胥 賢，黃 晉，舒旗林1,，李洪澤，謝蕊霞，李紅濤

(1.武漢中科瑞華生態(tài)科技股份有限公司，武漢 430080；2.中國(guó)水電建設(shè)集團(tuán)圣達(dá)水電有限公司，安谷水電站魚(yú)類(lèi)增殖放流站，四川樂(lè)山 614013；3.湖北省長(zhǎng)江水生態(tài)保護(hù)研究院，武漢 430080)

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)對(duì)象

1.2 標(biāo)志方法

本試驗(yàn)中選擇了三種常見(jiàn)的標(biāo)志方法，掛牌法中的T-tag錨標(biāo)法，體內(nèi)標(biāo)志法中的金屬線(xiàn)碼標(biāo)法以及可見(jiàn)植入熒光標(biāo)記法。

1.2.1 T-tag錨標(biāo)法(T-tag)

選取的T-tag錨標(biāo)采用塑料制作，較其他標(biāo)志方法成本較低，操作方便，重量較輕，一般不會(huì)對(duì)標(biāo)記對(duì)象產(chǎn)生較大影響[5]。錨標(biāo)規(guī)格為9 mm×38 mm，重量為0.04 g。在標(biāo)記前要用75%的酒精對(duì)標(biāo)記槍和T-tag 錨標(biāo)進(jìn)行消毒，然后用標(biāo)記槍打在試驗(yàn)魚(yú)背鰭基部中部，標(biāo)記后對(duì)傷口處用紅霉素軟膏進(jìn)行涂抹消毒。

1.2.2 金屬線(xiàn)碼標(biāo)法(CWT)

金屬線(xiàn)碼標(biāo)法是由美國(guó)西北海洋技術(shù)公司設(shè)計(jì)和制造，方法是用線(xiàn)碼標(biāo)記器將磁化的金屬線(xiàn)碼注入到動(dòng)物體內(nèi)，然后通過(guò)線(xiàn)碼檢測(cè)器來(lái)監(jiān)測(cè)動(dòng)物體內(nèi)是否標(biāo)記了線(xiàn)碼[6]。本試驗(yàn)中采用了直徑0.25 mm、長(zhǎng)度1.1 mm的金屬線(xiàn)碼，標(biāo)記位置為魚(yú)苗背部肌肉中。

1.2.3 可見(jiàn)植入熒光標(biāo)記法(VIE)

可見(jiàn)植入熒光標(biāo)記法(VIE)是用注射器在水生動(dòng)物的透明或半透明的外表皮注入可識(shí)別的熒光膠體，形成可識(shí)別的外部標(biāo)志熒光[7]。本試驗(yàn)用注射器將魚(yú)類(lèi)標(biāo)志專(zhuān)用的紅色熒光色素注射到四種魚(yú)苗的背部皮層，標(biāo)記長(zhǎng)度約為5 mm，可利用紫外燈照射方法來(lái)鑒定魚(yú)苗是否具有熒光標(biāo)記。

1.3 試驗(yàn)方法

每種規(guī)格共設(shè)T-tag錨標(biāo)法組(T-tag組)、微金屬線(xiàn)碼標(biāo)記組(CWT組)和可見(jiàn)植入標(biāo)記組(VIE組)共3個(gè)處理組和1個(gè)不做任何標(biāo)記的對(duì)照組，對(duì)照組不做任何標(biāo)記。全部實(shí)驗(yàn)設(shè)兩個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)組有50尾魚(yú)苗。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2003及SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)結(jié)果采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。同一種魚(yú)苗的同種規(guī)格各實(shí)驗(yàn)組的生長(zhǎng)、存活率、標(biāo)記保持率先采用單因子方差分析法(One-Way ANOVA)進(jìn)行方差分析，然后進(jìn)行Tukey顯著性檢驗(yàn)，顯著性水平設(shè)為0.05。同一種魚(yú)苗的同一種標(biāo)記的兩種規(guī)格實(shí)驗(yàn)組的生長(zhǎng)、存活率、標(biāo)記保持率采用T檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性比較，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 存活率

圖1 不同標(biāo)記下四種魚(yú)苗胭脂魚(yú)、長(zhǎng)薄鰍、唇和黃顙魚(yú)的存活率Fig.1 The survival rates of four species juvenile >fishes under different marking ways

2.2 標(biāo)記保持率

圖2 不同標(biāo)記下四種魚(yú)苗胭脂魚(yú)、長(zhǎng)薄鰍、唇和黃顙魚(yú)的標(biāo)記保持率Fig.2 The tag retention rates of four species juvenile fishes under different marking ways

2.3 生長(zhǎng)情況

在40 d的試驗(yàn)結(jié)束后，不同標(biāo)記方法下四種放流魚(yú)苗的全長(zhǎng)和體重的變化分別見(jiàn)圖3和圖4。由圖3-(A, B, D)和圖4-(A, B, D)可知，40 d試驗(yàn)結(jié)束后，在胭脂魚(yú)、長(zhǎng)薄鰍和黃顙魚(yú)的實(shí)驗(yàn)組中，同種規(guī)格下各試驗(yàn)組魚(yú)苗的全長(zhǎng)體重都比較接近，無(wú)顯著性差異，同時(shí)，各試驗(yàn)組全長(zhǎng)、體重與試驗(yàn)前對(duì)比均無(wú)顯著性差異。根據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，雖然試驗(yàn)結(jié)束后與試驗(yàn)前對(duì)比無(wú)顯著變化，但兩種規(guī)格的胭脂魚(yú)在對(duì)照組及標(biāo)記組中均表現(xiàn)出了一定的生長(zhǎng)。

圖3 不同標(biāo)記方法下四種魚(yú)苗胭脂魚(yú)、長(zhǎng)薄鰍、唇和黃顙魚(yú)全長(zhǎng)的生長(zhǎng)狀況Fig.3 The growth situation of four species juvenile fish total length under different marking ways

圖4 不同標(biāo)記方法下四種魚(yú)苗胭脂魚(yú)、長(zhǎng)薄鰍、唇和黃顙魚(yú)體重的生長(zhǎng)狀況Fig.4 The growth situation of four species juvenile fish weight under different marking ways

3 討論

增殖放流過(guò)程中對(duì)魚(yú)類(lèi)進(jìn)行標(biāo)記的方法很多，主要有體外標(biāo)志、體內(nèi)標(biāo)志、自然標(biāo)志、生物遙感勘測(cè)技術(shù)、分子遺傳標(biāo)記法及化學(xué)物質(zhì)標(biāo)志法等幾種標(biāo)志技術(shù)[2]。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)和實(shí)際運(yùn)用過(guò)程中，考慮到標(biāo)記操作簡(jiǎn)單，易掌握，同時(shí)兼顧成本低，漁民回捕易辨認(rèn)等特點(diǎn)，主要采用的標(biāo)記有剪鰭標(biāo)記、T-tag標(biāo)記、VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記[3,4,6]?？紤]到剪鰭標(biāo)記對(duì)魚(yú)類(lèi)損傷大，本實(shí)驗(yàn)主要采用T-tag標(biāo)記、VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記，而這三種標(biāo)記也是安谷水電站魚(yú)類(lèi)增殖站較為常用的魚(yú)類(lèi)標(biāo)記方法。

3.1 存活率

通過(guò)對(duì)四種魚(yú)苗的大、小規(guī)格的標(biāo)記結(jié)果分析可知，CWT和VIE對(duì)體長(zhǎng)50～110 mm小規(guī)格放流魚(yú)苗的存活無(wú)顯著影響，說(shuō)明CWT和VIE對(duì)小規(guī)格魚(yú)苗的損傷較小。然而，T-tag標(biāo)記時(shí)需將標(biāo)記刺進(jìn)魚(yú)苗背部，對(duì)魚(yú)苗的損傷大。隨著魚(yú)苗的規(guī)格變小，損傷會(huì)相對(duì)加大，因此，一般認(rèn)為T(mén)-tag適宜于個(gè)體較大的魚(yú)，如體長(zhǎng)在150 mm以上[14]。本研究對(duì)四種放流魚(yú)苗進(jìn)行T-tag標(biāo)記結(jié)果均顯示大規(guī)格存活率顯著高于小規(guī)格，所以，使用T-tag標(biāo)記時(shí)應(yīng)優(yōu)先考慮大規(guī)格魚(yú)苗。

3.2 標(biāo)記保持率

標(biāo)記保持率是衡量放流標(biāo)記是否適宜魚(yú)苗標(biāo)記的重要指標(biāo)之一，本研究使用T-tag、CWT、VIE分別對(duì)四種放流魚(yú)苗胭脂魚(yú)、長(zhǎng)薄鰍、唇和黃顙魚(yú)進(jìn)行標(biāo)記，每種魚(yú)苗選擇了大、小兩種不同規(guī)格進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果顯示在標(biāo)記40 d后，四種放流魚(yú)苗CWT和VIE標(biāo)記保持率均顯著高于T-tag，同時(shí)，除50～80 mm的小規(guī)格長(zhǎng)薄鰍VIE組標(biāo)記保持率略低于CWT外，其它各實(shí)驗(yàn)組VIE組均大于CWT組。許多研究表明VIE在短期標(biāo)記中，具有較高的標(biāo)記保持率，而長(zhǎng)期標(biāo)記后，隨著魚(yú)苗生長(zhǎng)會(huì)慢慢消失，然而，CWT在標(biāo)記短期標(biāo)記中，存在一定的脫標(biāo)現(xiàn)象，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)脫標(biāo)率不再增加[4,9, 15]。例如，Simon等[9]采用VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記標(biāo)志小鰻鱺(Anguillaanguilla)的32 d標(biāo)記保持率分別為100%和99%，但512 d的標(biāo)記保持率分別為66%和99%，說(shuō)明VIE較適宜于短期標(biāo)記，CWT較適宜長(zhǎng)期標(biāo)記。本研究結(jié)果也證實(shí)了VIE在短期標(biāo)記中具有較高的標(biāo)記保持率，除大規(guī)格黃顙魚(yú)組標(biāo)記保持率低于80%外，其它實(shí)驗(yàn)組標(biāo)記保持率均高于80%。另外，部分魚(yú)苗VIE標(biāo)記保持率達(dá)到100%，如大規(guī)格唇、小規(guī)格胭脂魚(yú)、大規(guī)格胭脂魚(yú)等。大規(guī)格黃顙魚(yú)標(biāo)記保持率相對(duì)較低主要是受死亡率的影響，據(jù)圖1-C可知實(shí)驗(yàn)中大規(guī)格黃顙魚(yú)對(duì)照組的死亡率也相對(duì)較高，分析得知大規(guī)格黃顙魚(yú)是從室外養(yǎng)殖池捕撈至室內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，養(yǎng)殖環(huán)境改變存在一定的不適應(yīng)性所致。實(shí)驗(yàn)中雖然受條件影響導(dǎo)致結(jié)果有一定的偏差，但由于設(shè)置了對(duì)照組，可通過(guò)與對(duì)照組對(duì)比分析校正結(jié)果。

3.3 生長(zhǎng)情況

本研究受試驗(yàn)條件限制，存在諸多不足之處，如：(1)試驗(yàn)僅開(kāi)展40 d，試驗(yàn)周期相對(duì)較短，VIE標(biāo)記保持率較高，許多研究表明VIE在長(zhǎng)期標(biāo)記中會(huì)隨著魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)而淡化消失；(2)試驗(yàn)僅在室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行，室內(nèi)模擬野外生存環(huán)境與放流魚(yú)苗實(shí)際在河道里的生存環(huán)境存在差異，導(dǎo)致結(jié)果也會(huì)有所不同。同時(shí)，通過(guò)本試驗(yàn)可知隨著魚(yú)苗種類(lèi)、規(guī)格大小的差異，標(biāo)記方法的不同，標(biāo)記保持率大小也不同，可借鑒本研究的結(jié)果科學(xué)地指導(dǎo)標(biāo)記放流的工作。從本研究不足之處得知，未來(lái)的研究可以著重于長(zhǎng)時(shí)間標(biāo)記，研究在不同標(biāo)記下，隨著標(biāo)記時(shí)間的增加標(biāo)記保持率發(fā)生怎樣變化。在野外環(huán)境進(jìn)行試驗(yàn)更具有代表性[24]，后續(xù)研究可以在河道里設(shè)置網(wǎng)箱進(jìn)行試驗(yàn)，使得放流魚(yú)苗生存環(huán)境更接近于真實(shí)環(huán)境，結(jié)果更具科學(xué)意義。