歐 超，黃文成，朱 波，黃玲莎，黃 浩

(廣西醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院檢驗科，南寧 530021)

甲狀腺激素是重要的內(nèi)分泌激素，不但水平低，而且受節(jié)律生活、季節(jié)變化、晝夜更替、睡眠、飲食和應激等各種因素的影響較大，因此對檢測方法和質(zhì)量控制提出了更高的要求。當前較成熟的方法有放射免疫法、酶聯(lián)免疫法、化學發(fā)光法，其中化學發(fā)光法是目前公認的各種激素檢測方法中較精確的方法，其具有敏感度高、線性范圍寬、結(jié)果穩(wěn)定等優(yōu)勢，同時對檢測過程的質(zhì)量控制也提出了更嚴格的要求[1-2]。然而，為了提高工作效率，促凝劑真空采血管普遍應用于臨床，不同品牌真空采血管中的添加劑是否對激素檢測產(chǎn)生影響仍存在爭議[3-4]。因此，本研究分別選取兩種含有不同來源的促凝劑真空采血管，與不帶促凝劑的普通玻璃管進行比較，檢測5項甲狀腺激素指標，分析它們對檢測結(jié)果的影響，并評估其臨床使用的可接受性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取50例志愿者，采集其空腹靜脈血作為研究標本，采用以上3種真空采血管收集血液，每種試管1支。

1.2儀器與試劑 西門子Aptio自動化生化免疫流水線(Aptio-Advia 2400全自動生化免疫分析儀)，嚴格按照儀器操作規(guī)程操作，并按照試劑說明書設(shè)置參數(shù)。檢測前進行常規(guī)校準，并確定高、中、低3種室內(nèi)質(zhì)控水平全部在控。選取3種采血管，A管為不含促凝劑的普通硅化玻璃采血管(由山東威海鴻宇公司提供)；B管為含有促凝劑的真空采血管(由山東威海鴻宇公司提供)；C管為含有硅化內(nèi)壁和促凝劑的塑料真空采血管(由美國BD公司提供)。

1.3方法 所有采集步驟均按美國臨床實驗室標準化協(xié)會有關(guān)標本采集和處理的相關(guān)規(guī)程執(zhí)行：使用同一批號的采血管和采血針，選取肘正中靜脈，在穿刺部位以上7.5～10.0 cm處綁扎壓脈帶，綁扎時間不超過1 min。采血后A管垂直放置，B、C管輕柔充分混勻(混勻次數(shù)按照生產(chǎn)廠商說明書要求)，剔除采血不順利的標本，垂直放置于室溫下30～60 min，肉眼可見析出血清后以3 500 r/min離心10 min，分離血清，觀察所有標本，肉眼未見溶血、黃疸等現(xiàn)象。

1.4檢測項目 為減少流水線中各儀器之間的隨機差異，本研究流水線中指定同一臺化學發(fā)光儀器測定5項甲狀腺激素：促甲狀腺激素(TSH)、總?cè)饧谞钕僭彼?T3)、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、總甲狀腺素(T4)、游離甲狀腺素(FT4)。

2 結(jié) 果

2.13種不同種類真空采血管凝固時間、析出率、分離效果比較 見表1。

表1 室溫情況下3種采血管血液凝固時間及分離效果比較

2.23種真空采血管5項甲狀腺激素指標檢測結(jié)果比較 見表2。

2.33種真空采血管甲狀腺激素指標差異的臨床可接受范圍評價 見表3。對B管與A管，C管與A管，B管與C管相互間5個檢測項目進行比較，對存在統(tǒng)計學差異的項目進行回歸方程計算和臨床可接受范圍評價。

表2 3種真空采血管5項甲狀腺激素指標檢測結(jié)果比較

注：與A管比較，*P<0.05,#P<0.05；與C管比較，△P<0.05

表3 3種真空采血管甲狀腺液素指標差異臨床可接受范圍評價

注：r2<0.95不可接受，不用計算回歸方程；r2>0.95，且回歸方程偏差≤12.5可接受；r2>0.95，回歸方程偏差>12.5不可接受；-表示無數(shù)據(jù)

3 討 論

甲狀腺是人體重要內(nèi)分泌腺體之一[5-6]。全自動流水線化學發(fā)光法檢測甲狀腺激素已得到廣泛應用[7]，如何在提高工作效率的同時獲得準確、可靠的測定結(jié)果是醫(yī)務(wù)、醫(yī)技工作者共同追求的目標[8-10]，而分析前誤差占整個誤差的70%[11]。為減少分析前標本收集整體誤差發(fā)生，合理使用促凝管，本研究對促凝管中不同添加劑對測定結(jié)果的影響進行統(tǒng)計學分析和臨床可接受性評估。

由表1可見，含促凝劑的B、C管無論血液凝固時間、1 h血清析出率還是血清分離效果都明顯優(yōu)于普通硅化玻璃A管，促凝管高效的分離效果有利于急診標本的檢測和大批量自動化分析儀高效檢測的需求，這也是促凝管受到自動化檢測青睞的一個重要原因。由表2可見，不同添加劑在促凝的同時也帶來了一定影響，特別是一些高要求的檢測項目(如甲狀腺激素)：與A管比較，5項指標中，B管有4項(TSH、T3、FT3、FT4)檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，C管有1項(T4)差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，就此結(jié)果而言，C管促凝劑對該方法該項目檢測結(jié)果影響相對較小，鄧勇瑩等[12]也認為真空采血管的內(nèi)壁處理劑會對血清T3產(chǎn)生干擾。兩組含促凝劑的B管與C管之間比較，有4項(TSH、T3、FT3、FT4)檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，原因是不同廠家的促凝劑配方可能不同。促凝劑成分主要分為兩類，一類是生物型，主要成分為凝血活酶和兔腦粉；另一類是無機型，主要成分有高嶺土、石英粉、硅石粉等[13]。配方相同，處理工藝也可能存在差異，建議在選擇促凝管前應該先對促凝劑成分做進一步了解，根據(jù)檢測項目需求確定促凝劑類型。表3進一步說明3種真空采血管間的差異性和臨床可接受性，B廠家TSH、FT3、FT4差異有臨床意義且臨床不可接受；C廠家的T4差異有臨床意義且臨床不可接受。以上結(jié)果表明，在其他檢測條件一致的情況下，促凝劑對甲狀腺激素的部分結(jié)果不但有統(tǒng)計學差異，而且有可能超過臨床可接受范圍。賀松等[14]、毛燕君[15]的研究也表明，不同采血管會影響生殖激素結(jié)果的測定；但與劉興楊[16]采用放射免疫分析技術(shù)的結(jié)果不一致，可見方法學是本評估的重要參考指標之一。另外，少量標本比較分析不具有普遍代表性，仍需后續(xù)更多、更準確的對比試驗，為適應高效準確的檢測方法和手段補充技術(shù)和提供理論依據(jù)。

通過本研究，對采用化學發(fā)光分析技術(shù)測定甲狀腺激素的質(zhì)量控制有了更全面的了解，為選取采血管提供了一定的理論支持，同時說明，雖然促凝管的使用可以節(jié)約血液凝固時間，減少纖維蛋白絲形成，更適合現(xiàn)代高效快速的自動化檢測需求，但促凝管在不同檢測體系，不同檢測方法下，檢測結(jié)果可能有差異，并且有可能超過臨床可接受度。建議實驗室在大批量使用促凝劑前，應充分了解其成分、性質(zhì)，并進行比對試驗，清楚其可能帶來的影響，從而保證檢測結(jié)果的準確性、可靠性。