林昌岫 金成華 黃京華

【摘 要】目的：刺五加多糖（ASPS）對Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制的研究；方法：采用C57BL/6模式標(biāo)準(zhǔn)建立Lewis實(shí)體瘤模型小鼠80只，隨機(jī)分為生理鹽水組，ASPS高、中、低濃度組，在灌藥28天后進(jìn)行瘤體稱重，檢測TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平情況；結(jié)果：ASPS較生理鹽水可顯著抑制荷瘤小鼠腫瘤重量，隨著藥物濃度的增大，腫瘤重量也越小，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05；ASPS較生理鹽水可顯著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平，隨著藥物濃度的增大，其水平也越高，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。結(jié)論：刺五加多糖可顯著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤體大小，提高其免疫功能，值得臨床進(jìn)一步研究。

【關(guān)鍵詞】 刺五加多糖；Lewis；荷瘤小鼠；抗腫瘤；免疫調(diào)節(jié)；機(jī)制研究

【中圖分類號】R365 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號】1005-0019（2018）17-073-02

肺癌是臨床上較為常見的惡性腫瘤，5年生存率較低，抗化療藥物治療副作用大，易耐藥，而中藥在抗腫瘤方面具有其獨(dú)特的優(yōu)勢。刺五加具有益氣健脾、安神、通絡(luò)等功能[1-3]。刺五加多糖是刺五加提取的免疫活性物質(zhì)，具有抗腫瘤的功效。本研究探討刺五加多糖對Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制的研究，現(xiàn)匯報如下.

1 資料與方法

1.1 試劑與動物 采用C57BL/6模式標(biāo)準(zhǔn)建立Lewis實(shí)體瘤模型小鼠80只，隨機(jī)分為生理鹽水組，ASPS高、中、低濃度組，在灌藥28天后進(jìn)行瘤體稱重。ASPS（購自陜西慈緣生物技術(shù)有限公司） 純度85%；無菌生理鹽水備用；采用ELISA 檢測TNF-α、IL-1β 和 IL-6，試劑盒購自上海普欣生物科技技術(shù)有限公司。C57BL /6 小鼠80只，7-8 周齡，體重（18.4±2.7） g， 購自上海實(shí)驗(yàn)動物中心。Lewis鼠源性肺腺癌細(xì)胞株購自凱學(xué)生物科技（上海）有限公司。

1.2 方法

1.2.1 Lewis 實(shí)體型荷瘤小鼠構(gòu)建 Lewis 肺癌細(xì)胞株擴(kuò)大培養(yǎng)，對數(shù)期生長Lewis細(xì)胞，稀釋成106 個 /ml 細(xì)胞懸液，接種小鼠右側(cè)腋窩下0. 2 ml 。接種一周后腫瘤平均直徑5mm 造模成功。

1.2.2 模型動物 80只Lewis 荷瘤小鼠隨機(jī)分成4 組，分為生理鹽水組、ASPS 低劑量50mg /（ kg·d）、中劑量100 mg /（ kg·d）、高劑量[200 mg /（ kg·d） ]。接種 Lewis細(xì)胞后次日開始灌胃，每天觀察小鼠毛色、食欲、活動等。連續(xù)給藥28天后，稱量小鼠體重，剝離腫瘤，分離及提取組織液并采用ELISA 檢測TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平[4]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS20.0軟件錄入數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較分析采用t檢驗(yàn)，P<0.05判斷差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ASPS對Lewis荷瘤小鼠腫瘤重量、相關(guān)免疫調(diào)節(jié)因子水平的情況 ASPS較生理鹽水可顯著抑制荷瘤小鼠腫瘤重量，隨著藥物濃度的增大，腫瘤重量也越小，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05；ASPS較生理鹽水可顯著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平，隨著藥物濃度的增大，其水平也越高，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。

3 討論

刺五加為是一味珍貴的中國傳統(tǒng)中藥，屬于五加科類植物用藥[5]?！侗静菥V目》具有益氣健脾、補(bǔ)腎、通經(jīng)絡(luò)的療效，其主要有效活性成分ASPS具有較為廣泛的抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能、抗氧化等功能，分為水溶性及堿溶性多糖，在抑制腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移方面具有一定的效果。相關(guān)研究也提示[6]，ASPS 可激活 NK、巨噬細(xì)胞，調(diào)節(jié)T、B細(xì)胞的功能，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能， 增加荷瘤小鼠巨噬細(xì)胞數(shù)量。而目前關(guān)于ASPS在Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤及免疫功能的相關(guān)研究報答則較少。

本研究觀察ASPS對Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制的研究。其結(jié)果顯示：ASPS較生理鹽水可顯著抑制荷瘤小鼠腫瘤重量，隨著藥物濃度的增大，腫瘤重量也越小，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05；ASPS較生理鹽水可顯著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平，隨著藥物濃度的增大，其水平也越高，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。因此，刺五加多糖可顯著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤體大小，提高其免疫功能。本研究發(fā)現(xiàn)ASPS可顯著抑制小鼠瘤體大小，隨著藥物濃度的增大，抑制越大，這可能與其上調(diào) Bax、p53功能，促進(jìn)瘤體細(xì)胞的凋亡，抑制細(xì)胞的增殖。同時也發(fā)現(xiàn)，ASPS可顯著提高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平，可增強(qiáng)免疫功能，抑制瘤體細(xì)胞的增殖。TNF-α可直接殺滅腫瘤細(xì)胞，由單核巨噬細(xì)胞分泌，IL-1β、IL-6可調(diào)節(jié)B、T細(xì)胞的增殖，促進(jìn)體內(nèi)殺傷細(xì)胞的分化及增殖[7-8]。

綜上所述，刺五加多糖可顯著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤體大小，提高其免疫功能，值得臨床研究。

參考文獻(xiàn)

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