王 艷，吳 凡，張 沁

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改性粘土與抑藻菌耦合法抑制錐狀斯氏藻研究*

王 艷1*，吳 凡1，張 沁2

（1.深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東 深圳 518055；2.江西財(cái)經(jīng)大學(xué)，江西 南昌 330013）

為了開(kāi)發(fā)高效和環(huán)境友好型的抑藻方法，作者研究了2種改性粘土（十六烷基三甲基溴化銨和三丁基十六烷基溴化磷）與抑藻菌聯(lián)合使用消殺錐狀斯氏藻（）的效果．結(jié)果表明，單獨(dú)使用改性粘土?xí)r，十六烷基三甲基溴化銨的效果優(yōu)于三丁基十六烷基溴化磷，但只能在初期（48h內(nèi)）起到較強(qiáng)的抑制作用，對(duì)藻細(xì)胞沒(méi)有徹底去除．將改性粘土與抑藻細(xì)菌（蠟樣芽孢桿菌G4，紡錘形賴氨酸芽孢桿菌J8）進(jìn)行耦合后，抑藻效果明顯而持續(xù)，有效抑藻時(shí)間可持續(xù)168 h，且未見(jiàn)葉綠素含量明顯的反彈．因此，十六烷基三甲基溴化銨改性粘土與抑藻菌聯(lián)合使用有更好的成效，可作為一種極具潛力的環(huán)境友好型方法用于有害藻類的治理．

改性粘土；溶藻菌株；錐狀斯氏藻；有害藻華

赤潮作為一種全球性的海洋自然災(zāi)害已引起世界各國(guó)的高度關(guān)注．在我國(guó)沿海地區(qū)，赤潮帶來(lái)了嚴(yán)重的生態(tài)、資源和環(huán)境問(wèn)題，并造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，是濱海生態(tài)安全和經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的重大障礙[1-2]，因此，研究新型高效環(huán)保的赤潮防控方法，一直是赤潮研究領(lǐng)域亟待解決的問(wèn)題之一．

現(xiàn)行控制赤潮的方法主要包括物理法、化學(xué)法和生物學(xué)方法[3-5]，這些方法的單一使用在實(shí)際應(yīng)用中已暴露出一些不足．具體表現(xiàn)在：物理法治理赤潮只能在初期達(dá)到有較強(qiáng)的抑制作用，對(duì)藻類沒(méi)有徹底去除，藻類的爆發(fā)存在反彈的可能．而利用化學(xué)方法如銅制劑、除草劑等化學(xué)殺藻劑雖然可以直接殺死藻類，但這些化學(xué)物質(zhì)的專一性差，容易在食物鏈中富集造成二次污染．一些生物學(xué)方法的使用，如攝藻生物的介入，又會(huì)造成種群的擾動(dòng)，帶來(lái)潛在的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)；且生物學(xué)方法見(jiàn)效較慢，不易形成立竿見(jiàn)影的效果．因此如何將已有的技術(shù)進(jìn)行有效耦合，充分發(fā)揮各種技術(shù)的自身優(yōu)勢(shì)，開(kāi)發(fā)一種集成、高效、環(huán)境友好型的抑藻方法一直是科研工作者的努力目標(biāo)．

近年來(lái)，溶藻細(xì)菌（algicidal bacteria）的發(fā)現(xiàn)給赤潮的治理帶來(lái)了新的曙光．它作為水生生態(tài)系統(tǒng)生物種群結(jié)構(gòu)和功能的重要組成部分，對(duì)維持藻類生物量平衡具有非常重要的作用[6-7]．研究表明，赤潮的消亡可能與溶藻細(xì)菌的存在有關(guān)[8]．溶藻細(xì)菌作為一種有效的生防生物，已越來(lái)越多的被關(guān)注．國(guó)內(nèi)學(xué)者俞至明等應(yīng)用微生物學(xué)方法從赤潮發(fā)生區(qū)篩選了藻類共生菌，通過(guò)分離和純化得到了多株具有溶藻能力的菌株，對(duì)東海原甲藻（）、亞歷山大藻（sp.）以及中肋骨條藻（）有較好的抑制作用[9]．然而，隨著研究的深入，人們意識(shí)到溶藻菌株的使用效果較為緩慢，一般要在24 h后才能得以體現(xiàn)，尋求一種加速溶藻效果的方法成為了人們關(guān)注的目標(biāo)．

絮凝劑（如改性粘土）是一種天然的高分子電解質(zhì)，具有較大的比表面積和超強(qiáng)的吸附能力，可吸附水體中過(guò)剩的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是改善水質(zhì)和加速藻類沉降的可行方法[10]．過(guò)去5年里，一些粘土物質(zhì)，如泥漿水、蒙脫土、蛭石等都顯示出了較好的去藻能力，且最大的優(yōu)勢(shì)在于除藻效果快速而明顯[11-12]．如果能將粘土與溶藻菌聯(lián)合使用，利用其各自的優(yōu)點(diǎn)，則有望開(kāi)發(fā)出更優(yōu)化的抑藻方法．結(jié)合深圳的實(shí)際，近年來(lái)我市周邊頻繁爆發(fā)錐狀斯氏藻赤潮，探索有效的防控手段是維護(hù)我市海洋生態(tài)安全的有力保障．

為此，作者研究將物理法與生物法耦合的抑藻技術(shù)．首先利用改性粘土較大的比表面積以及超強(qiáng)的吸附能力，吸附水體中過(guò)剩的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[13-14]，進(jìn)而通過(guò)貧化海水來(lái)降低赤潮生物賴以生存、繁殖的物質(zhì)基礎(chǔ)，隨后輔以適量的溶藻細(xì)菌進(jìn)行消殺，以有效發(fā)揮物理法和生物法的優(yōu)勢(shì)，實(shí)現(xiàn)快速而持久的抑藻效果．

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

主要儀器：浮游植物分類熒光儀（PHYTO-PAM，WALZ，德國(guó)），恒溫?fù)u床（上海一恒），藻細(xì)胞培養(yǎng)箱（同田生化），細(xì)菌培養(yǎng)箱（蘇州凈化），高溫高壓滅菌鍋（上海儀化），pH計(jì)（寧波新天），顯微鏡（Zeiss，LSM 510，德國(guó)），以及超凈工作臺(tái)等（蘇州凈化）．

主要試劑：NaNO3，NaH2PO4，F(xiàn)eCl3，EDTA，Biotin VH，VB12，HCl，NaCl，CuSO4·5H2O，ZnSO4·7H2O，CaCl2·6H2O，MgCl2·4H2O，Na2MoO4·2H2O，鹽酸硫銨素，十六烷基三甲基溴化銨，三丁基十六烷基溴化磷，胰蛋白胨，酵母提取物，瓊脂粉等．上述試劑除特殊說(shuō)明外，均為分析純（純度≥99.0%）．試劑主要從Sigma（上海）、國(guó)藥（上海）和麥克林（天津）等公司購(gòu)得．

1.2 試驗(yàn)藻種、培養(yǎng)方法和葉綠素測(cè)定

實(shí)驗(yàn)中選擇深圳海域常見(jiàn)的赤潮爆發(fā)藻——錐狀斯氏藻（，從深圳鹽田港海域中分離獲得），該藻屬于甲藻，廣泛分布于近岸和河口，爆發(fā)性增殖時(shí)可以引起水體局部缺氧，威脅海洋生物及水產(chǎn)養(yǎng)殖．

藻細(xì)胞培養(yǎng)使用的是f/2培養(yǎng)基，具體配方為（每升海水中含無(wú)機(jī)鹽含量）：NaNO3 37.5 mg，NaH2PO4 2.5 mg，F(xiàn)e-EDTA 2.5 mg（FeCl31.6 g+ EDTA 0.9 g），鹽酸硫銨素5 μg，Biotin VH 0.025 μg，VB120.025 μg，CuSO4·5H2O 0.0098 μg，ZnSO4·7H2O 0.022 μg，CaCl2·6H2O 0.01 μg，MgCl2·4H2O 0.180 μg，Na2MoO4·2H2O 0.0063 μg，培養(yǎng)溫度（21±1）℃、光照強(qiáng)度3000Lx、光暗比12h:12h．藻細(xì)胞在250 mL（裝液量150 mL）錐形瓶中進(jìn)行．根據(jù)錐狀斯氏藻的生產(chǎn)周期曲線，待錐狀斯氏藻生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期（約為第1次接種后的6~8d），取上層藻液移至新的錐形瓶中進(jìn)行試驗(yàn)．

藻細(xì)胞葉綠素和光合效率的測(cè)定采用浮游植物分類熒光儀（PHYTO-PAM）進(jìn)行．具體操作如下，取2mL藻液裝入測(cè)量杯，對(duì)藻體進(jìn)行5min暗適應(yīng)，打開(kāi)Phyto-PAM調(diào)制脈沖熒光儀波長(zhǎng)為520nm強(qiáng)度為0.1 μmol/(m2?s)的褐色檢測(cè)光．測(cè)量過(guò)程由Phytowin軟件控制，開(kāi)啟測(cè)量光（ML），待光信號(hào)穩(wěn)定后打開(kāi)飽和脈沖鍵，記錄Fv/Fm值，即為光合效率yield值．葉綠素水平（ChII）直接從儀器上讀?。?/p>

1.3 改性粘土的制備

本次試驗(yàn)選用鈉性蒙脫土作為粘土[15]，選擇2種改性劑：十六烷基三甲基溴化銨和三丁基十六烷基溴化磷進(jìn)行改性粘土的制備．

改性粘土的制備：取100mg的改性劑，加入10mL1%的稀鹽酸溶液，攪拌或震蕩使改性劑溶解，隨后加入過(guò)濾海水100mL，得到1mg/mL的改性劑鹽酸溶液，再稱取1g鈉性蒙脫土，邊攪拌邊加入100mL的改性劑鹽酸溶液，即配置出改性粘土[12]．相比以往以超純水為溶劑的做法，我們以海水為溶劑進(jìn)行配置，目的是擴(kuò)大改性粘土的使用范圍；其次是制備的改性粘土能更好的匹配海水環(huán)境．

1.4 抑藻菌株的分離與鑒定

菌株分離與篩選來(lái)自藻際共生微生物，菌株培養(yǎng)方法使用海水2216E培養(yǎng)基；藻際微生物分離自深圳東涌野外爆發(fā)的赤潮樣品．使用2216E培養(yǎng)基分離培養(yǎng)獲得單克隆菌株，純化后與藻細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，檢測(cè)藻細(xì)胞的葉綠素含量，挑選有抑制能力的菌株．試驗(yàn)中分離得到兩種具有較強(qiáng)抑藻能力的菌株G4和J8．

細(xì)菌的鑒定采用16sRNA方法進(jìn)行．提取菌株的總DNA作為基因擴(kuò)增模板，采用通用引物進(jìn)行擴(kuò)增．正向引物為：27f: 5'-AGAGTTTGATCMTGG CTCAG-3'；反向引物為：1492R: 5'-TACGGYTACC TTTGTTACGACTT-3'，于30μL 反應(yīng)體系中進(jìn)行，反應(yīng)體系如下：H2O（17μL），Buffer（3μL），d NTP （2μL），Primer1（3μL），Primer2（3μL），DNA模板（1μL），以及Taq酶（1μL）．反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5 min；95℃變性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸1min，共35個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸10 min．PCR 產(chǎn)物用1%凝膠電泳檢測(cè)，電泳條件：3μL樣品+1%瓊脂糖凝膠，Marker條帶組成：100、250、500、750、1000、2000、3000和5000bp．測(cè)序工作由北京六合華大基因科技有限公司完成；序列分析通過(guò)比對(duì)美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)（http://www.ncbi.nlm.nih.gov）完成．

鑒于16s rDNA序列同源性分析結(jié)果，鑒定的2株菌株結(jié)果為：蠟樣芽孢桿菌，簡(jiǎn)稱G4；紡錘形賴氨酸芽孢桿菌，簡(jiǎn)稱J8．兩者的序列比對(duì)相似性均為99%．

1.5 改性粘土對(duì)藻細(xì)胞的沉降作用

取實(shí)驗(yàn)室傳代培養(yǎng)的藻種 (初始密度為5.4×105cells/mL)，分裝于21個(gè)100mL的錐形瓶中（每瓶裝液50mL）．試驗(yàn)設(shè)3個(gè)測(cè)試組（每組3個(gè)平行），3個(gè)測(cè)試組分別為：空白組:（不含改性粘土和抑藻細(xì)菌）；實(shí)驗(yàn)組①: 十六烷基溴化銨改性粘土，濃度分別為15mg/mL（高）、10mg/mL（中）、5mg/mL（低）；實(shí)驗(yàn)組②: 三丁基十六烷基溴化磷改性粘土，濃度分別為：30mg/mL（高）、20mg/mL（中）、10mg/mL（低）．上述分組每個(gè)濃度3個(gè)平行．

將以上分組的藻細(xì)胞培養(yǎng)瓶震蕩搖勻，于（21±1）℃、光照強(qiáng)度3000Lx、光暗比12h:12h環(huán)境下培養(yǎng)觀察，每24h觀察藻液澄清度和沉降程度．

1.6 改性粘土對(duì)藻細(xì)胞光合效率和葉綠素的影響

取實(shí)驗(yàn)室傳代培養(yǎng)的藻種（初始密度為5.4×105cells/mL），分裝于9個(gè)100mL的錐形瓶中（每瓶裝液50mL）．試驗(yàn)設(shè)3個(gè)測(cè)試組（每組3個(gè)平行）．3個(gè)測(cè)試組分別為空白組（不含改性粘土和抑藻細(xì)菌）、實(shí)驗(yàn)組1（含10mg/mL三丁基十六烷基溴化磷改性粘土）、實(shí)驗(yàn)組2（含10mg/mL十六烷基溴化銨改性粘土）．將以上細(xì)胞培養(yǎng)瓶震蕩搖勻，于（21±1）℃、光照強(qiáng)度3000Lx、光暗比12h:12h環(huán)境下培養(yǎng)觀察，每24h監(jiān)測(cè)液體中藻細(xì)胞濃度和葉綠素含量．

1.7 改性粘土與抑藻菌的耦合抑藻效果

取實(shí)驗(yàn)室傳代培養(yǎng)的藻種（初始密度為5.4×105cells/mL），分裝于9個(gè)100mL的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中（每瓶裝液50mL）．試驗(yàn)設(shè)3個(gè)測(cè)試組（每組3個(gè)平行）．3個(gè)測(cè)試組分別為空白組（不含改性粘土和抑藻細(xì)菌）、實(shí)驗(yàn)組1（含10mg/mL十六烷基溴化銨改性粘土和G4細(xì)菌）、實(shí)驗(yàn)組2（含10mg/mL十六烷基溴化銨改性粘土和J8細(xì)菌），菌液終濃度為1×106cells/mL．將以上細(xì)胞培養(yǎng)瓶輕輕搖勻，于（21±1）℃、光照強(qiáng)度3000Lx、光暗比12h:12h環(huán)境下培養(yǎng)觀察，每24h監(jiān)測(cè)液體中藻細(xì)胞濃度和葉綠素含量．

2 結(jié)果與討論

2.1 改性粘土對(duì)藻細(xì)胞的沉降作用

改性粘土對(duì)藻細(xì)胞有明顯的絮凝作用，隨著濃度的提高其絮凝效果更顯著．從表1中可以看出，十六烷基溴化銨改性粘土在高濃度（15mg/mL）時(shí)沉降作用最為明顯，沉降率90%；中濃度（10mg/mL）時(shí)次之，沉降率70%；低濃度（5mg/mL）效果最不顯著，沉降率不足50%．這一結(jié)果表明十六烷基溴化銨的加入對(duì)藻細(xì)胞有明顯的沉降作用，且呈現(xiàn)劑量依賴性．相比于十六烷基溴化銨，三丁基十六烷基溴化磷對(duì)藻細(xì)胞的沉降效果如表2所示，它對(duì)藻細(xì)胞的沉降率也呈現(xiàn)劑量依賴性，但對(duì)藻類的沉降效果略遜于十六烷基溴化銨．

文獻(xiàn)[11]使用蛭石（vermiculite）抑制銅綠微囊藻，證實(shí)在3h內(nèi)藻的去除率可達(dá)80%以上．文獻(xiàn)[16]使用鑭膨潤(rùn)土（lanthanum-bentonite）抑制藻類，發(fā)現(xiàn)它具有更廣譜的抑藻效果，對(duì)甲藻、硅藻和部分綠藻都有作用，這主要得益于鑭膨潤(rùn)土對(duì)磷的吸附能力，從而高效地控制藻類生長(zhǎng)．本次試驗(yàn)中十六烷基溴化銨的主要作用在于絮凝作用，將藻細(xì)胞吸附形成局部高濃度，加速藻的沉降，該作用可在24h后體現(xiàn)，并可維持超過(guò)120h．相比于蛭石和鑭膨潤(rùn)土，粘土物質(zhì)的沉降作用有一定的時(shí)效性，它沒(méi)有對(duì)藻類進(jìn)行徹底殺滅，存在反彈的可能．因此，該類方法宜作為控藻的第一步，需配合生物消殺法一起使用[17]．

2.2 改性粘土對(duì)藻細(xì)胞光合效率和葉綠素的影響

基于表1和表2的結(jié)果，從整體抑藻和劑量成本考慮，對(duì)于2種改性粘土，我們均選擇了中濃度（10mg/mL）進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)．添加2種改性粘土到培養(yǎng)液當(dāng)中，對(duì)藻類抑制的結(jié)果如圖1所示．從圖1可以看出早期十六烷基溴化銨改性粘土對(duì)藻細(xì)胞有明顯抑制作用，其光合效率（Fv/Fm）值在24 h后降到了0.07，但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)藻細(xì)胞Fv/Fm值有明顯的反彈，至120h后與對(duì)照組基本相似（Fv/Fm值分別為0.52和0.51）．而三丁基十六烷基溴化磷改性粘土對(duì)藻細(xì)胞的光合效率沒(méi)有很明顯的抑制作用，其Fv/Fm值與對(duì)照組基本持平．添加2種改性粘土的藻液中，對(duì)藻細(xì)胞葉綠素的影響如圖2所示．我們觀察到光合效率的下降主要是由于改性粘土的存在影響了藻對(duì)光的吸收，這與文獻(xiàn)[18]的結(jié)果一致，他們也證實(shí)改性粘土能顯著降低亞歷山大藻（）的光合效率，并減少藻毒素的分泌．

表1 十六烷基溴化銨對(duì)藻細(xì)胞的沉降效果

表2 三丁基十六烷基溴化磷對(duì)藻細(xì)胞的沉降效果

圖1 改性粘土對(duì)藻細(xì)胞光合效率的影響

從圖2可以看出實(shí)驗(yàn)組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期中（24~168h，間隔24h），葉綠素a的含量為208.31~286.82 μg·L-1．當(dāng)添加三丁基十六烷基溴化磷改性粘土后，葉綠素濃度在24h后有明顯降低，其值為107.23 μg·L-1；而從48h后，葉綠素的降低效果出現(xiàn)反彈，其值變化幅度為：176.41~234.93 μg·L-1．相比之下十六烷基溴化銨改性粘土對(duì)藻細(xì)胞葉綠素有明顯的抑制作用，與對(duì)照相比在整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期中降低了20倍以上．值得一提的是三丁基十六烷基溴化磷是一種中性化合物，對(duì)環(huán)境低毒，不會(huì)造成二次污染．文獻(xiàn)[19]也強(qiáng)調(diào)粘土的使用應(yīng)注重生物毒性和非生物毒性，他們證實(shí)了粘土類在水庫(kù)的生態(tài)修復(fù)中不會(huì)引起魚(yú)類的急性毒性，也不會(huì)造成組織學(xué)傷害，是一種環(huán)境友好型方法．

綜合圖1和圖2的結(jié)果，我們可以看到十六烷基溴化銨改性粘土的效果更好，因而在后續(xù)的耦合實(shí)驗(yàn)中，我們選擇了該種改性粘土進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)．

2.3 改性粘土與抑藻細(xì)菌的耦合抑藻效果

耦合法使用后對(duì)藻類抑制的結(jié)果如圖3所示．對(duì)照組光合效率Fv/Fm值在整個(gè)試驗(yàn)周期中的變化幅度在0.38-0.56之間，而2個(gè)實(shí)驗(yàn)組“十六烷基溴化銨改性粘土+G4”和“十六烷基溴化銨改性粘土+J8”對(duì)藻細(xì)胞的光合效率有明顯的抑制作用，其Fv/Fm值在0.01~0.02的范圍，部分時(shí)間點(diǎn)（如72h和96h）光合效率降低到0．

耦合法對(duì)藻類葉綠素含量的影響結(jié)果如圖4所示．通過(guò)圖4可以看出改性粘土和菌種（G4和J8）的聯(lián)合使用對(duì)藻細(xì)胞有明顯抑制作用，持續(xù)抑藻時(shí)間可達(dá)168h，未見(jiàn)藻細(xì)胞數(shù)量的反彈．從整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期（24~168h，間隔24h）來(lái)看，對(duì)照組葉綠素的含量在205.2~340.63μg/L．當(dāng)耦合使用后，葉綠素濃度在24h后有明顯降低，其值在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組中的范圍為68.59-95.2μg/L；而從48h后，葉綠素的降低效果出現(xiàn)保持，至實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)時(shí)其葉綠素值低于20μg/L水平，且全程未見(jiàn)反彈．

圖3 耦合法對(duì)藻細(xì)胞光合效率Fv/Fm的影響

圖4 耦合法對(duì)藻細(xì)胞葉綠素a的影響

圖5 空白組（a）與耦合組（b）藻細(xì)胞的形態(tài)特征

此外，我們通過(guò)顯微觀察比較了實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組藻細(xì)胞的形態(tài)特征（圖5）．從圖5可知，對(duì)照組藻細(xì)胞形態(tài)完整，細(xì)胞輪廓清晰，著色均勻；而耦合組藻細(xì)胞出現(xiàn)裂解、細(xì)胞空殼化嚴(yán)重，形態(tài)碎裂，大部分細(xì)胞被溶藻細(xì)菌G4或J8殺滅．

從上述的結(jié)果可以看出，耦合溶藻菌的使用后，抑藻效果得到明顯加固，藻類出現(xiàn)裂解、空泡化和殘缺化，抑藻作用不反彈．文獻(xiàn)[20]發(fā)現(xiàn)改性粘土的作用在于團(tuán)聚藻細(xì)胞形成局部高密度而沉降藻類，它不能對(duì)藻細(xì)胞產(chǎn)生直接殺滅；需配合生物法或化學(xué)法來(lái)進(jìn)行二次消殺，以徹底控制藻類的再次滋生．文獻(xiàn)[21]采用船載實(shí)驗(yàn)的方法證實(shí)了文獻(xiàn)[20]的觀點(diǎn)，提出了微生物耦合法、紫外光照耦合法、天然產(chǎn)物耦合法等多種可能．本實(shí)驗(yàn)采用的是微生物耦合法，2種溶藻菌株菌來(lái)自藻類共生菌，不會(huì)帶來(lái)外源物種入侵的風(fēng)險(xiǎn)，也不會(huì)對(duì)本土環(huán)境造成生態(tài)沖擊，是一種相對(duì)安全的方法．

3 結(jié) 論

1）改性粘土對(duì)藻細(xì)胞有明顯的絮凝作用，且呈現(xiàn)劑量依賴性．十六烷基溴化銨的抑制作用優(yōu)于三丁基十六烷基溴化磷．

2）改性粘土和抑藻菌株（G4和J8）的聯(lián)合使用對(duì)藻細(xì)胞有明顯抑制作用，持續(xù)抑藻時(shí)間可達(dá)168h，未見(jiàn)葉綠素a含量的明顯反彈．

3）實(shí)驗(yàn)篩選的抑藻菌株來(lái)源于自然環(huán)境，將其與物理法耦合使用，不會(huì)帶來(lái)外源物種的侵襲風(fēng)險(xiǎn)，且可以將物理法的抑藻效果鞏固和持續(xù)，是一種環(huán)保型赤潮藻防控方法．

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A Method to Controlby Combining the Modified Clay and Algicidal Bacteria

WANG Yan1, WU Fan1, ZHANG Qin2

（）

In order to develop a highly efficient and environment-friendly algal inhibition method, the effect of two kinds of modified clay (sixteen alkyl three methyl ammonium bromide and three butylsixteen alkyl bromide) combined with algae inhibition bacteria on killingwas studied. The result showed that the inhibitory effect of sixteen alkyl three methyl ammonium bromide was better than that of three butyl sixteen alkyl bromide when the modified clay was used alone, but only in the initial stage (48 hours). However, the algae cells were not completely removed. When the modified clay was coupled with algae inhibition bacteria (G4 andJ8), the effect of algae inhibition was obvious and persistent, and the effective algal inhibition time could last up to 168 hours without obvious rebound of chlorophyll concentration. Therefore, our study shows that the combined use of methyltrimethyl -ammonium bromide modified clay and algal inhibition bacteria can be used as a potential environment-friendly method to control harmful alage.

modified clay; algicidal bacteria;; harmful alage

10.13899/j.cnki.szptxb.2019.01.012

2018-07-11

深圳市科技創(chuàng)新委計(jì)劃資助項(xiàng)目（JCYJ20170817160708491，CYZZ20170331112457200）

王艷（1965-），女，吉林人，碩士，副教授，主要研究方向：自然與哲學(xué)．

X55

A

1672-0318（2019）01-0058-06