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        刺五加多糖的功能研究及其對荷瘤小鼠的抗腫瘤作用分析

        2018-12-28 10:41:52林昌岫金成華黃京華
        健康大視野 2018年17期
        關(guān)鍵詞:機(jī)制研究

        林昌岫 金成華 黃京華

        【摘 要】目的:刺五加多糖(ASPS)對Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制的研究;方法:采用C57BL/6模式標(biāo)準(zhǔn)建立Lewis實(shí)體瘤模型小鼠80只,隨機(jī)分為生理鹽水組,ASPS高、中、低濃度組,在灌藥28天后進(jìn)行瘤體稱重,檢測TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平情況;結(jié)果:ASPS較生理鹽水可顯著抑制荷瘤小鼠腫瘤重量,隨著藥物濃度的增大,腫瘤重量也越小,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;ASPS較生理鹽水可顯著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平,隨著藥物濃度的增大,其水平也越高,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。結(jié)論:刺五加多糖可顯著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤體大小,提高其免疫功能,值得臨床進(jìn)一步研究。

        【關(guān)鍵詞】 刺五加多糖;Lewis;荷瘤小鼠;抗腫瘤;免疫調(diào)節(jié);機(jī)制研究

        【中圖分類號】R365 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號】1005-0019(2018)17-073-02

        肺癌是臨床上較為常見的惡性腫瘤,5年生存率較低,抗化療藥物治療副作用大,易耐藥,而中藥在抗腫瘤方面具有其獨(dú)特的優(yōu)勢。刺五加具有益氣健脾、安神、通絡(luò)等功能[1-3]。刺五加多糖是刺五加提取的免疫活性物質(zhì),具有抗腫瘤的功效。本研究探討刺五加多糖對Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制的研究,現(xiàn)匯報如下.

        1 資料與方法

        1.1 試劑與動物 采用C57BL/6模式標(biāo)準(zhǔn)建立Lewis實(shí)體瘤模型小鼠80只,隨機(jī)分為生理鹽水組,ASPS高、中、低濃度組,在灌藥28天后進(jìn)行瘤體稱重。ASPS(購自陜西慈緣生物技術(shù)有限公司) 純度85%;無菌生理鹽水備用;采用ELISA 檢測TNF-α、IL-1β 和 IL-6,試劑盒購自上海普欣生物科技技術(shù)有限公司。C57BL /6 小鼠80只,7-8 周齡,體重(18.4±2.7) g, 購自上海實(shí)驗(yàn)動物中心。Lewis鼠源性肺腺癌細(xì)胞株購自凱學(xué)生物科技(上海)有限公司。

        1.2 方法

        1.2.1 Lewis 實(shí)體型荷瘤小鼠構(gòu)建 Lewis 肺癌細(xì)胞株擴(kuò)大培養(yǎng),對數(shù)期生長Lewis細(xì)胞,稀釋成106 個 /ml 細(xì)胞懸液,接種小鼠右側(cè)腋窩下0. 2 ml 。接種一周后腫瘤平均直徑5mm 造模成功。

        1.2.2 模型動物 80只Lewis 荷瘤小鼠隨機(jī)分成4 組,分為生理鹽水組、ASPS 低劑量50mg /( kg·d)、中劑量100 mg /( kg·d)、高劑量[200 mg /( kg·d) ]。接種 Lewis細(xì)胞后次日開始灌胃,每天觀察小鼠毛色、食欲、活動等。連續(xù)給藥28天后,稱量小鼠體重,剝離腫瘤,分離及提取組織液并采用ELISA 檢測TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平[4]。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS20.0軟件錄入數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析,符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較分析采用t檢驗(yàn),P<0.05判斷差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 ASPS對Lewis荷瘤小鼠腫瘤重量、相關(guān)免疫調(diào)節(jié)因子水平的情況 ASPS較生理鹽水可顯著抑制荷瘤小鼠腫瘤重量,隨著藥物濃度的增大,腫瘤重量也越小,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;ASPS較生理鹽水可顯著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平,隨著藥物濃度的增大,其水平也越高,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。

        3 討論

        刺五加為是一味珍貴的中國傳統(tǒng)中藥,屬于五加科類植物用藥[5]?!侗静菥V目》具有益氣健脾、補(bǔ)腎、通經(jīng)絡(luò)的療效,其主要有效活性成分ASPS具有較為廣泛的抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能、抗氧化等功能,分為水溶性及堿溶性多糖,在抑制腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移方面具有一定的效果。相關(guān)研究也提示[6],ASPS 可激活 NK、巨噬細(xì)胞,調(diào)節(jié)T、B細(xì)胞的功能,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能, 增加荷瘤小鼠巨噬細(xì)胞數(shù)量。而目前關(guān)于ASPS在Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤及免疫功能的相關(guān)研究報答則較少。

        本研究觀察ASPS對Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制的研究。其結(jié)果顯示:ASPS較生理鹽水可顯著抑制荷瘤小鼠腫瘤重量,隨著藥物濃度的增大,腫瘤重量也越小,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;ASPS較生理鹽水可顯著升高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平,隨著藥物濃度的增大,其水平也越高,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。因此,刺五加多糖可顯著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤體大小,提高其免疫功能。本研究發(fā)現(xiàn)ASPS可顯著抑制小鼠瘤體大小,隨著藥物濃度的增大,抑制越大,這可能與其上調(diào) Bax、p53功能,促進(jìn)瘤體細(xì)胞的凋亡,抑制細(xì)胞的增殖。同時也發(fā)現(xiàn),ASPS可顯著提高TNF-α、IL-1β 和 IL-6水平,可增強(qiáng)免疫功能,抑制瘤體細(xì)胞的增殖。TNF-α可直接殺滅腫瘤細(xì)胞,由單核巨噬細(xì)胞分泌,IL-1β、IL-6可調(diào)節(jié)B、T細(xì)胞的增殖,促進(jìn)體內(nèi)殺傷細(xì)胞的分化及增殖[7-8]。

        綜上所述,刺五加多糖可顯著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤體大小,提高其免疫功能,值得臨床研究。

        參考文獻(xiàn)

        [1] 段雪磊,馬奎紅,包永占,等.刺五加免疫調(diào)節(jié)功能的研究進(jìn)展[J].中獸醫(yī)學(xué)雜志,2015(06):72-75.

        [2] 白雪,胡文忠,姜愛麗,等.刺五加主要活性物質(zhì)及其藥理作用的研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2016,37(06):396-399.

        [3] 楊侃侃,邊連全,劉顯軍,等.刺五加多糖的生理功能及在動物生產(chǎn)上的作用[J].中國畜牧獸醫(yī),2013,40(03):237-241.

        [4] 朱振鵬,孫曉先,楊彪.刺五加多糖的生物學(xué)功能及其在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].飼料與畜牧,2013(11):30-33.

        [5] 周麗菁,龍婷婷,周星,等.刺五加多糖對Lewis荷瘤小鼠抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制的研究[J].中國免疫學(xué)雜志,2017,33(06):849-853+858.

        [6] Lei W,Browning JD Jr, Eichen PA, et al. Immuno-stimulatory activity of a polysaccharide-enriched fraction of Sutherlandia-frutescens occurs by the toll-like receptor-4 signaling pathway[J].J Ethnopharmacol,2015,172: 247-253.

        [7] 劉亦洋,饒小勇,王鵬龍,等.天然免疫調(diào)節(jié)活性多糖類成分研究進(jìn)展[J].江西中醫(yī)藥,2018,49(02):75-80.

        [8] 孟繁磊,陳瑞戰(zhàn),魏春雁,等.刺五加葉多糖的分離純化及免疫活性研究[J].特產(chǎn)研究,2011,33(01):12-15.

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