周孝瓊，王華

龍巖學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，福建龍巖364012福建省生豬疫病防控工程技術(shù)研究中心，福建龍巖364012

吳巧玲，吳楚鈞，林起昊，陳智峰

(龍巖學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，福建 龍巖 364012)

楊小燕

龍巖學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，福建龍巖364012 福建省生豬疫病防控工程技術(shù)研究中心，福建龍巖364012

隨著生活水平的提高，人們?cè)絹?lái)越青睞具有益智、保健及美容功效的兔肉，由此養(yǎng)兔業(yè)迅速向規(guī)?；?、集約化方向發(fā)展，但同時(shí)也產(chǎn)生了細(xì)菌耐藥性、藥物殘留和環(huán)境污染等食品安全及公共衛(wèi)生問(wèn)題[1]。因此，研究開(kāi)發(fā)一種“綠色、安全、無(wú)抗生素”的添加產(chǎn)品已成為當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)關(guān)注的熱點(diǎn)。中草藥是我國(guó)獨(dú)特的醫(yī)藥資源，其以毒性低、副作用小、不易產(chǎn)生耐藥性的優(yōu)點(diǎn)逐漸受到起重視[2]。尤其是具有免疫調(diào)節(jié)作用的中草藥更是成為現(xiàn)代畜牧業(yè)研究的熱點(diǎn)，越來(lái)越多的單一中草藥或復(fù)方中草藥制劑被用于畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中。然而我國(guó)中草藥種類繁多，不同中草藥或復(fù)方制劑對(duì)畜禽生理功能產(chǎn)生的影響差異較大，且不同的加工方式及添加劑量也可直接影響作用效果[3]。因此，本研究根據(jù)中獸醫(yī)中藥君、臣、佐、使的組方原則，選配出具有“清熱解毒、軟堅(jiān)散結(jié)、健脾理氣、扶正固本”的復(fù)方中草藥制劑，經(jīng)過(guò)傳統(tǒng)水煎液飲水飼喂，探討其對(duì)家兔的免疫器官和生產(chǎn)性能的影響，旨在為新型復(fù)方中草藥制劑的研發(fā)及其在畜禽中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1)試驗(yàn)動(dòng)物 健康30日齡斷奶的伊拉兔，體重(0.50±0.05)kg，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)5d后用于試驗(yàn)。

2)中草藥 艾葉為安徽億源中藥飲片科技有限公司產(chǎn)品，批號(hào)20140901。葎草于2017年6月至9月采自福建省龍巖市東肖鎮(zhèn)田野，經(jīng)龍巖學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院植物學(xué)專家鑒定為?？迫劜輰俣嗄晟灾参锶劜?，切碎、烘干，備用。麥芽、陳皮和甘草購(gòu)置于福建龍巖百姓大藥房。

3)主要儀器 主要有旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀N-1300(東京理化器械株式會(huì)社產(chǎn)品)、電子分析天平BSA224S-CW(賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司產(chǎn)品)、電熱鼓風(fēng)干燥箱DGG-9240B(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司產(chǎn)品)、循環(huán)水真空泵、冰箱、恒溫電熱套、卷尺等設(shè)備。

1.2 方法

1.2.1 復(fù)方水煎液的制備

將艾葉、葎草、麥芽、陳皮、甘草按照一定比例混合，共計(jì)100g，經(jīng)蒸餾水浸泡0.5h，然后分別加10倍、8倍、6倍的蒸餾水煎煮3次，用4層紗布過(guò)濾，混合3次的濾液，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(55℃、負(fù)壓0.08Mpa條件下)濃縮至200mL，含生藥量為0.5g/mL，冰箱冷藏備用。

1.2.2 動(dòng)物試驗(yàn)及分組

30日齡斷奶伊拉配套系肉兔16只，單只籠養(yǎng)并使用全價(jià)配合飼料，適應(yīng)性飼養(yǎng)5d后稱重記錄，隨機(jī)分為4組，每組4只，設(shè)空白對(duì)照組(正常飼喂)和3個(gè)試驗(yàn)組。艾葉復(fù)方水煎液飲水飼喂，低劑量組9mL/(只·d)，中劑量組12mL/(只·d)，高劑量組15mL/(只·d)。每日18：00點(diǎn)定時(shí)加艾葉復(fù)方水煎液飲水,自由采食和飲水，每日早晚各加料1次，每次記錄加料量和觀察兔群健康及精神狀況。

1.2.3 樣品采集及處理

飼養(yǎng)20d后稱重并采用頸部放血方式處死，解剖，取胸腺、脾臟、小腸。胸腺、脾臟去除無(wú)關(guān)組織，濾紙吸干血液，稱重記錄，計(jì)算臟器指數(shù)(mg/g)=臟器重量(g)/體重(g)×1000；小腸用卷尺測(cè)量，記錄長(zhǎng)度。宰后2h內(nèi)，取4～7腰椎處背最長(zhǎng)肌約1.50cm×1.50cm×1.50cm肉樣，每兔取3塊，稱重記錄，置于冰箱中吊掛24h后稱重記錄，計(jì)算，貯存損失率=[(貯前肉樣重-貯后肉樣重)/貯前肉樣重]×100%。宰后2h內(nèi)，分離出右腿半膜肌，稱重記錄，將肉樣置放蒸鍋上，沸水蒸煮30min，取出晾干15min后稱取肉樣重，計(jì)算，熟肉率=(蒸后肉樣重/蒸前肉樣重)×100%[4]。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 19.0軟件的One-Way ANOVA法進(jìn)行方差分析，差異顯著后進(jìn)行Duncan氏多重比較，以P<0.01表示差異極顯著，P<0.05表示差異顯著，結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 艾葉復(fù)方對(duì)家兔免疫器官的影響

各組家兔的脾臟、胸腺重量及臟器指數(shù)的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可看出，隨著艾葉復(fù)方劑量的增加，脾臟、胸腺重量及其指數(shù)也相對(duì)增加。與對(duì)照組比較，高劑量組的脾臟、胸腺重量及其指數(shù)表現(xiàn)出極顯著差異(P<0.01)，低、中劑量組差異不顯著(P>0.05)。3個(gè)試驗(yàn)組之間比較，除了脾臟指數(shù)中、高劑量組間差異極顯著(P<0.01)外，其他差異均不顯著(P>0.05)。

表1 各組家兔的脾臟、胸腺重量及其臟器指數(shù)

注：同列肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。表2～4同。

2.2 艾葉復(fù)方對(duì)家兔小腸的影響

各組家兔小腸長(zhǎng)度及增長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn)，各組之間差異不顯著(P>0.05)，但隨著劑量的增加，小腸長(zhǎng)度均增加，低、中、高劑量組小腸與對(duì)照組比較分別增長(zhǎng)7.57%、9.34%、12.24%。

表2 各組家兔的小腸長(zhǎng)度及增長(zhǎng)

2.3 艾葉復(fù)方對(duì)家兔生長(zhǎng)性能的影響

各組家兔的生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可見(jiàn)，與對(duì)照組比較,各組的初重、末重、耗料量差異不顯著(P>0.05),高劑量組平均只增重差異極顯著(P<0.01)，低、中、高劑量組料重比差異極顯著(P<0.01)。3個(gè)試驗(yàn)組之間比較，低、中劑量組的平均只增重和料重比差異不顯著(P>0.05)，高劑量組與低、中劑量組比較差異極顯著(P<0.01)。

表3 各組家兔生長(zhǎng)性能指標(biāo)

2.4 艾葉復(fù)方對(duì)家兔肉品質(zhì)的影響

表4 各組家兔肉品質(zhì)指標(biāo)

艾葉復(fù)方對(duì)家兔肉品質(zhì)的影響見(jiàn)表4。由表4可見(jiàn)，與對(duì)照組比較，高劑量組的貯存損失率、熟肉率表現(xiàn)出顯著差異(P<0.01)；3個(gè)劑量組之間比較，高劑量組的貯存損失率差異極顯著(P<0.01)，低、中劑量組差異不顯著(P>0.05)。3個(gè)試驗(yàn)組之間熟肉率差異不顯著。

3 討論

3.1 艾葉復(fù)方對(duì)家兔免疫器官的影響

胸腺和脾臟是機(jī)體重要的免疫器官，是免疫細(xì)胞形成、分化及抗體形成的主要場(chǎng)所，其發(fā)育狀況直接影響機(jī)體免疫力，而臟器指數(shù)可在一定程度上反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱。胸腺的主要功能是產(chǎn)生T淋巴細(xì)胞和分泌胸腺素，主要參與細(xì)胞免疫；脾臟中有豐富的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，但B淋巴細(xì)胞比例較大，與體液免疫關(guān)系更為密切，其絕對(duì)重量和相對(duì)重量增加說(shuō)明機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫機(jī)能增強(qiáng)[5～7]。本研究結(jié)果表明，隨著艾葉復(fù)方劑量的增加，脾臟、胸腺質(zhì)量及其指數(shù)也相對(duì)增加，飲水中添加15mL/只的艾葉復(fù)方制劑可極顯著提高家兔的脾臟、胸腺重量及其臟器指數(shù)，說(shuō)明艾葉復(fù)方制劑能促進(jìn)家兔免疫器官的發(fā)育，有利于免疫機(jī)能的發(fā)揮，提高機(jī)體的免疫力。

3.2 艾葉復(fù)方制劑對(duì)家兔生產(chǎn)性能的影響

3.2.1 艾葉復(fù)方制劑對(duì)家兔腸道的影響

艾葉復(fù)方中，艾葉具有理氣血，逐寒濕，歸脾、肝、腎經(jīng)，為君藥。葎草清熱解毒、軟堅(jiān)散結(jié)、利水消腫，退虛熱，歸肺、腎經(jīng)，為臣藥。麥芽具有消食和中，歸脾、胃經(jīng)，主治草料停滯，肚腹脹滿，脾胃虛弱，食欲不振等；陳皮具有理氣健脾、調(diào)中、燥濕、化痰，歸脾、肺經(jīng)，為佐藥。甘草調(diào)和煮藥、引藥入經(jīng)、解百毒等，為使藥。此配方能進(jìn)一步增強(qiáng)艾葉驅(qū)邪扶正、扶正固本的功效。本研究結(jié)果表明，艾葉復(fù)方制劑試驗(yàn)組與對(duì)照組比較，小腸均有增長(zhǎng)作用，且高劑量組增長(zhǎng)12.24%，說(shuō)明艾葉復(fù)方制劑能增加營(yíng)養(yǎng)吸收面積及腸道免疫細(xì)胞數(shù)量，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，提高免疫力。

3.2.2 艾葉復(fù)方制劑對(duì)家兔肉品質(zhì)的影響

熟肉率和貯存損失率是衡量肉品質(zhì)的指標(biāo)，原料肉的品質(zhì)好壞，直接影響肉制品加工質(zhì)量和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[8]。熟肉率反映肉在加熱過(guò)程中的保水情況，熟肉率越高，肉在加熱過(guò)程中的系水力越強(qiáng)，質(zhì)量越好。貯存損失率的大小經(jīng)常用滴水損失來(lái)描述，貯存損失率低，會(huì)影響肌肉的風(fēng)味、多汁性、嫩度、顏色、加工與貯藏性能[4]。本研究結(jié)果表明，艾葉復(fù)方高劑量組貯存損失率最低，與其他組比較差異極顯著，說(shuō)明艾葉復(fù)方制劑能在某種程度上改善兔肉的品質(zhì)。