袁文彬

江西省吉水縣疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科，江西 吉安 331600

進(jìn)入21世紀(jì)后，社會(huì)得到快速發(fā)展，人民生活水平得到很大的提高，因此，人們對(duì)藥品、食品質(zhì)量安全的關(guān)注越來(lái)越廣泛。常見(jiàn)的藥物檢驗(yàn)方法包括高效液相色譜、超高效液相色譜等。這兩種檢驗(yàn)方法均具有操作簡(jiǎn)單、速度快、靈敏度高、效率高、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)勢(shì)，雖然原理基本相似，但又有所不同。超高效液相色譜法是一種分析分離技術(shù)，應(yīng)用過(guò)程中不僅操作快捷，而且十分高效，用于食品檢驗(yàn)、藥品檢驗(yàn)時(shí)，可實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)自動(dòng)化。有研究證實(shí)[1]，在藥物檢驗(yàn)中，由于超高效液相色譜法色譜柱粒徑更小，從而檢驗(yàn)速度、質(zhì)量、效率、安全性、準(zhǔn)確性均比高效液相色譜法高。因此，本文就對(duì)比分析這兩種方法在藥物檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果，具體如下。

1 材料與方法

1.1 材料儀器研究所用藥物：利福平60片(國(guó)藥準(zhǔn)字H32020550生產(chǎn)單位：蓋天力醫(yī)藥控股集團(tuán)制藥股份有限公司規(guī)格：0.15g)。研究所用儀器包括常規(guī)液相色譜儀和超高效液相色譜儀兩組儀器。

1.2 研究方法對(duì)照組行高效液相色譜法檢驗(yàn)，方法具體如下：選取30片利福平研磨成粉末狀，再取一個(gè)50mL量瓶把藥粉置入，行加流動(dòng)溶解、稀釋、濾過(guò)一系列操作后，再放到紫外線中進(jìn)行掃描，紫外線強(qiáng)度設(shè)置為200～400nm，末端吸收設(shè)置為220nm，再實(shí)施波長(zhǎng)測(cè)定，各吸20μL的稀釋液，注入液相色譜儀中，記錄好色譜圖記。觀察組行超高效液相色譜法檢驗(yàn)，操作方法具體如下：選取30片利福平研磨成粉末狀，行稀釋、濾過(guò)相關(guān)操作之后，各吸取20μL的稀釋液，再將稀釋液注入超高效液相色譜儀，仔細(xì)觀察色譜圖變化情況，同時(shí)做好詳細(xì)記錄。最后對(duì)兩種方法的應(yīng)用結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。主要比較兩組的徹底分離率及所用時(shí)間[2]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理本研究用SPSS 21.0分析所得數(shù)據(jù)，分析藥片所用時(shí)間等計(jì)量資料用()表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)；藥片徹底分離率等計(jì)數(shù)資料(例/%)，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，組間數(shù)據(jù)差異為P＜0.05，則具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在利福平片檢驗(yàn)色譜圖記錄結(jié)果顯示，觀察組平均分析時(shí)間為(3.11±0.38)min、徹底分離率為100%，對(duì)照組高效液相色譜法分析時(shí)間為分(14.63±3.25)min、83.33%，觀察組分析時(shí)間更短，分離率更高，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組方法對(duì)利福平片試驗(yàn)影響的比較

3 討論

高效液相色譜是一種重要的分離分析方法，主要把液相色譜與氣相色譜理論技術(shù)進(jìn)行結(jié)合而形成。高效液相色譜是色譜法中的一個(gè)重要分支，由于流動(dòng)相成分是液體，因此，流動(dòng)相在壓力作用可輕松被擠壓到固定相中。高效液相色譜具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、效率高、應(yīng)用范圍廣、組分易回收等優(yōu)勢(shì)，因此成為常用的藥物分析方法。高效液相色譜法應(yīng)用于藥物鑒別分析時(shí)，由于樣品組分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)等在實(shí)驗(yàn)過(guò)程對(duì)藥物保留時(shí)間產(chǎn)生一定的影響，結(jié)構(gòu)、性質(zhì)變化容易導(dǎo)致藥物的出峰順序出現(xiàn)差異，因此，應(yīng)根據(jù)供試品的含量進(jìn)行合理實(shí)驗(yàn)。

超高效液相色譜是一種新型的液相色譜技術(shù)，采用小型顆粒填料色譜柱、超高壓系統(tǒng)等，彌補(bǔ)了在復(fù)雜環(huán)境下無(wú)法保證檢驗(yàn)質(zhì)量的缺失，比高效液相色譜更具優(yōu)勢(shì)[3]。超高效液相色譜技術(shù)是重要的藥品檢測(cè)分析方法，能夠適應(yīng)更復(fù)雜的環(huán)境，在高壓、高速環(huán)境中，仍能確保藥物有效分析、高效分離，確保檢驗(yàn)質(zhì)量和效率，有效適應(yīng)藥物分析測(cè)量高效率的要求，在藥物檢測(cè)中應(yīng)用越來(lái)越廣泛。上世紀(jì)九十年代，首次對(duì)超高效液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，取得令人滿意的試驗(yàn)結(jié)果。高效液相色譜、超高效液相色譜雖然檢驗(yàn)方法的實(shí)驗(yàn)原理相似，但又有明顯差異，主要差異就是色譜柱粒徑的大小之別，超高效液相色譜粒徑(1.6μm)，而高效液相色譜粒徑為(5μm)，粒徑越小，則有效增加柱子壓力，大大促進(jìn)靈敏度、徹底分離率的提高。與高效液相色譜法比較，超高效液相色譜法的靈敏度、速度、分離度均明顯提高，在藥物分析領(lǐng)域中是非常重要的分析技術(shù)和檢驗(yàn)手段，且更具研究?jī)r(jià)值。胡青等[4]文獻(xiàn)指出，超高效液相色譜法應(yīng)用于藥品檢驗(yàn)中，表現(xiàn)出藥品組分容易吸收、分離速度快、敏感度高、樣品處理簡(jiǎn)單、藥物成分分離高效率等諸多優(yōu)勢(shì)。

本研究中，采用不同的檢驗(yàn)方法對(duì)利福平藥物進(jìn)行分組檢驗(yàn)，兩組色譜圖記錄結(jié)果顯示，對(duì)照組高效液相色譜法的分析時(shí)間為(14.63±3.25)min，而觀察組所用時(shí)間僅為(3.11±0.38)min，且徹底分離率高達(dá)100%，明顯高于對(duì)照組的83.33%，組間差異對(duì)比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該結(jié)果表明，超高效液相色譜法應(yīng)用于藥品檢驗(yàn)，能夠在藥物分析中準(zhǔn)確、快速的檢驗(yàn)出藥物組成成分，且具有較高的通透量，在藥物檢驗(yàn)中所發(fā)揮的重要作用，能夠提高藥物檢驗(yàn)的質(zhì)量，應(yīng)用價(jià)值明顯更高。與高效液相色譜法比較，超高效液相色譜法應(yīng)用于藥物檢驗(yàn)中更具優(yōu)勢(shì)：①敏感度更高，超高效液相色譜粒徑減小，微粒色譜峰縮小，促進(jìn)樣品雜質(zhì)得到徹底分離，降低基質(zhì)效應(yīng)，從而提高檢驗(yàn)敏感度和分離度。②大大縮短分離時(shí)間。在檢驗(yàn)條件相同時(shí)，色譜柱的粒徑越小，色譜柱則越短，分離流速則大大提高，有效縮短分離時(shí)間。超高效液相色譜法色譜柱粒徑比高效液相色譜法小3倍左右，因此，大大提高分離流速，縮短分離時(shí)間[5]。③分離度更高，由于粒徑平方根和微粒的分離度呈現(xiàn)出反比關(guān)系，超高效液相色譜法粒徑小于高效液相色譜法粒徑，因此，能獲得更高的柱效，從而促進(jìn)分離度的提高。④環(huán)境適應(yīng)性更強(qiáng)。在高壓、高速的環(huán)境下，高效液相色譜法無(wú)法對(duì)樣品進(jìn)行分離，更不能保證分離質(zhì)量不降低，而超高效液相色譜法則有效改善了這一缺點(diǎn)，在復(fù)雜環(huán)境中，仍能高效分離樣品，確保分離質(zhì)量，保證藥物分析檢測(cè)中的安全性[6]。

綜上所述，超高效液相色譜技術(shù)在藥物分析的應(yīng)用中具有粒徑極小、靈敏度高、分離度高、時(shí)間短、環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，從而越來(lái)越受到社會(huì)的廣泛關(guān)注。由此可見(jiàn)，超高效液相色譜應(yīng)用于藥物檢驗(yàn)中，取得顯著的效果，有效提高藥物的檢驗(yàn)質(zhì)量和檢驗(yàn)效率，有效保障藥物安全，具有重要的研究及應(yīng)用價(jià)值。