(jié)果證明漂洗次數(shù)、鹽擂時(shí)間和第1段加熱溫度是影響羅非魚魚糜凝膠性的主要因素。

        本研究以鱘魚為原料,制備鱘魚魚糜凝膠,選擇鱘魚魚肉、漂洗魚糜、擂潰魚糜、魚糜凝膠進(jìn)行蛋白質(zhì)含量、水分分布、流變實(shí)驗(yàn)等指標(biāo)的分析,研究鱘魚魚糜凝膠在形成過(guò)程中的理化指標(biāo)變化,為進(jìn)一步提高鱘魚魚糜凝膠的品質(zhì)提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        鱘魚為施氏鱘和西伯利亞鱘雜交,購(gòu)買于青島市城陽(yáng)區(qū),體質(zhì)量1.5~2.0 kg,活體運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。

        食鹽、山梨醇、三聚磷酸鈉(均為食品級(jí)) 青島金貝歐公司;氯化鉀、硫酸銅、酒石酸鉀鈉、氫氧化鈉、溴化鉀、考馬斯亮藍(lán)R-250(均為分析純) 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;Tris(分析純) 美國(guó)Sigma公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        TJ12-H絞肉機(jī) 廣東恒聯(lián)食品機(jī)械有限公司;SY-5型擂潰機(jī) 廣州市善友機(jī)械設(shè)備有限公司;CV-600恒溫水浴鍋 上海福馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;BD-126W冰箱青島海爾電器集團(tuán);LG10-3A冷凍離心機(jī) 北京醫(yī)用離心機(jī)廠;FJ-200高速均質(zhì)機(jī) 上海標(biāo)本模型廠;核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)成像分析儀上海紐邁電子科技有限公司;JD500-2型電子天平 沈陽(yáng)龍騰電子稱量?jī)x器有限公司;202型電熱恒溫干燥箱天津市泰斯特儀器有限公司;MCR-101流變儀 德國(guó)Anton-Par公司;SCIENTZ-10ND冷凍干燥機(jī) 寧波新芝生物科技股份有限公司。

        1.3 方法

        1.3.1 鱘魚魚糜凝膠的制備

        原料魚→前處理(去頭、內(nèi)臟、皮、軟骨)→清洗→采肉→漂洗(清水漂洗1 次、食鹽水漂洗1 次(鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.25%),漂洗時(shí)間各1 min)→脫水(保證水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)在80%以下)→添加抗凍劑(質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.25%三聚磷酸鈉、4%山梨醇),混合→凍藏→半解凍(4 ℃放置24 h)→擂潰(先空擂2 min,再加質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%食鹽擂潰2 min,擂潰期間加少量的冰控制溫度)→灌腸(手工灌腸)→90 ℃水浴30 min→冰水冷卻10 min→魚糜凝膠樣品(4 ℃放置過(guò)夜后測(cè)定指標(biāo))

        選擇鱘魚魚肉、漂洗魚糜、擂潰魚糜、魚糜凝膠進(jìn)行以下指標(biāo)測(cè)定,分析鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中理化指標(biāo)的變化。

        1.3.2 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中粗蛋白質(zhì)量濃度的測(cè)定

        粗蛋白質(zhì)量濃度采用GB/T 6432—1994《飼料中粗蛋白測(cè)定方法》中微量凱氏定氮法測(cè)定。

        1.3.3 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中鹽溶性蛋白、水溶性蛋白比例的測(cè)定

        鹽溶性蛋白、水溶性蛋白質(zhì)量濃度的測(cè)定參考Sun Bowen等[17]的方法并略作修改。取10 g樣品,加入100 mL冷的去離子水,均質(zhì)2 min,在4 ℃下攪拌30 min。勻漿液在4 ℃冷凍離心機(jī)中10 000 r/min離心15 min,收集上清液。沉淀中加入100 mL Tris-HCl緩沖液(50 mmol/L KCl溶液、20 mmol/L Tris-HCl溶液,pH 7.0)均質(zhì)2 min,4 ℃下攪拌30 min,勻漿液在4 ℃冷凍離心機(jī)中10 000 r/min離心15 min。兩次上清液混合為水溶性蛋白溶液。沉淀加入100 mL Tris-HCl緩沖液(0.6 mol/L KCl溶液、20 mmol/L Tris-HCl溶液,pH 7.0)均質(zhì)2 min,4 ℃下攪拌60 min,勻漿液在4 ℃冷凍離心機(jī)中10 000 r/min離心15 min,上清液為鹽溶性蛋白溶液。采用雙縮脲法[18]測(cè)定蛋白質(zhì)量濃度,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.022 9x+0.002 9(R2=0.997 8),式中:x為蛋白質(zhì)量濃度/(mg/mL);y為吸光度。以鹽溶性蛋白、水溶性蛋白與粗蛋白質(zhì)量濃度的比值表示其占粗蛋白的比例。

        1.3.4 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中水分分布的變化

        參考文獻(xiàn)[19]并略作修改。NMR自旋-自旋弛豫時(shí)間(T2)測(cè)定條件為:質(zhì)子共振頻率為22.6 MHz,測(cè)定溫度為32 ℃。取少許樣品放入15 mm NMR管。T2選用CPMG序列進(jìn)行測(cè)定。τ值(90°脈沖和180°脈沖之間的時(shí)間)為100 μs。重復(fù)掃描得到穩(wěn)定曲線。對(duì)CPMG序列測(cè)定所得指數(shù)衰減曲線用儀器自帶的反演軟件進(jìn)行反演,反演結(jié)果包括T2對(duì)應(yīng)的峰面積及峰寬度。

        1.3.5 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中傅里葉變換紅外光譜分析

        參考文獻(xiàn)[20]的方法,取1~2 mg冷凍干燥后的樣品與20~30 mg溴化鉀晶體置于瑪瑙研缽,在紅外燈下研磨成細(xì)粉,用壓片機(jī)壓成薄片。放入傅里葉變換紅外光譜儀中測(cè)試其在4 000~400 cm-1范圍內(nèi)的吸收光譜,測(cè)試在氮?dú)獗Wo(hù)下進(jìn)行。

        1.3.6 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中的流變特性分析

        1.3.6.1 頻率掃描

        參考文獻(xiàn)[21]的方法,將樣品放在流變儀平臺(tái)上,用硅油密封。選擇PP50轉(zhuǎn)子,設(shè)定轉(zhuǎn)子與平臺(tái)間距為1.0 mm,頻率范圍為0.1~20.0 Hz,實(shí)驗(yàn)溫度為25 ℃,測(cè)定隨振蕩頻率提高,樣品的儲(chǔ)能模量(G′)和損耗模量(G′′)曲線。

        1.3.6.2 蠕變實(shí)驗(yàn)

        將樣品放在流變儀的平臺(tái)上,用硅油密封。選擇PP50轉(zhuǎn)子,設(shè)定轉(zhuǎn)子與平臺(tái)間距為1.0 mm。在25 ℃下測(cè)定樣品應(yīng)變(γ)隨時(shí)間的變化。

        1.3.7 十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析

        參考Laemmli[22]的方法并略作修改。利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfatepolyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)測(cè)定蛋白質(zhì)分子片段的變化。采用Tris-Gly-SDS緩沖液,分離膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12%,濃縮膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%。電泳結(jié)束之后,采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%考馬斯亮藍(lán)R-250溶液對(duì)膠塊進(jìn)行染色,醋酸-乙醇溶液進(jìn)行脫色。分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)Marker選用17~190 kDa。以電泳條帶灰度表示蛋白相對(duì)含量。

        1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

        采用SPSS軟件單因素方差分析和Duncan多范圍檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)顯著性,P<0.05表示差異顯著。采用Origin 2016軟件作圖。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中蛋白組成的變化

        魚類肌肉蛋白質(zhì)按其溶解性可分為水溶性蛋白質(zhì)、鹽溶性蛋白質(zhì)和不溶性蛋白質(zhì);魚肉中的水溶性蛋白主要是肌漿蛋白,包括肌酸激酶、肌紅蛋白等水溶性物質(zhì)[23];而鹽溶性蛋白主要為肌原纖維蛋白,包括肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白等,鹽溶性蛋白是形成魚糜凝膠的主要蛋白質(zhì)。

        圖1 魚糜凝膠形成過(guò)程中蛋白質(zhì)組成的變化Fig. 1 Changes in protein composition during the formation of surimi gel

        通過(guò)測(cè)定魚肉、漂洗魚糜、擂潰魚糜、魚糜凝膠中的粗蛋白、鹽溶性蛋白、水溶性蛋白質(zhì)量濃度,重點(diǎn)考察了魚糜凝膠形成過(guò)程中漂洗、擂潰、高溫凝膠化3 個(gè)關(guān)鍵步驟中蛋白質(zhì)組成的變化。從圖1可以看出,漂洗時(shí)由于魚肉中水溶性蛋白的溶出,一些不溶性物質(zhì)(脂質(zhì)、腥味物質(zhì)、色素以及被稱為變性促進(jìn)因子的無(wú)機(jī)離子)被去除[24],從而使魚肉中水溶性蛋白、不溶性蛋白所占比例明顯減少,鹽溶性蛋白所占比例增大,有利于魚糜蛋白的凝膠化。擂潰后,魚糜混合物中的鹽溶性蛋白比例大幅降低,而不溶性蛋白比例明顯增加。這是因?yàn)槠春蟮聂~糜通過(guò)擂潰,其肌纖維組織被破壞;通過(guò)加鹽,魚糜鹽溶性蛋白溶出并相互作用,肌球蛋白與肌動(dòng)蛋白吸收水分并且相互結(jié)合形成溶膠。在凝膠化過(guò)程中,鹽溶性蛋白比例大幅下降,而不溶性蛋白比例最大,說(shuō)明不溶性蛋白可能是加熱凝膠化過(guò)程中形成的新的蛋白,是形成富有彈性凝膠體的主要組成部分。

        2.2 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中水分分布的變化

        T2反映了樣品內(nèi)部氫質(zhì)子的化學(xué)環(huán)境,與氫質(zhì)子的自由度以及它所受到的束縛力有關(guān)。氫質(zhì)子自由度越小,所受束縛力越大,T2越短,在T2分布圖上位置越靠左;反之,T2越長(zhǎng),在T2分布圖上位置越靠右。從圖2可以看出,魚肉、漂洗魚糜、魚糜凝膠的T2分為4 個(gè)區(qū)間:T21(0.1~3.0 ms)、T22(3.0~20.0 ms)、T23(20~200 ms)和T24(200 ms以上),分別表征著魚糜中不同狀態(tài)的水。T21和T22為最難移動(dòng)的水,即結(jié)合水;T23代表由于凝膠網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)而滯留的部分水,即不易流動(dòng)水;T24為可以自由遷移的水,即自由水。但是擂潰魚糜只有3 個(gè)區(qū)間:T21、T22和T23,沒(méi)有T24,出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是:擂潰時(shí)通過(guò)攪拌和研磨作用,使魚肉肌纖維組織被破壞,魚肉蛋白質(zhì)溶出形成空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),而網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)可以有效地束縛住水分;另外,鹽的加入可以消耗魚糜中作為溶劑的自由水,因此擂潰魚糜沒(méi)有T24區(qū)間。

        圖2 魚糜凝膠加工過(guò)程中T2的分布變化Fig. 2 Changes in T2 distribution during the processing of surimi gel

        表1 魚糜凝膠加工過(guò)程中水分相對(duì)含量以及T2的變化Table 1 Changes in relative moisture content and T2 relaxation time during the processing of surimi gel

        不同的T2積分面積占總積分面積的比例可以表示各個(gè)區(qū)間氫質(zhì)子的相對(duì)含量[25]。從表1可以看出,相對(duì)于魚肉,漂洗魚糜、擂潰魚糜、魚糜凝膠的結(jié)合水相對(duì)含量(P21和P22)均升高,其中擂潰魚糜中的結(jié)合水最多。與魚糜凝膠相比,魚肉和漂洗魚糜的不易流動(dòng)水(P23)和自由水(P24)的相對(duì)含量增加。T2表征的是不同狀態(tài)水分的流動(dòng)性。T2越長(zhǎng),水的流動(dòng)性越強(qiáng);T2越短,水的流動(dòng)性越差。從表1可以看出,從魚肉到擂潰魚糜T23逐漸變短,說(shuō)明經(jīng)過(guò)漂洗、擂潰處理,魚糜中不易流動(dòng)水受到的束縛力增強(qiáng),自由度變小,流動(dòng)性變差。而自由水和結(jié)合水并無(wú)明顯規(guī)律。

        2.3 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中傅里葉變換紅外光譜分析

        傅里葉變換紅外光譜可以反映蛋白質(zhì)酰胺I帶和酰胺II帶的特征吸收峰,也可以分析表面物質(zhì)結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成。

        從圖3中可以看出,魚肉、漂洗魚糜、擂潰魚糜、魚糜凝膠在1 100 cm-1附近的吸收峰發(fā)生了紅移。Huang Yuting等[26]的研究表明,3 300 cm-1附近的吸收峰主要反映N—H振動(dòng)。從圖3中可以看出,相較于魚肉和漂洗魚糜,擂潰魚糜的吸收峰明顯增強(qiáng)。說(shuō)明擂潰時(shí)有大量的鹽溶性蛋白溶出,導(dǎo)致體系中的N—H增多。同時(shí)擂潰魚糜在1 650 cm-1和1 540 cm-1附近也具有較強(qiáng)的吸收,這是由于擂潰后魚糜體系中—OH和C—O增多。

        圖3 魚糜凝膠形成過(guò)程中傅里葉變換紅外光譜分析Fig. 3 Change in Fouriertransform infrared spectrum during the formation of surimi gel

        2.4 鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中的流變特性分析

        2.4.1 頻率掃描

        頻率掃描是動(dòng)態(tài)測(cè)試,測(cè)定材料隨頻率的響應(yīng)。當(dāng)G′遠(yuǎn)大于G′′時(shí),材料展現(xiàn)出理想彈性體虎克模型的性質(zhì);反之,材料展現(xiàn)出理想黏性體牛頓模型的性質(zhì)[27]。在流變學(xué)中,G′也稱彈性模量,反映著蛋白凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的形成情況,是樣品的彈性特征;與之相對(duì)應(yīng)的G′′也稱黏性模量,是樣品的黏性特征。一般用損耗角正切(tanδ),即G′′與G′的比值來(lái)表征體系的黏彈性;tanδ<1表明體系趨于固體特性,彈性成分占優(yōu)勢(shì);tanδ>1表明體系趨于流體特性,黏性成分占優(yōu)勢(shì)[28]。

        圖4 魚糜凝膠形成過(guò)程中G′(A)、G”(B)、tan δ(C)的變化Fig. 4 Changes in G′ (A), G” (B) and tan δ (C) during the formation of surimi gel

        從圖4A、B中可以看出,在線性區(qū)間內(nèi),所有樣品的G′′均小于G′,從數(shù)值上可以反映出魚肉、漂洗魚糜、擂潰魚糜、魚糜凝膠的彈性特征;G′、G′′均隨振蕩頻率的增大而增加,而且基本保持平穩(wěn),從結(jié)構(gòu)力學(xué)角度表征了4 個(gè)樣品對(duì)振蕩頻率的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。從圖4C中可以看出,4 個(gè)樣品的tanδ均小于1,表明4 個(gè)樣品均趨于固體特性,彈性成分占優(yōu)勢(shì)。而相較于其他3 個(gè)樣品,魚肉的tanδ較高,說(shuō)明魚肉的黏彈性較低,其內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)交聯(lián)度較低,穩(wěn)定較差??傮w來(lái)說(shuō),鱘魚魚肉本身具有較小的黏彈性,但是經(jīng)過(guò)漂洗、擂潰、加熱凝膠化處理后,魚糜的彈性增高,加工后的魚糜更趨向于一個(gè)黏彈性體。

        2.4.2 蠕變實(shí)驗(yàn)

        蠕變也稱潛變,是恒定溫度下材料在應(yīng)力作用下緩慢發(fā)生形變或者位移的現(xiàn)象。在流變學(xué)實(shí)驗(yàn)中,蠕變實(shí)驗(yàn)顯示的是材料的應(yīng)變?cè)诘陀诓牧锨?qiáng)度的應(yīng)力作用下隨時(shí)間延長(zhǎng)而變化的現(xiàn)象。除去應(yīng)力后形變或者應(yīng)變隨著時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸恢復(fù)的現(xiàn)象稱為蠕變回復(fù)。當(dāng)應(yīng)力取消后,具有蠕變特性的材料形變或者應(yīng)變也不立即恢復(fù),而是隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸恢復(fù)。蠕變大小反映了材料的穩(wěn)定性和長(zhǎng)期負(fù)載能力。一般來(lái)說(shuō),黏彈性材料的蠕變形變或者應(yīng)變有3 個(gè)階段:第1個(gè)階段是開始普彈形變,即在應(yīng)力作用下在很短時(shí)間內(nèi)發(fā)生彈性形變或者應(yīng)變;第2個(gè)階段是蠕變階段,這個(gè)階段是在應(yīng)力不變的情況下應(yīng)變速率不斷發(fā)生變化;第3個(gè)階段是撤銷外力后的恢復(fù)階段[29]。

        圖5 魚糜凝膠形成過(guò)程中的蠕變特性Fig. 5 Change in creep characteristics during the formation of surimi gel

        從圖5可以看出,魚肉、漂洗魚糜、擂潰魚糜、魚糜凝膠均具有蠕變特性,符合蠕變的3 個(gè)階段。在施加應(yīng)力作用的瞬間(t=0),樣品分子的鍵長(zhǎng)及鍵角立即產(chǎn)生形變,分子鏈之間發(fā)生質(zhì)心位移,樣品的應(yīng)變均迅速增加;隨著施加應(yīng)力時(shí)間的延長(zhǎng),樣品逐漸達(dá)到另一個(gè)穩(wěn)態(tài),結(jié)構(gòu)形變逐漸減小并趨于平緩;當(dāng)應(yīng)力作用時(shí)間為t=160 s時(shí),應(yīng)變?cè)黾臃戎饾u減?。划?dāng)外力在t=160 s撤去時(shí),分子鍵長(zhǎng)及鍵角立即恢復(fù),樣品的應(yīng)變呈直線下降趨勢(shì),魚肉和漂洗魚糜的下降幅度較小。由于樣品分子鏈間的質(zhì)心位移是永久的,造成一部分形變不能恢復(fù)到起始狀態(tài),因此當(dāng)t=300 s時(shí),樣品仍有形變未恢復(fù)??傮w來(lái)說(shuō),根據(jù)蠕變實(shí)驗(yàn)可以看出,4 個(gè)樣品均滿足黏彈性材料的特征,這與頻率掃描結(jié)果相同。4 個(gè)樣品的彈性排序?yàn)椋呼~糜凝膠>擂潰魚糜>漂洗魚糜>魚肉。

        2.5 SDS-PAGE分析結(jié)果

        肌動(dòng)蛋白(分子質(zhì)量43 kDa)和肌球蛋白是形成魚糜凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的最主要的蛋白質(zhì),而肌球蛋白重鏈(分子質(zhì)量200 kDa)是肌球蛋白分子中參與凝膠的最重要的部分[30]。從圖6可以看出,肌球蛋白重鏈和肌動(dòng)蛋白均有變化。SDS-PAGE圖譜顯示,鹽擂后肌球蛋白重鏈和肌動(dòng)蛋白含量均明顯下降,而加熱成魚糜凝膠后,肌球蛋白重鏈含量進(jìn)一步下降,肌動(dòng)蛋白含量變化不明顯。肌球蛋白重鏈含量的減少可以說(shuō)明肌球蛋白重鏈通過(guò)分子之間的共價(jià)鍵交聯(lián)形成了不溶性蛋白,這也說(shuō)明了不溶性蛋白在魚糜凝膠加工過(guò)程中不斷增加的原因,這和蛋白質(zhì)組成變化的結(jié)果相同。

        圖6 魚糜凝膠形成過(guò)程中蛋白質(zhì)的SDS-PAGE圖譜Fig. 6 SDS-PAGE of protein profile changes during the formation of surimi gel

        3 結(jié) 論

        本實(shí)驗(yàn)通過(guò)蛋白組成、水分分布、傅里葉變換紅外光譜、流變特性分析以及SDS-PAGE分析,研究了鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中的物理化學(xué)變化。結(jié)果表明:在鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中,經(jīng)過(guò)漂洗后,鹽溶性蛋白比例上升,水溶性蛋白和不溶性蛋白比例下降,說(shuō)明在加工過(guò)程中漂洗可以去除水溶性蛋白及一些不溶性物質(zhì);擂潰和凝膠化后,鹽溶性蛋白和水溶性蛋白比例下降,不溶性蛋白比例上升。從整個(gè)加工過(guò)程中看,不溶性蛋白比例上升實(shí)際上是因?yàn)榧∏虻鞍字劓溚ㄟ^(guò)分子之間的共價(jià)鍵交聯(lián)形成了不溶性蛋白。在加工過(guò)程中,魚糜蛋白質(zhì)吸收峰在1 100 cm-1附近發(fā)生紅移,且擂潰魚糜在3 300 cm-1附近和1 650、1 540 cm-1附近的吸收振動(dòng)增強(qiáng)。鱘魚魚糜的T2有4 個(gè)區(qū)間,經(jīng)過(guò)漂洗、擂潰后,魚糜凝膠對(duì)水分的束縛力更強(qiáng),有利于形成致密的凝膠網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);而蠕變實(shí)驗(yàn)也證明魚糜凝膠具有致密的凝膠網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),因?yàn)樵诩庸み^(guò)程中魚糜樣品的彈性不斷增大。本研究初步探究了鱘魚魚糜凝膠形成過(guò)程中理化指標(biāo)的變化,了解魚糜凝膠在形成過(guò)程中發(fā)生的變化及存在問(wèn)題,為進(jìn)一步提高鱘魚魚糜的品質(zhì)以達(dá)到市面流通標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

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