陸 燕，覃小升

(來賓市興賓區(qū)人民醫(yī)院檢驗科,廣西來賓 546100)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是我國最常見的自身免疫系統(tǒng)疾病，也是一種累及機體多系統(tǒng)、多臟器的疾病[1]。SLE可導(dǎo)致機體多種臟器功能障礙，SLE患者病情活動度不同，預(yù)后不同[2]。狼瘡性腎炎(LN)是我國最常見繼發(fā)性的腎小球疾病，是由于自身抗體產(chǎn)生導(dǎo)致腎臟免疫復(fù)合物形成和沉積，免疫復(fù)合物通過經(jīng)典和旁路途徑激活補體系統(tǒng)造成腎臟損傷[3-4]。血清中程序性死亡分子1(PD-1)與其配體(PD-L1)組成的信號途徑是對T細胞激活的調(diào)節(jié)和T細胞耐受的維持有重要的臨床意義[5]。積極評價SLE患者病情嚴重程度和腎臟損傷情況具有重要的臨床意義，本研究探討了SLE患者外周血B細胞中PD-L1水平與患者腎臟損傷及病情的關(guān)系，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年5月至2017年5月在本院診斷為SLE的50例患者為研究對象，SLE的診斷參照中華醫(yī)學(xué)會指定的相關(guān)診斷標準。納入標準：(1)確診為SLE；(2)依從性好，同意進行本研究的，能完成隨訪。排除標準：(1)既往合并高血壓、糖尿病、冠心病、甲狀腺疾病、肝臟疾病等其他慢性疾病的患者；(2)精神異?；蚝喜⑵渌J知功能障礙的患者；(3)合并其他自身免疫系統(tǒng)疾病或其他可能導(dǎo)致患者腎臟功能損傷疾病的患者；(4)合并妊娠、哺乳或其他認知功能障礙的患者；(5)近期使用了激素或免疫抑制劑治療或其他可能影響病情評價藥物的患者。納入研究的50例SLE患者中，男6例，女44例；平均(34.2±6.5)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(22.5±3.5)kg/m2。根據(jù)SLE疾病活動指數(shù)分級(SLEDAI)將SLE患者分為SLE活動期組(25例)和SLE非活動期組(25例)，SLE活動期組SLEDAI評分≥10分，SLE非活動組SLEDAI評分<10分。SLE活動期患者中，男2例，女23；平均(35.6±6.7)歲，SLE非活動期組中，男4例，女21例，平均(33.8±6.3)歲。另選擇同期20例健康成人作為對照組，其中男3例，女17例；平均(34.8±6.2)歲；BMI(22.7±3.2)kg/m2；兩組性別、年齡、BMI等比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2觀察指標 (1)腎臟損傷評價：本研究中所有LN患者均經(jīng)皮腎穿刺進行腎臟病理活檢，根據(jù)腎穿刺活檢結(jié)果分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型狼瘡；(2)外周血B細胞PD-L1表達水平檢測：采用收集患者和健康人外周血單個核細胞制備單核細胞懸液加入2支試管中，分別加入FITC標記的抗人PD-L1抗體(anti-HPD-L1-FITC)和PE標記的抗人CD19抗體(anti-HCD19-PE)(均購自ATCC公司),1 000 r/min 離心5 min，棄上清液，4%多聚甲醛固定后加入300 μL PBS 上機采用流式細胞儀進行分析，以雙色點圖分析B淋巴細胞PD-L1的表達。

2 結(jié) 果

2.1不同病情的SLE患者B細胞中CD19+、CD19+/PD-L1水平比較 SLE活動期組患者CD19+水平均高于SLE非活動期組和對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；SLE活動期患者CD19+/PD-L1水平均高于非活動期患者和對照組患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同組B細胞中CD19+水平和CD19+/PD-L1水平比較

2.2不同CD19+和CD19+/PD-L1水平的患者腎臟損傷程度的關(guān)系 根據(jù)CD19+和CD19+/PD-L1水平分為低水平和高水平組(以CD19+或CD19+/PD-L1水平的中位數(shù)為參考點，低于其中位數(shù)水平為低水平組，高于其中位數(shù)水平為低水平組)，CD19+高水平和CD19+/PD-L1高水平的患者腎損傷的發(fā)生率更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同CD19+和CD19+/PD-L1水平的

表3 LN患者腎功能不全發(fā)生的風險因素分析

2.3SLE患者發(fā)生腎功能不全發(fā)生的風險因素分析 以性別、年齡、BMI、尿蛋白定量、腎臟病理分級、血清中CD19+、CD19+/PD-L1，以腎功能不全為終點事件，采用logistic回歸分析探討結(jié)果提示，CD19+/PD-L1、LN Ⅳ期是LN患者腎功能不全發(fā)生的獨立危險因素，見表3。

3 討 論

SLE的發(fā)生、發(fā)展與T細胞異常活化和共同刺激免疫表達有關(guān)，研究提示PD-1/PD-L1在外周血免疫耐受和自身免疫疾病過程中有重要的臨床意義，研究證實PD-1基因過表達的小鼠可以誘發(fā)自身免疫性擴大性心肌病[6]。PD-1影響T細胞的生物學(xué)行為，進而影響多種細胞因子的表達，導(dǎo)致患者T細胞功能下降[7]，進而參與自身免疫系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展。

SLE是多系統(tǒng)受累的自身免疫系統(tǒng)疾病，臨床表現(xiàn)多種多樣。SLE根據(jù)病情輕重不一，病情穩(wěn)定者可不出現(xiàn)任何臟器損傷情況，病情嚴重者可累及患者多種臟器，導(dǎo)致患者臟器功能障礙，甚至危及患者生命[8-10]。 狼瘡病情活動評分是評價SLE病情的重要指標之一，當患者病情活動時可出現(xiàn)腎臟損傷、血液系統(tǒng)疾病，甚至狼瘡性腦病。本研究采用SLEDAI對患者病情進行評分，發(fā)現(xiàn)病情活動的患者CD19+細胞表達和PD-1水平明顯更高，這就意味著B細胞表面PD-L1表達水平可能參與B細胞的生物學(xué)行為，促進免疫損傷的進展，進而調(diào)控SLE的病情發(fā)展。

LN是導(dǎo)致繼發(fā)性腎損傷的主要疾病，LN是多種免疫復(fù)合物導(dǎo)致腎臟損傷，LN發(fā)病過程中大量細胞外基質(zhì)大量沉積、誘發(fā)腎臟病理生理改變[11-13]。LN病情及預(yù)后不一，輕者對患者關(guān)腎功能無明顯影響，病情嚴重者可導(dǎo)致患者腎功能衰竭進入尿毒癥甚至導(dǎo)致死亡[14-15]。找到一種無創(chuàng)評價患者腎臟病變程度的評價指標具有重要的臨床意義。相關(guān)性分析結(jié)果也證實了外周血中B細胞含量及PD-L1表達水平與患者腎臟損情程度密切相關(guān)，PD-L1水平不僅可以用于評價SLE病情也可以運用于評價患者腎臟損傷程度。

4 結(jié) 論

不少SLE患者腎功能損傷最終可能發(fā)展為腎功能不全，本研究探討了SLE患者腎功能不全的危險因素，結(jié)果發(fā)現(xiàn)B細胞表達的PD-L1水平、LN Ⅳ是患者進展為腎功能不全的獨立危險因素，提示外周血B細胞的PD-L1水平與患者病情損傷密切相關(guān)，可能成為SLE患者疾病進展和預(yù)后的指標。