曹霞

普洱市人民醫(yī)院檢驗科，云南普洱 665000

不規(guī)律的作息習(xí)慣、不健康的飲食結(jié)構(gòu)、惡化的生態(tài)環(huán)境等因素使得惡性腫瘤的發(fā)病率逐年上升，科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展也使得臨床對惡性腫瘤的檢出率不斷上升[1]。目前，惡性腫瘤已經(jīng)成為威脅人們身體健康的頭號殺手。白血病是一種常見的血液惡性腫瘤，本質(zhì)是造血干細(xì)胞的惡性增殖?；颊咧饕憩F(xiàn)為貧血、出血、感染等癥狀，其中出血較為普遍[2]。根據(jù)白血病的起病速度，分為急性和慢性兩類，其中急性早幼粒細(xì)胞白血病是一種相對特殊的類型[3]，患者表現(xiàn)為嚴(yán)重的出血，病情進(jìn)展十分迅速，患者早期死亡率極高[4]，因此需要對其進(jìn)行早期診斷和早期治療，只有這樣才能為患者的治療爭取寶貴的時間，救治患者的生命。研究顯示，PML-RARα融合基因可以作為急性早幼粒細(xì)胞白血病的標(biāo)志物[5]。該研究選取于2017年1月—2018年1月間于該院進(jìn)行診斷和治療的64例急性早幼粒細(xì)胞白血病患者和64例健康體檢者為研究對象，探究分析采用PML-RARα融合基因方法檢測急性早幼粒細(xì)胞白血病的準(zhǔn)確率，進(jìn)而指導(dǎo)臨床診斷。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院進(jìn)行診斷和治療的64例急性早幼粒細(xì)胞白血病患者和64名健康體檢者為研究對象。急性早幼粒細(xì)胞白血病患者中男性有41例，女性有23例；年齡在 9～54 歲之間，平均為（35.64±6.47）歲。健康體檢者中男性有40名，女性有24名；年齡在14～65歲之間，平均為（37.54±4.97）歲?；颊呔汛_診為急性早幼粒細(xì)胞白血病，且不含有任何伴發(fā)疾??；健康體檢者身體各項指標(biāo)均正常，無心腦血管疾病、肝腎功能障礙、語言障礙、精神異常以及惡性腫瘤等疾??；所有研究對象均自愿參與研究，且通過了倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.2 檢測方法

所有研究對象于晨起空腹取血樣，將2 mL靜脈血儲存于含有EDTA的抗凝試管中。取200 μL全血加入600 μLRNA提取液（試劑盒配套），充分震蕩混勻，-20℃保存，使用Trizol法提取RNA，并通過逆轉(zhuǎn)錄試劑盒制備相應(yīng)的cDNA，再進(jìn)一步采用qRT-PCR法對其進(jìn)行擴(kuò)增，檢測PML-RARα融合基因的表達(dá)情況。

1.3 評價指標(biāo)

對健康體檢者和患者血液中PML-RARα融合基因的陽性情況進(jìn)行檢測和記錄，同時評估患者治療前后PML-RARα融合基因的陽性情況。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析統(tǒng)計所得實驗數(shù)據(jù)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 健康體檢者和患者血液中PML-RARα融合基因的陽性情況

檢測兩組研究對象血樣中PML-RARα融合基因的陽性情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：健康體檢者的PML-RARα融合基因陽性率為0.00%，而白血病患者的陽性率為95.31%，則白血病患者中PML-RARα融合基因陽性率顯著高于健康體檢者（χ2=116.537 3，P＜0.05）。 見表1。

表1 健康體檢者和患者血液中PML-RARα融合基因的陽性情況

2.2 患者治療前后PML-RARα融合基因的變化情況

分析治療前后患者血樣中PML-RARα融合基因的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：治療前PML-RARα融合基因陽性率為95.31%，治療后為73.44%，則治療后PMLRARα融合基因的陽性率顯著降低 （χ2=11.614 8，P＜0.05）。 見表 2。

表2 患者治療前后PML-RARα融合基因的變化情況

3 討論

急性早幼粒細(xì)胞白血病起源于早幼粒細(xì)胞的病變，其發(fā)病的分子機(jī)制為早幼粒細(xì)胞中RARα基因于PML基因相互作用，最終形成PML-RARα融合基因，激活下游信號通路，阻斷造血干細(xì)胞的正常分化，誘發(fā)白血病的發(fā)生[6]。因此，PML-RARα融合基因可以作為急性早幼粒細(xì)胞白血病的標(biāo)志物[7]。早期臨床依據(jù)細(xì)胞形態(tài)和染色體檢查判斷急性早幼粒細(xì)胞白血病[8]，由于形態(tài)學(xué)變化特異性低，使得存在較多的漏診和誤診，延誤治療的黃金時期。

該研究探究分析了采用PML-RARα融合基因方法檢測急性早幼粒細(xì)胞白血病的準(zhǔn)確率，選取64例急性早幼粒細(xì)胞白血病患者和64例健康體檢者為研究對象，分別檢測其血液中PML-RARα融合基因的陽性情況，以及治療前后PML-RARα融合基因的表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：健康體檢者的PML-RARα融合基因陽性率為0.00%，而白血病患者的陽性率為95.31%，則白血病患者中PML-RARα融合基因陽性率顯著高于健康體檢者（χ2=116.537 3，P＜0.05）。 由此表明，PML-RARα融合基因是一種特異性的白血病標(biāo)志基因，通過檢測其表達(dá)可以判斷是否存在白血病。此外，該組患者治療前PML-RARα融合基因陽性率為95.31%，治療后為73.44%，則治療后PMLRARα融合基因的陽性率顯著降低 （χ2=11.614 8，P＜0.05）。由此表明，治療后PML-RARα融合基因強陽性和陽性患者數(shù)目均下降，總體陽性率降低，證明PML-RARα融合基因可以表征和預(yù)警白血病的嚴(yán)重程度，進(jìn)而判斷患者預(yù)后。盧艷等人[2]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)急性早幼粒細(xì)胞白血病患者的PML-RARα融合基因陽性率為93%，正常組PML-RARα融合基因均為陰性，這一結(jié)果與該研究所發(fā)現(xiàn)的結(jié)果一致。此外,治療后急性早幼粒細(xì)胞白血病組的PML-RARα融合基因陽性率顯著降低為87.5%。在該研究中，同樣發(fā)現(xiàn)治療后患者的PML-RARα融合基因陽性率降低，由此證明，PML-RARα融合基因檢測可以作為臨床診斷的標(biāo)記。

綜上所述，急性早幼粒細(xì)胞白血病患者的PMLRARα融合基因的陽性率較高，通過對PML-RARα融合基因的表達(dá)量進(jìn)行檢測可以用于臨床診斷急性早幼粒細(xì)胞白血病，同時PML-RARα融合基因表達(dá)的強弱能夠反應(yīng)病情的程度。因此，利用PML-RARα融合基因檢測對于急性早幼粒細(xì)胞白血病的診斷、病情把握、預(yù)后判斷具有重要的臨床意義。