劉 偉， 文 華， 蔣 明， 吳建軍， 吳 凡， 田 娟， 陸 星，喻麗娟

(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水生物多樣性保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 武漢 430223；2.武漢新華揚(yáng)生物科技有限公司， 武漢 430074)

投飼技術(shù)是魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖成功與否的關(guān)鍵因素。投飼技術(shù)包括投喂率、投喂頻率、投喂節(jié)律和投喂地點(diǎn)等。其中，投喂率和投喂頻率對(duì)魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)和飼料利用效率影響最為顯著[1]。一般認(rèn)為，適宜的投喂頻率可以促進(jìn)魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)，降低魚(yú)類(lèi)個(gè)體分化，提高存活率和飼料利用率，減少殘餌和代謝廢物排放對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的污染[2]。適宜的投喂率在最大限度滿足魚(yú)類(lèi)正常生長(zhǎng)的同時(shí)也可以節(jié)約飼料成本[3]。同時(shí)，投喂率[4]和投喂頻率[5]也會(huì)對(duì)魚(yú)類(lèi)健康產(chǎn)生影響。因此，尋求最佳的投喂率和投喂頻率是水產(chǎn)養(yǎng)殖成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。

羅非魚(yú)是聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)向全世界推廣的優(yōu)良水產(chǎn)養(yǎng)殖對(duì)象。自2011年以來(lái)，我國(guó)的養(yǎng)殖產(chǎn)量一直穩(wěn)定在140萬(wàn)噸以上，位居世界首位。研究發(fā)現(xiàn)，羅非魚(yú)的投喂率或投喂頻率隨體重的增加而降低[6-8]。但是，受到實(shí)驗(yàn)環(huán)境、飼料質(zhì)量、養(yǎng)殖品種或品系等因素的影響，即使相同規(guī)格的羅非魚(yú)，其適宜投喂率或投喂頻率的研究結(jié)果差異明顯。如在封閉循環(huán)系統(tǒng)中養(yǎng)殖的初始體重60 g的奧利亞羅非魚(yú)(Oreochromiscoaureus)，其最適投喂率僅為2%[9]，而在水泥池網(wǎng)箱中養(yǎng)殖的初始體重72 g的吉富羅非魚(yú)(GIFT，Oreochromisniloticus)，其投喂率可達(dá)6.21%[10]。早期推薦適宜水溫下5～25 g的羅非魚(yú)，最佳投喂率為4%，最佳投喂頻率為4次/d[11]；但最近對(duì)體重5～16 g的吉富羅非魚(yú)的研究則發(fā)現(xiàn)，最佳投喂率為6%，最適投喂頻率為2次/d[7]。此外，有關(guān)投喂率和投喂頻率對(duì)羅非魚(yú)生理健康影響方面的研究報(bào)道也較少。吉富羅非魚(yú)是經(jīng)過(guò)遺傳性狀改良后的尼羅羅非魚(yú)，其生長(zhǎng)速度較其他品系快5%～20%[12]，是我國(guó)羅非魚(yú)養(yǎng)殖中主要養(yǎng)殖品系之一，其養(yǎng)殖面積曾占我國(guó)羅非魚(yú)養(yǎng)殖面積的60%以上[13]。因此，本研究以吉富羅非魚(yú)為研究對(duì)象，通過(guò)研究不同投喂率和投喂頻率對(duì)其生長(zhǎng)、飼料利用、體成分、肝臟組織學(xué)結(jié)構(gòu)和部分生理生化指標(biāo)的影響，探討投飼技術(shù)對(duì)羅非魚(yú)生長(zhǎng)和健康的影響，以期為羅非魚(yú)飼料的合理使用提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)飼料

以豆粕、菜粕、魚(yú)粉等為原料，配制成蛋白水平為33.5%，脂肪水平為6.9%的實(shí)用配方飼料(配方見(jiàn)表1)。將各種原料粉碎，過(guò)60目篩，按飼料配方稱(chēng)重后充分混勻，利用小型絞肉機(jī)制成直徑為2 mm 的成品飼料，自然風(fēng)干，破碎后，置于- 20℃冰箱中儲(chǔ)藏備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)魚(yú)

實(shí)驗(yàn)魚(yú)來(lái)源于湖北省羅非魚(yú)原良種場(chǎng)。運(yùn)回后，暫養(yǎng)在4個(gè)直徑1 m (有效容積400 L)的循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中，使實(shí)驗(yàn)魚(yú)恢復(fù)體質(zhì)，并適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境。暫養(yǎng)期間每天表觀飽食投喂2次(8∶30和16∶30)實(shí)驗(yàn)飼料。2周后，選擇規(guī)格整齊，表觀健康的720尾魚(yú)，隨機(jī)分養(yǎng)于24個(gè)循環(huán)水養(yǎng)殖桶中(有效容積100 L)，每桶放魚(yú)30尾。實(shí)驗(yàn)魚(yú)的平均體質(zhì)量(3.78±0.01) g。

1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和飼養(yǎng)管理

采用2×4雙因子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，共計(jì)8個(gè)處理組，每個(gè)處理組設(shè)置3個(gè)重復(fù)。依據(jù)資料[6，15-16]，本研究的投喂頻率(FF)設(shè)定為2次/d(8∶30和16∶30)和3次/d(8∶30，12∶30和16∶30)。在前期的馴養(yǎng)階段發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)魚(yú)采用表觀飽食投喂，每天投喂2次，每次投喂15 min，通過(guò)計(jì)算可得每日的投喂率(FR)約為10%。據(jù)此，投喂率設(shè)定為8%，10%，12%和表觀飽食投喂。在投喂過(guò)程中，根據(jù)投喂頻率，平均分配每次的投喂量，每次投喂30 min。實(shí)驗(yàn)持續(xù)30 d。每隔10 d稱(chēng)重1次，以每個(gè)處理的平均體質(zhì)量和成活率，并根據(jù)投喂率調(diào)整投喂量。養(yǎng)殖期間采用自然光照，水流2 L/(min·桶)，水溫(30.1±0.6) ℃，溶解氧>5 mg/L、氨氮濃度<0.5 mg/L、pH6.8～7.5。

表1 飼料配方及營(yíng)養(yǎng)組成Tab.1 Formulation and nutrient composition of the diet

1.4 樣品制備、分析和指標(biāo)計(jì)算

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始20 d后，在羅非魚(yú)排便高峰期的20∶00～21∶00，用密網(wǎng)撈取并挑選條狀成型、飽滿的糞便，放入培養(yǎng)皿中，在-40 ℃的冰箱中冷凍后，放入真空冷凍干燥機(jī)中，冷凍干燥72 h。取出，粉碎過(guò)45目篩，放入樣品袋中，于-40 ℃的冰箱中保存。每天收集糞便1次，直至收集的糞便足夠分析為止。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，禁食24 h，麻醉(MS-222，150 mg/L)后，對(duì)每桶實(shí)驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行計(jì)數(shù)和稱(chēng)體質(zhì)量。每桶隨機(jī)取魚(yú)3尾，測(cè)量體長(zhǎng)和體質(zhì)量，用于計(jì)算肥滿度；并于尾靜脈取血，混合后于4 ℃冰箱內(nèi)靜置2 h，以3 000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心15 min，得到空腹血清，保存于-80 ℃冰箱中，用于測(cè)定血清生化指標(biāo)；隨后取肝臟、內(nèi)臟并稱(chēng)重，用于計(jì)算肝體比、臟體比；取同一部位的部分肝臟，放于4%多聚甲醛溶液中，用于檢測(cè)肝臟組織結(jié)構(gòu)。去內(nèi)臟全魚(yú)、肝臟和內(nèi)臟分別保存于-20 ℃冰箱中，用于測(cè)定常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分。另每桶隨機(jī)撈魚(yú)3尾，取其背鰭以下側(cè)線以上的肌肉，保存于-20 ℃冰箱中，用于測(cè)定常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分。

測(cè)定方法：直接干燥法測(cè)定水分含量(GB/T 5009.3-2003)；凱氏定氮法測(cè)定粗蛋白質(zhì)含量(GB/T5009.5 - 2003)；索氏抽提法測(cè)定粗脂肪含量(GB/T 5009.6- 2003) ；灼燒稱(chēng)重法測(cè)定灰分含量(GB/T 5009.4- 2003)；電感耦合等離子質(zhì)譜法測(cè)定Y2O3含量(GB/T 18115.1)。

使用日本希森美康(CHEMIX -800)全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定8種血清生化指標(biāo)：總蛋白(TP)、球蛋白(ALB) 、堿性磷酸酶(ALP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、血糖(GLU)、甘油三酯(TGK) 和總膽固醇(TCHO)。

肝組織標(biāo)本固定后石蠟包埋，連續(xù)切片，HE染色，光鏡下逐片觀察及照片，運(yùn)用圖像分析軟件(Image Pro Plus 6.0)對(duì)HE染色結(jié)果進(jìn)行處理。每塊組織隨機(jī)選擇4張照片進(jìn)行分析。

其余各指標(biāo)的計(jì)算公式如下：

增重率 (WG)=(W1-W0)/W0×100%；

特定生長(zhǎng)率 (SGR)= (lnW1-lnW0)/t×100%；

飼料效率 (FE)= (Wf-Wi+Wd)/WA；

蛋白質(zhì)效率 (PER)= (Wf-Wi+Wd)×100% /Wp；

成活率 (SR)=Nf/Ni×100%；

肥滿度 (CF)=W/L3×100；

肝體比 (HSI)=WH/W×100%；

臟體比 (VSI)=WV/W×100%；

飼料成本 (FC)=WA×F/ (Wf-Wi+Wd)；

干物質(zhì)表觀消化率(AD)=100%×(1-Md/Mf)；

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(ADCd)=100%×[1-(Nf/Nd) ×(Md/Mf)]。

式中，t為實(shí)驗(yàn)天數(shù)(d)，W0和W1分別為實(shí)驗(yàn)魚(yú)的初、末均體質(zhì)量(g)，Wi、Wf和Wd、Wp分別為實(shí)驗(yàn)魚(yú)的初、末總體質(zhì)量(g)、死亡魚(yú)的體質(zhì)量(g)和攝入飼料粗蛋白含量(g)，W為魚(yú)體質(zhì)量(g)，L為魚(yú)體長(zhǎng)(cm)，WA為投喂飼料總質(zhì)量(g)，Ni和Nf分別為實(shí)驗(yàn)結(jié)束后和開(kāi)始時(shí)魚(yú)的尾數(shù)，WH、WV和W分別為肝胰臟、內(nèi)臟質(zhì)量和體質(zhì)量(g)，F(xiàn)為配方成本(元/kg)，Md為飼料中標(biāo)記物含量(%)，Mf為糞便中標(biāo)記物含量(%)，Nd為飼料中營(yíng)養(yǎng)成分的含量(%)，Nf為糞便中營(yíng)養(yǎng)成分的含量(%)。

1.5 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果

2.1 生長(zhǎng)和飼料利用

投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)和飼料利用的影響見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn)，投喂率和投喂頻率對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)的平均末體質(zhì)量、增重率(WG)、特定生長(zhǎng)率(SGR)和肝體比存在顯著的交互作用。投喂率由8%增加到12%時(shí)，實(shí)驗(yàn)魚(yú)的WG、SGR和飼料成本顯著升高。表觀飽食組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的WG和SGR顯著高于投喂率為8%的，而與其他組差異不顯著；但其飼料效率(FE)和蛋白質(zhì)效率(PER)與投喂率為8%組的差異不顯著，顯著高于其他組。隨投喂率由8%增加到12%，飼料成本(FC)增加，實(shí)驗(yàn)魚(yú)的成活率逐漸升高。投喂率為12%組的FC顯著高于其他組，表觀飽食投喂組的FC最低，但與8%和10%投喂率組的差異不顯著，而顯著低于12%投喂率組。投喂率和投喂頻率對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肥滿度和臟體比無(wú)顯著影響，但對(duì)肝體比影響顯著。投喂率為8%組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肝體比顯著小于投喂率為10%組的，而與其他組差異不顯著。由表2亦可見(jiàn)，投喂率和投喂頻率對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)的表觀消化率的影響不顯著，但隨投喂頻率的增加，表觀消化率有改善的趨勢(shì)。

表2 投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)和飼料利用的影響Tab.2 Effects of feeding frequency and feeding level on growth performance and feed utilization of GIFT tilapia

注：表中值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n=3)，同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)小寫(xiě)字母不同，表示差異顯著(P<0.05)。APD，飼料粗蛋白表觀消化率。

2.2 體成分

投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)體成分的影響見(jiàn)表3。由表3 可見(jiàn)，僅發(fā)現(xiàn)投喂率對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肝臟粗脂肪，以及去內(nèi)臟全魚(yú)的水分和粗脂肪具有顯著影響；而投喂頻率對(duì)體成分無(wú)顯著影響。增加投喂率使得肝臟粗脂肪和去內(nèi)臟全魚(yú)的粗脂肪含量增加，而去內(nèi)臟全魚(yú)水分含量逐漸降低。表觀飽食投喂組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肝臟粗脂肪和去內(nèi)臟全魚(yú)水分含量與其他組差異不顯著，但其去內(nèi)臟全魚(yú)粗脂肪含量顯著高于投喂率為8%組，而與其他組差異不顯著。

表3 投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)體成分的影響Tab.4 Effects of feeding frequency and feeding level on body composition of GIFT tilapia% 濕重

2.3血清生化指標(biāo)

投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響見(jiàn)表4。由表4可見(jiàn)，投喂率對(duì)血清的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性(AST)和血糖水平有顯著影響，而投喂頻率僅對(duì)血糖水平有顯著影響。10%投喂率組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的血清AST活性顯著高于投喂率8%組的。隨投喂率的增加，血糖水平逐漸增加，表觀飽食投喂組的血糖水平與10%和12%組差異不顯著，但顯著高于8%投喂組；隨投喂頻率的增加，血糖水平降低。投喂率和投喂頻率對(duì)血糖水平存在交互作用。

表4 投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響Tab.4 Effects of feeding frequency and feeding level on serum biochemical indexes of GIFT tilapia

2.6 肝臟組織結(jié)構(gòu)

在本實(shí)驗(yàn)中，各處理組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，細(xì)胞膜和細(xì)胞核清晰可見(jiàn)，所有處理組均發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞核偏移和空泡現(xiàn)象，但未發(fā)現(xiàn)明顯的細(xì)胞膜溶解及炎癥細(xì)胞浸溶等病理現(xiàn)象。投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)肝組織形態(tài)的影響見(jiàn)表5。由表5可知，投喂率和投喂頻率對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)肝細(xì)胞核的面積比例無(wú)顯著影響，但對(duì)其肝細(xì)胞空泡、細(xì)胞質(zhì)面積比例有顯著影響。隨投喂率的增加，實(shí)驗(yàn)魚(yú)肝臟空泡面積比例有增加的趨勢(shì)，表觀飽食組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肝臟空泡面積最高，而細(xì)胞質(zhì)面積最小。投喂率為8%，投喂頻率為2次/d實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肝細(xì)胞空泡和細(xì)胞質(zhì)面積比例與表觀飽食投喂3次/d之間差異顯著。

表5 投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)肝組織形態(tài)的影響Tab.5 Effects of feeding frequency and feeding level on liver structure of GIFT tilapia

3 討論

3.1 投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果發(fā)現(xiàn)表觀飽食投喂3次/d實(shí)驗(yàn)魚(yú)的飼料效率最佳，但其生長(zhǎng)性能與飼料成本均與投喂率為10%實(shí)驗(yàn)魚(yú)的無(wú)顯著差異(表2)，表明以10%的投喂率，投喂 2次/d是適合吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)的。在本實(shí)驗(yàn)中，隨投喂率和投喂頻率的增加，實(shí)驗(yàn)魚(yú)的生長(zhǎng)性能得到提高，這與小丑魚(yú)(Amphiprionpercula)[17]、大蓋巨脂鯉(Colossomamacropomum)[18]的研究結(jié)果類(lèi)似。但在8%～12%的投喂率下，投喂頻率未影響實(shí)驗(yàn)魚(yú)的生長(zhǎng)，這與已有羅非魚(yú)的研究類(lèi)似[7，19]，表明羅非魚(yú)的生長(zhǎng)依賴于食物的攝入量[2]。本實(shí)驗(yàn)中，表觀飽食投喂3次/d具有較佳的生長(zhǎng)性能和飼料利用效率，推測(cè)原因是每餐進(jìn)行表觀飽食投喂，實(shí)驗(yàn)魚(yú)每餐均可根據(jù)其生理需要保持最佳攝食量，從而更利于其生長(zhǎng)并節(jié)約飼料。

隨投喂率由8%增加到12%，實(shí)驗(yàn)魚(yú)的飼料效率逐漸降低，這與尼羅羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus)的研究結(jié)果類(lèi)似[20]，表明魚(yú)類(lèi)的攝食量及消化吸收有一定限度，即存在一個(gè)最適和最經(jīng)濟(jì)的投喂率，過(guò)高不但不會(huì)獲得最佳的生長(zhǎng)速度，而且會(huì)造成飼料的浪費(fèi)，增加養(yǎng)殖成本[3]。表觀飽食投喂組的飼料效率與投喂率為8%組的差異不顯著，但高于投喂率為10%和12%組，這與雜交斑點(diǎn)叉尾鮰(Ictaluruspunctatus×I.furcatus)的研究結(jié)果類(lèi)似[21]，表明表觀飽食投喂更利于飼料利用和節(jié)約成本。在本實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)魚(yú)對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率未受投喂率和投喂頻率的影響，類(lèi)似的研究結(jié)果在投喂率和投喂頻率對(duì)大西洋鮭(Salmosalar)的影響研究中也有所發(fā)現(xiàn)[22]。這可能與本實(shí)驗(yàn)的投喂率與其最適生長(zhǎng)所需的較為接近所致。Sajjadi[23]在對(duì)大西洋鮭(Salmosalar)適宜投喂率的研究中發(fā)現(xiàn)，與維持最大生長(zhǎng)投喂率的實(shí)驗(yàn)魚(yú)相比，相近的投喂率并未影響生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率；同時(shí)，Xie等[24]也發(fā)現(xiàn)表觀飽食的尼羅羅非魚(yú)與相近的投喂量之實(shí)驗(yàn)魚(yú)的生長(zhǎng)，以及飼料粗蛋白、能量等的表觀消化率無(wú)顯著差異。

肝體比、臟體比和肥滿度是評(píng)價(jià)魚(yú)類(lèi)營(yíng)養(yǎng)生理狀況的常用指標(biāo)[25]。本實(shí)驗(yàn)中，投喂頻率3次/d實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肝體比顯著高于投喂2次/d的，且本實(shí)驗(yàn)中投喂率為10%組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的肝體比顯著高于8%投喂率組的，這是因?yàn)楦闻K作為魚(yú)類(lèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的主要器官，提高投喂率和投喂頻率增加了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累[25]，造成了肝臟重量增加，進(jìn)而肝體比提高。本實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)魚(yú)在投喂率由8%升高至12%時(shí)的成活率有不顯著的升高，但是投喂率為8%的實(shí)驗(yàn)魚(yú)的成活率顯著低于表觀飽食投喂組，這可能與低投喂率下，魚(yú)類(lèi)的免疫力受到抑制，造成成活率偏低有關(guān)[26]。

一般來(lái)說(shuō)，魚(yú)體成分中的脂肪和水分呈相反關(guān)系，蛋白質(zhì)含量相對(duì)穩(wěn)定[25]。本實(shí)驗(yàn)中投喂頻率和投喂率對(duì)羅非魚(yú)肝臟、肌肉、去內(nèi)臟全魚(yú)及內(nèi)臟粗蛋白質(zhì)含量均無(wú)顯著影響。但隨投喂率的增加，去內(nèi)臟全魚(yú)和肝臟水分含量有降低趨勢(shì)，粗脂肪含量有升高趨勢(shì)，這與攝食量的增加，造成了能量物質(zhì)的攝入增加，進(jìn)而轉(zhuǎn)化成脂肪含量有關(guān)。

3.2 投喂率和投喂頻率對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)肝臟健康的影響

血液可以客觀反映養(yǎng)殖動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)代謝狀況，是重要的生理學(xué)、病理學(xué)和毒理學(xué)指標(biāo)，對(duì)于研究機(jī)體新陳代謝和生理狀況具有重要意義[27]。當(dāng)肝臟病變而引起細(xì)胞通透性增加，或受損傷的范圍較大時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)氨酶大量釋放出來(lái)進(jìn)入血漿，血液中ALT與AST活性升高[28]。但是，在正常代謝過(guò)程中，血清中 AST 和 ALT 活性值也會(huì)維持一定水平，它們活性高低同時(shí)也反映了蛋白質(zhì)合成和分解代謝的狀況[29]。本實(shí)驗(yàn)中，各處理組間血清AST并無(wú)顯著差異，但是固定投喂率時(shí)發(fā)現(xiàn)，10%投喂率組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的血清AST活性要高于8%投喂率組的，而這兩組間在數(shù)值上僅相差11 U/L，同時(shí)，在進(jìn)行切片觀察時(shí)，也未發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞有損傷或融合的現(xiàn)象，因此，這需要進(jìn)一步研究不同投喂率下羅非魚(yú)的蛋白質(zhì)代謝水平。

肝臟在糖代謝和血糖調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。當(dāng)機(jī)體能量充足時(shí)，從消化道吸收的過(guò)多血糖以糖原形式儲(chǔ)存于肝臟內(nèi)；饑餓或禁食狀態(tài)下，肝內(nèi)糖原被分解并磷酸化為6-磷酸葡萄糖，再在葡萄糖-6-磷酸酶的作用下轉(zhuǎn)化為葡萄糖釋放入血，供機(jī)體能量代謝[30]。在本實(shí)驗(yàn)中，投喂率的提高使得血糖水平升高，類(lèi)似的結(jié)果在對(duì)團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)[5]、虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[31]的研究中都有所發(fā)現(xiàn)，表明魚(yú)類(lèi)的碳水化合物的消化或代謝增加[26]。

覃希[7]對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)的觀察發(fā)現(xiàn)，投喂率為6%的實(shí)驗(yàn)魚(yú)(實(shí)驗(yàn)?zāi)w質(zhì)量約20 g)肝臟空泡面積小于投喂率為8%和10%的實(shí)驗(yàn)室。但在本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，投喂率8%～12%的實(shí)驗(yàn)魚(yú)間未發(fā)現(xiàn)顯著的差異，而表觀飽食投喂組肝細(xì)胞的空泡面積比例較高。通常認(rèn)為，空泡含有脂質(zhì)和糖原，這與肝臟的正常代謝功能有關(guān)[32]。一些研究表明，肝臟中脂質(zhì)和糖原沉積的升高是一種真正的營(yíng)養(yǎng)病理，并可導(dǎo)致進(jìn)行性器官病變[33]，對(duì)魚(yú)的健康造成不良影響[34]。然而，在本實(shí)驗(yàn)中，有關(guān)肝臟健康狀況評(píng)價(jià)的血清指標(biāo)，如TP、ALB、ALT、TCHO和TG，各組間并未顯現(xiàn)出明顯的差異，這似乎表明實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)的肝臟健康狀況尚比較穩(wěn)定，造成空泡面積增大的原因應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)魚(yú)的生理適應(yīng)[35]，但這也同時(shí)預(yù)示著長(zhǎng)期表觀飽食投喂，可造成肝臟營(yíng)養(yǎng)負(fù)荷過(guò)重。

綜上所述，在本實(shí)驗(yàn)條件下，以生長(zhǎng)和飼料利用為判斷指標(biāo)，吉富羅非魚(yú)采用表觀飽食投喂3次/d時(shí)，可以獲得最佳的生長(zhǎng)性能和飼料利用效率，但會(huì)產(chǎn)生體脂肪積累過(guò)多，肝臟細(xì)胞空泡增大等影響；若綜合考慮生長(zhǎng)和養(yǎng)殖成本，以10%的投喂率，投喂2次/d為宜。