胥 賢，黃 晉，舒旗林1,，李洪澤，謝蕊霞，李紅濤

(1.武漢中科瑞華生態(tài)科技股份有限公司，武漢 430080；2.中國水電建設(shè)集團(tuán)圣達(dá)水電有限公司，安谷水電站魚類增殖放流站，四川樂山 614013；3.湖北省長江水生態(tài)保護(hù)研究院，武漢 430080)

1 材料與方法

1.1 試驗對象

1.2 標(biāo)志方法

本試驗中選擇了三種常見的標(biāo)志方法，掛牌法中的T-tag錨標(biāo)法，體內(nèi)標(biāo)志法中的金屬線碼標(biāo)法以及可見植入熒光標(biāo)記法。

1.2.1 T-tag錨標(biāo)法(T-tag)

選取的T-tag錨標(biāo)采用塑料制作，較其他標(biāo)志方法成本較低，操作方便，重量較輕，一般不會對標(biāo)記對象產(chǎn)生較大影響[5]。錨標(biāo)規(guī)格為9 mm×38 mm，重量為0.04 g。在標(biāo)記前要用75%的酒精對標(biāo)記槍和T-tag 錨標(biāo)進(jìn)行消毒，然后用標(biāo)記槍打在試驗魚背鰭基部中部，標(biāo)記后對傷口處用紅霉素軟膏進(jìn)行涂抹消毒。

1.2.2 金屬線碼標(biāo)法(CWT)

金屬線碼標(biāo)法是由美國西北海洋技術(shù)公司設(shè)計和制造，方法是用線碼標(biāo)記器將磁化的金屬線碼注入到動物體內(nèi)，然后通過線碼檢測器來監(jiān)測動物體內(nèi)是否標(biāo)記了線碼[6]。本試驗中采用了直徑0.25 mm、長度1.1 mm的金屬線碼，標(biāo)記位置為魚苗背部肌肉中。

1.2.3 可見植入熒光標(biāo)記法(VIE)

可見植入熒光標(biāo)記法(VIE)是用注射器在水生動物的透明或半透明的外表皮注入可識別的熒光膠體，形成可識別的外部標(biāo)志熒光[7]。本試驗用注射器將魚類標(biāo)志專用的紅色熒光色素注射到四種魚苗的背部皮層，標(biāo)記長度約為5 mm，可利用紫外燈照射方法來鑒定魚苗是否具有熒光標(biāo)記。

1.3 試驗方法

每種規(guī)格共設(shè)T-tag錨標(biāo)法組(T-tag組)、微金屬線碼標(biāo)記組(CWT組)和可見植入標(biāo)記組(VIE組)共3個處理組和1個不做任何標(biāo)記的對照組，對照組不做任何標(biāo)記。全部實驗設(shè)兩個重復(fù)，每個重復(fù)組有50尾魚苗。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2003及SPSS 17.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)結(jié)果采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。同一種魚苗的同種規(guī)格各實驗組的生長、存活率、標(biāo)記保持率先采用單因子方差分析法(One-Way ANOVA)進(jìn)行方差分析，然后進(jìn)行Tukey顯著性檢驗，顯著性水平設(shè)為0.05。同一種魚苗的同一種標(biāo)記的兩種規(guī)格實驗組的生長、存活率、標(biāo)記保持率采用T檢驗進(jìn)行顯著性比較，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 存活率

圖1 不同標(biāo)記下四種魚苗胭脂魚、長薄鰍、唇和黃顙魚的存活率Fig.1 The survival rates of four species juvenile >fishes under different marking ways

2.2 標(biāo)記保持率

圖2 不同標(biāo)記下四種魚苗胭脂魚、長薄鰍、唇和黃顙魚的標(biāo)記保持率Fig.2 The tag retention rates of four species juvenile fishes under different marking ways

2.3 生長情況

在40 d的試驗結(jié)束后，不同標(biāo)記方法下四種放流魚苗的全長和體重的變化分別見圖3和圖4。由圖3-(A, B, D)和圖4-(A, B, D)可知，40 d試驗結(jié)束后，在胭脂魚、長薄鰍和黃顙魚的實驗組中，同種規(guī)格下各試驗組魚苗的全長體重都比較接近，無顯著性差異，同時，各試驗組全長、體重與試驗前對比均無顯著性差異。根據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計結(jié)果顯示，雖然試驗結(jié)束后與試驗前對比無顯著變化，但兩種規(guī)格的胭脂魚在對照組及標(biāo)記組中均表現(xiàn)出了一定的生長。

圖3 不同標(biāo)記方法下四種魚苗胭脂魚、長薄鰍、唇和黃顙魚全長的生長狀況Fig.3 The growth situation of four species juvenile fish total length under different marking ways

圖4 不同標(biāo)記方法下四種魚苗胭脂魚、長薄鰍、唇和黃顙魚體重的生長狀況Fig.4 The growth situation of four species juvenile fish weight under different marking ways

3 討論

增殖放流過程中對魚類進(jìn)行標(biāo)記的方法很多，主要有體外標(biāo)志、體內(nèi)標(biāo)志、自然標(biāo)志、生物遙感勘測技術(shù)、分子遺傳標(biāo)記法及化學(xué)物質(zhì)標(biāo)志法等幾種標(biāo)志技術(shù)[2]。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)和實際運用過程中，考慮到標(biāo)記操作簡單，易掌握，同時兼顧成本低，漁民回捕易辨認(rèn)等特點，主要采用的標(biāo)記有剪鰭標(biāo)記、T-tag標(biāo)記、VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記[3,4,6]?？紤]到剪鰭標(biāo)記對魚類損傷大，本實驗主要采用T-tag標(biāo)記、VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記，而這三種標(biāo)記也是安谷水電站魚類增殖站較為常用的魚類標(biāo)記方法。

3.1 存活率

通過對四種魚苗的大、小規(guī)格的標(biāo)記結(jié)果分析可知，CWT和VIE對體長50～110 mm小規(guī)格放流魚苗的存活無顯著影響，說明CWT和VIE對小規(guī)格魚苗的損傷較小。然而，T-tag標(biāo)記時需將標(biāo)記刺進(jìn)魚苗背部，對魚苗的損傷大。隨著魚苗的規(guī)格變小，損傷會相對加大，因此，一般認(rèn)為T-tag適宜于個體較大的魚，如體長在150 mm以上[14]。本研究對四種放流魚苗進(jìn)行T-tag標(biāo)記結(jié)果均顯示大規(guī)格存活率顯著高于小規(guī)格，所以，使用T-tag標(biāo)記時應(yīng)優(yōu)先考慮大規(guī)格魚苗。

3.2 標(biāo)記保持率

標(biāo)記保持率是衡量放流標(biāo)記是否適宜魚苗標(biāo)記的重要指標(biāo)之一，本研究使用T-tag、CWT、VIE分別對四種放流魚苗胭脂魚、長薄鰍、唇和黃顙魚進(jìn)行標(biāo)記，每種魚苗選擇了大、小兩種不同規(guī)格進(jìn)行試驗，結(jié)果顯示在標(biāo)記40 d后，四種放流魚苗CWT和VIE標(biāo)記保持率均顯著高于T-tag，同時，除50～80 mm的小規(guī)格長薄鰍VIE組標(biāo)記保持率略低于CWT外，其它各實驗組VIE組均大于CWT組。許多研究表明VIE在短期標(biāo)記中，具有較高的標(biāo)記保持率，而長期標(biāo)記后，隨著魚苗生長會慢慢消失，然而，CWT在標(biāo)記短期標(biāo)記中，存在一定的脫標(biāo)現(xiàn)象，隨著時間的增長脫標(biāo)率不再增加[4,9, 15]。例如，Simon等[9]采用VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記標(biāo)志小鰻鱺(Anguillaanguilla)的32 d標(biāo)記保持率分別為100%和99%，但512 d的標(biāo)記保持率分別為66%和99%，說明VIE較適宜于短期標(biāo)記，CWT較適宜長期標(biāo)記。本研究結(jié)果也證實了VIE在短期標(biāo)記中具有較高的標(biāo)記保持率，除大規(guī)格黃顙魚組標(biāo)記保持率低于80%外，其它實驗組標(biāo)記保持率均高于80%。另外，部分魚苗VIE標(biāo)記保持率達(dá)到100%，如大規(guī)格唇、小規(guī)格胭脂魚、大規(guī)格胭脂魚等。大規(guī)格黃顙魚標(biāo)記保持率相對較低主要是受死亡率的影響，據(jù)圖1-C可知實驗中大規(guī)格黃顙魚對照組的死亡率也相對較高，分析得知大規(guī)格黃顙魚是從室外養(yǎng)殖池捕撈至室內(nèi)進(jìn)行試驗，養(yǎng)殖環(huán)境改變存在一定的不適應(yīng)性所致。實驗中雖然受條件影響導(dǎo)致結(jié)果有一定的偏差，但由于設(shè)置了對照組，可通過與對照組對比分析校正結(jié)果。

3.3 生長情況

本研究受試驗條件限制，存在諸多不足之處，如：(1)試驗僅開展40 d，試驗周期相對較短，VIE標(biāo)記保持率較高，許多研究表明VIE在長期標(biāo)記中會隨著魚類生長而淡化消失；(2)試驗僅在室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行，室內(nèi)模擬野外生存環(huán)境與放流魚苗實際在河道里的生存環(huán)境存在差異，導(dǎo)致結(jié)果也會有所不同。同時，通過本試驗可知隨著魚苗種類、規(guī)格大小的差異，標(biāo)記方法的不同，標(biāo)記保持率大小也不同，可借鑒本研究的結(jié)果科學(xué)地指導(dǎo)標(biāo)記放流的工作。從本研究不足之處得知，未來的研究可以著重于長時間標(biāo)記，研究在不同標(biāo)記下，隨著標(biāo)記時間的增加標(biāo)記保持率發(fā)生怎樣變化。在野外環(huán)境進(jìn)行試驗更具有代表性[24]，后續(xù)研究可以在河道里設(shè)置網(wǎng)箱進(jìn)行試驗，使得放流魚苗生存環(huán)境更接近于真實環(huán)境，結(jié)果更具科學(xué)意義。