郭阿莉

(山西中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院,山西 太原030024)

地黃為玄參科植物地黃Reh mannia gl utinosa Libosch.的塊根,最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。關(guān)于地黃的炮制最早可以追溯到漢代,《金匱要略》中記載：“生地黃二斤咀,蒸之如斗米飯久,以銅器盛其汁；更絞地黃汁,和,分服?！薄独坠谥苏摗酚性疲骸胺彩股攸S去皮,瓷鍋上柳木甑蒸之,攤令氣歇,拌酒再蒸,又出令干?！笔紕?chuàng)以酒為輔料拌蒸地黃?！肚Ы鹨矸健吩唬骸昂蚝们缛毡阍缯糁?即暴于日中,夜置汁中以物蓋之,明朝又蒸。”對(duì)地黃的炮制提出了進(jìn)一步要求?！蹲C類本草》曰：“取肥地黃三、二十斤……搗絞取汁,投銀、銅器中……飯上蒸三、四過(guò)……又曝使汁盡。其地黃當(dāng)光黑如漆,味甘如飴糖,須瓷器內(nèi)收之?！碧岢隽恕肮夂谌缙?味甘如飴”的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),一直沿用至今?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》有酒燉和蒸兩種炮制方法,《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》有酒燉、酒與砂仁拌燉和酒蒸。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,地黃的炮制方法也在不斷改進(jìn)。

臨床常用的地黃飲片規(guī)格有：鮮地黃、生地黃、干地黃、熟地黃、生地黃炭和熟地黃炭。清·《本草便讀》記載：“生地未經(jīng)蒸曬,即今之所謂鮮生地,色黃,味甘,性寒,專入脾胃,散血清熱。”宋·《本草圖經(jīng)》記載：“地黃,二月、八月采根陰干……陰干者,是生地黃?！泵鳌ぁ侗静菝审堋酚涊d：“生干地黃,味苦、甘……日干者平,火干者溫,蒸干者溫補(bǔ),生干者平宜?！薄侗静輬D經(jīng)》記載：“二月、八月采根,蒸三、二日令爛,暴干,謂之熟地黃?！笔斓攸S經(jīng)炮制后由寒轉(zhuǎn)溫,味由苦轉(zhuǎn)甘,功效由清轉(zhuǎn)補(bǔ),多用于滋陰補(bǔ)血、填精益髓?？梢?jiàn)炮制方法不同,其性味迥異,功效也不同。

1 不同的炮制方法對(duì)地黃化學(xué)成分的影響

1972年日本學(xué)者Kitagawa首先從地黃中分離得到了梓醇、甘露糖和蔗糖3種成分。目前從地黃中分離出了近百個(gè)化學(xué)成分,主要為環(huán)烯醚萜苷類、苯乙醇苷類、糖類、氨基酸類、呋喃醛衍生物、有機(jī)酸及微量元素等[1]。

1.1 環(huán)烯醚萜苷類 環(huán)烯醚萜苷類化合物為蟻臭二醛的縮醛衍生物,具有半縮醛及環(huán)戊烷環(huán)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),因其半縮醛的性質(zhì)不穩(wěn)定,故多以環(huán)烯醚萜苷類成分存在于植物體內(nèi),主要有梓醇、桃葉珊瑚苷、密力特苷、二氫梓醇、乙酰梓醇、益母草苷等[2]。梓醇、益母草苷等穩(wěn)定性差,受熱易水解,水解速度與糖的數(shù)量有關(guān),單糖苷(梓醇)＞雙糖苷(密力特苷)＞三糖苷(地黃苷D)[3]。因炮制方法及輔料不同,炮制品中梓醇含量依次為生地黃＞熟地黃＞酒熟地黃＞蒸熟地黃＞砂仁制地黃＞生地黃炭＞熟地黃炭。不同地黃炮制品梓醇的平均含量依次為：鮮地黃(4.07%)＞生地黃(1.53%)＞熟地黃(0.267%),或許與梓醇在加熱條件下易水解、氧化有關(guān)[4]。隨著地黃蒸制次數(shù)增多,梓醇的含量下降,5-羥甲基糠醛的含量增加,且梓醇的減少與5-羥甲基糠醛的增加在一定范圍內(nèi)呈對(duì)應(yīng)關(guān)系[5]。

1.2 苯乙醇苷類 地黃中的苯乙醇苷類多含苯乙氧基和苯乙酰基,二者多存在于生地黃中,因此兩種化學(xué)物質(zhì)加工炮制易水解,故熟地黃中含量較少。地黃中一些成分含有酯鍵,如毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷。若在蒸制過(guò)程中,p H呈弱酸性,毛蕊花糖苷發(fā)生可逆的酯化反應(yīng)后可轉(zhuǎn)化為異毛蕊花糖苷,毛蕊花糖苷平均含量依次為：鮮地黃(0.243 0%)＞生地黃(0.053 1%)＞熟地黃(0.025 7%)[6-8]。

1.3 糖類 地黃中的糖類占比較大,類別包括單糖、寡糖和多糖。常見(jiàn)的有葡萄糖、蔗糖、果糖、水蘇糖、棉子糖、甘露三糖、毛蕊花糖及半乳糖。多糖的含量：生地黃(16.59%)＞熟地黃(3.33%),可能因?yàn)樵谡糁七^(guò)程中部分多糖隨水分而流失,部分水解成為單糖和寡糖。研究證實(shí),熟地黃在清蒸和酒燉過(guò)程中還原糖含量在一定范圍內(nèi)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,清蒸22 h和酒燉48 h含量最高[9]。在地黃炮制后總糖量無(wú)明顯差別,但熟地黃中的水蘇糖和棉籽糖明顯降低,果糖含量增加。對(duì)生地黃和熟地黃中的單糖(果糖、葡萄糖、半乳糖)及寡糖(蔗糖、蜜二糖、棉子糖、甘露三糖、水蘇糖、毛蕊花糖)進(jìn)行定量分析發(fā)現(xiàn)：熟地黃中果糖、葡萄糖、蜜二糖、甘露三糖含量高于生地黃,其余糖含量低于生地黃。通過(guò)高效液相色譜技術(shù)發(fā)現(xiàn),在地黃烘焙過(guò)程中,水蘇糖分解成了棉籽糖和半乳糖,蒸制后水蘇糖、棉籽糖發(fā)生了脫果糖反應(yīng),從而使果糖含量增加[10]。

1.4 呋喃醛衍生物 地黃中大多數(shù)化學(xué)成分在炮制過(guò)程中處于下降趨勢(shì),但是呋喃醛衍生物(如5-羥甲基糠醛)經(jīng)炮制后含量不降反升。生地黃中5-羥甲基糠醛含量為0.01%,而蒸制60 h后,其含量增加到0.36%[11-12]。經(jīng)炮制后5-羥甲基糠醛含量增加可能為：醛糖類成分與氨基酸在弱酸性及高溫條件下發(fā)生Maillar d反應(yīng)(羰氨反應(yīng)),也可能是在弱酸性及高溫條件下,己糖脫水而得。研究發(fā)現(xiàn),5-[α-D-吡喃葡萄糖基-(1-6)-α-D-葡聚糖-乙基]-2-呋喃羧醛僅能在熟地黃中檢測(cè)到,生地黃中檢測(cè)不到,可以作為區(qū)分熟地黃的標(biāo)志物[13]。

1.5 氨基酸類 鮮地黃中含有二十幾種氨基酸,其中精氨酸含量最高。生地黃中游離氨基酸有15種,6種為人體必需氨基酸,按含量排序依次為丙氨酸＞谷氨酸＞纈氨酸＞精氨酸＞天冬氨酸＞異亮氨酸＞亮氨酸＞脯氨酸＞酪氨酸＞絲氨酸＞甘氨酸＞苯丙氨酸＞蘇氨酸＞胱氨酸＞賴氨酸。利用氨基酸自動(dòng)分析儀分別測(cè)定鮮地黃、生地黃及熟地黃中總氨基酸和游離氨基酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù),結(jié)果顯示：經(jīng)加工炮制后地黃中總氨基酸和游離氨基酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均降低,特別是精氨酸、賴氨酸等堿性氨基酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著降低[14]。

1.6 微量元素 對(duì)地黃中的微量元素含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果顯示：鮮葉及鮮根中K的含量最高,Mg、Ca、P的含量位居第二,Na、Fe的含量居第三,Cu、Al、Si、B、Sr、Zn含量次之,Ba、Cr、Ti、Ni、Co含量最少；干葉中Fe和Cu的含量比干根中高,對(duì)干地黃中的微量元素含量進(jìn)行排序,依次為：K＞Mg＞Ca＞Fe＞Na＞Mn＞Zn＞Cu,K、Mg、Ca、Na的含量大于500 pp m,Sr、Cr、Co、Pb的含量小于5 pp m,酒蒸和清蒸后熟地黃中微量元素的含量基本一致。干地黃與熟地黃的水煎劑微量元素溶出率比較：Ca、Mg的溶出率基本一致,Cl、K、Na、Sr、Mn的溶出率熟地黃較低,Cu的溶出率熟地黃稍高,加酒燉制后的熟地黃水煎劑Zn、Al、Fe的溶出率升高[15]。

2 不同的炮制方法對(duì)地黃藥理作用的影響

2.1 血液系統(tǒng) 由鮮地黃或生地黃組成的增液湯都能降低糖尿病大鼠的血糖和血脂,且水提取物和醇提取物無(wú)明顯差異,而由熟地黃組成的增液湯,其水提取物和醇提取物對(duì)血糖和血脂作用均不明顯[16]。生地黃、熟地黃均可促進(jìn)血虛動(dòng)物紅細(xì)胞及血紅蛋白的恢復(fù),加快骨髓造血細(xì)胞的增殖和分化,可能與地黃中的地黃苷A單體對(duì)骨髓的造血功能及外周血白細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),地黃苷A對(duì)于白細(xì)胞減少癥模型小鼠有明顯治療作用[17]。鮮地黃能夠減輕血熱出血大鼠的熱象,改善異常的血流變及凝血系統(tǒng)指標(biāo)[18]。生地黃多糖能增強(qiáng)腦細(xì)胞抗氧化能力,改善腦缺血細(xì)胞能量代謝障礙。熟地黃多糖對(duì)血虛模型小鼠紅細(xì)胞和血紅蛋白有保護(hù)作用,且優(yōu)于熟地黃非多糖部分[19]。

2.2 免疫系統(tǒng) 地黃中的地黃苷A單體可增強(qiáng)體液免疫和細(xì)胞免疫,對(duì)白細(xì)胞減少模型小鼠有明顯治療作用。鮮地黃水煎液可增強(qiáng)陰虛小鼠的非特異性免疫和T、B淋巴細(xì)胞的功能[20]。生地黃水煎液可加速脾臟淋巴細(xì)胞DNA和蛋白質(zhì)的生物合成,增加白介素-2的產(chǎn)生。生地黃多糖不僅促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖,還可增加干擾素-γ濃度,刺激白介素-2的分泌,通過(guò)調(diào)節(jié)樹(shù)突細(xì)胞刺激T細(xì)胞的增殖,提高對(duì)抗原的表達(dá)能力。熟地黃水煎液可增加小鼠外周白細(xì)胞數(shù)量[21]。熟地黃中的磷酸二羥丙酮可激活巨噬細(xì)胞,從而阻斷ERK1/2及NF-KB的信號(hào)通路,抑制炎癥介質(zhì)產(chǎn)生,熟地黃中的毛蕊花糖苷對(duì)腎毒血清腎炎小鼠有良好的治療作用[22]。

2.3 其他方面 地黃中的寡糖具有調(diào)節(jié)糖尿病大鼠糖代謝紊亂、降低四氧嘧啶及調(diào)節(jié)腸道菌群的功能；生地黃水提取液可以改善糖尿病腎病大鼠的癥狀；生地黃多糖可有效改善糖尿病大鼠的高血糖癥狀,可能與生地黃的抗氧化作用有關(guān)[23]。低分子量地黃多糖對(duì)Lewis肺癌小鼠有抑制作用。生地黃、熟地黃水提取液可抑制人類肝癌細(xì)胞增殖,促使其凋亡[24]。生地黃中的梓醇可抑制T24膀胱癌細(xì)胞增殖[25]。地黃多糖b可扭轉(zhuǎn)細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞活力的下降和部分改善IL-2的分泌能力[26]。

綜上所述,不同的炮制方法使地黃的化學(xué)成分產(chǎn)生了質(zhì)或量的改變,而這種質(zhì)或量的改變直接或間接影響其藥理作用及臨床功效。所以,地黃加工炮制過(guò)程中其成分轉(zhuǎn)化與其藥效的變化有何對(duì)應(yīng)關(guān)系還有待進(jìn)行深入的研究。以熟地黃為例,“甜如飴,黑如漆”這種寬泛的感官指標(biāo)不能作為評(píng)判中藥炮制質(zhì)量的唯一標(biāo)準(zhǔn),中藥的炮制急需客觀評(píng)判指標(biāo)的加入。