葉 明 方 燕

(寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院，浙江 寧波 315040)

急性心肌梗死(AMI)為心血管疾病中死亡率不斷增加的主要原因〔1〕。多項(xiàng)研究顯示，AMI后各種嚴(yán)重并發(fā)癥的病理生理學(xué)基礎(chǔ)均在于心室的重構(gòu)，心室重構(gòu)是導(dǎo)致患者心力衰竭及不良預(yù)后的主要原因，而心室重構(gòu)與多種因素有關(guān)〔2,3〕。微小RNA(miRNA)是近年來發(fā)現(xiàn)的一組內(nèi)源性高度保守的非編碼單鏈RNA，其在細(xì)胞核內(nèi)生成，由20～22個(gè)核糖核苷酸所組成，可調(diào)控上游基因的表達(dá)及下游蛋白的翻譯過程〔4〕。目前miRNA已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一，近年學(xué)者研究顯示，miRNA可能與AMI的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)〔5〕。本研究探討老年AMI患者血漿miRNA-423-5p水平與心室重構(gòu)及預(yù)后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2015年3月至2016年1月寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院收治的急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者143例作為AMI組，男86例，女57例，年齡60～86〔平均(68.31±3.72)〕歲。此外，選擇同期在院收治的穩(wěn)定型心絞痛(SAP)患者60例作為對照組，男39例，女21例，年齡60～83〔平均(67.92±5.24)〕歲。經(jīng)比較，兩組受試者性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①AMI患者均符合《急性心肌梗死診斷和治療指南》中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)〔6〕；②AMI患者均在發(fā)病12 h內(nèi)成功接受經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)(PCI)；③患者自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重肝、腎功能障礙、血液疾病、感染、外傷、腦卒中、外傷或其他嚴(yán)重疾病者；②近期應(yīng)用激素患者。

1.3治療及隨訪 AMI患者入院后均按照AMI診療指南給予抗凝、強(qiáng)化降脂、抑制血小板聚集及改善心肌缺血等治療，并給予患者PCI治療。PCI術(shù)后給予患者規(guī)范化阿司匹林、氯吡格雷治療，并繼續(xù)使用他汀類降脂藥物、β受體阻滯劑及血管緊張轉(zhuǎn)換酶抑制劑等?；颊叱鲈汉笸ㄟ^門診、電話等形式隨訪12個(gè)月，記錄AMI患者新發(fā)主要心臟不良事件(MACE)發(fā)生情況，包括死亡、缺血性心絞痛發(fā)作、惡性心律失常、再梗死、急性心力衰竭等。

1.4檢測方法

1.4.1血漿miRNA-423-5p檢測及分組 外周血漿miRNA-423-5p表達(dá)檢測采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(qRT-RCP)進(jìn)行檢測，提取外周血漿中總RNA，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，然后使用qRT-RCP法測定miRNA-423-5p表達(dá)水平。每個(gè)樣本作3個(gè)復(fù)孔，并設(shè)置陰性對照，陰性對照孔采用RNase-H2O代替。選擇U6A+U6B snRNA作為內(nèi)參。采用受試者工作特征(ROC)曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價(jià)值，并計(jì)算最佳閾值，低于最佳閾值者作為低表達(dá)組，高于最佳閾值者作為高表達(dá)組。

1.4.2心室重構(gòu)指標(biāo)檢測 分別于PCI術(shù)后7 d及6個(gè)月后采用美國Philips iE33型彩色多普勒超聲心動圖儀檢測患者心室重構(gòu)相關(guān)指標(biāo)，檢測探頭頻率為1.7～3.4 MHz。檢測指標(biāo)包括左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDd)、左室舒張末期容積(LVEDV)、左室收縮末期容積(LVESV)及左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)，采用ROC曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價(jià)值；相關(guān)性采用Spearman相關(guān)性分析；采用Kaplan-Meier生存曲線分析不同miRNA-423-5p表達(dá)患者無新發(fā)MACE生存情況，終點(diǎn)事件為新發(fā)MACE，組間生存曲線比較采用Log-rank檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1ROC曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價(jià)值 AMI組血漿miRNA-423-5p相對表達(dá)量顯著高于對照組(0.57±0.21 vs 0.31±0.19；t=8.272，P<0.05)。ROC曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價(jià)值，ROC曲線下面積為0.836，見圖1。根據(jù)ROC曲線，血漿miRNA-423-5p最佳閾值為0.39，將miRNA-423-5p相對表達(dá)量≤0.39的AMI患者86例作為低表達(dá)組，將miRNA-423-5p相對表達(dá)量>0.39的AMI患者57例作為高表達(dá)組。

2.2miRNA-423-5p不同表達(dá)AMI患者PCI術(shù)后心室重構(gòu)指標(biāo)比較 PCI術(shù)后7 d不同表達(dá)AMI組患者心室重構(gòu)指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)，術(shù)后6個(gè)月低表達(dá)組AMI患者心室重構(gòu)指標(biāo)與PCI術(shù)后7 d比較無明顯變化(P>0.05)，而高表達(dá)組LVEDd、LVEDV、LVESV水平較PCI術(shù)后7 d顯著升高(P<0.05)，LVEF顯著降低(P<0.05)，且與高表達(dá)組比較，低表達(dá)組LEVEDd、LVEDV、LVESV水平明顯降低、LVEF明顯升高(均P<0.05)。見表1。

圖1 ROC曲線分析血漿miRNA-423-5p對AMI診斷價(jià)值

組別nLVEDd(mm)術(shù)后7 d術(shù)后6個(gè)月LVEDV(ml)術(shù)后7 d術(shù)后6個(gè)月LVESV(ml)術(shù)后7 d術(shù)后6個(gè)月LVEF(%)術(shù)后7 d術(shù)后6個(gè)月低表達(dá)組8650.83±1.2851.02±1.641)121.65±10.94123.18±8.381)55.48±7.8556.17±9.361)48.75±2.2048.12±2.841)t/P值0.847/>0.051.030/>0.050.524/>0.051.626/>0.05高表達(dá)組5751.26±1.9254.01±1.67120.74±7.32134.87±9.6454.63±5.9459.84±6.4848.02±1.9346.24±2.03t/P值10.022/<0.0510.826/<0.055.496/<0.055.893/<0.05

與高表達(dá)組同時(shí)點(diǎn)比較：1)P<0.05

2.3AMI患者miRNA-423-5p水平與心室重構(gòu)指標(biāo)的相關(guān)性 AMI患者血漿miRNA-423-5p水平與LVEDd、LVEDV及LVESV呈顯著正相關(guān)(r=0.417,0.328,0.376,均P<0.05)，與LVEF呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.359,P<0.05)。

2.4血漿miRNA-423-5p不同表達(dá)組AMI患者隨訪無新發(fā)MACE事件生存率比較 低表達(dá)組無新發(fā)MACE事件生存情況顯著優(yōu)于高表達(dá)組(χ2=7.260，P=0.007)，見圖2。

圖2 低表達(dá)組與高表達(dá)組患者無新發(fā)MACE事件生存情況比較

3 討 論

AMI是臨床上常見的一種嚴(yán)重威脅人類健康與生命安全的急癥，患者心肌梗死后左室重構(gòu)對心室功能狀態(tài)及生存預(yù)后有著重要影響，成為目前心血管領(lǐng)域研究中的重要內(nèi)容〔7〕。目前臨床AMI診斷的主要血清生物標(biāo)志物包括肌鈣蛋白、肌紅蛋白及肌酸激酶同工酶等，雖然上述血清生物標(biāo)志物已經(jīng)在AMI的早期診斷敏感性及特異性上達(dá)到一定水平，但研究者對致力于高敏感性及高特異性的新型血清標(biāo)志物，尤其針對能夠有效反映AMI患者預(yù)后的良好血清標(biāo)志物〔8,9〕。數(shù)十年來發(fā)現(xiàn)的非編碼RNA-MicroRNA(miRNA)與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后均有密切的聯(lián)系，miRNA表達(dá)不僅有著良好的組織特異性且其在血液中有著較高的穩(wěn)定性，因此學(xué)者提出可將miRNA作為理想的生物學(xué)指標(biāo)用于AMI的早期診斷、心室重構(gòu)及臨床預(yù)后分析〔10,11〕。

目前國內(nèi)外研究報(bào)道顯示，miRNA-423-5p在急性心力衰竭及AMI患者中均有顯著表達(dá)，與心肌的損傷之間具有密切的聯(lián)系，因此認(rèn)為miRNA-423-5p可能成為AMI診斷及預(yù)后判斷的重要生物學(xué)指標(biāo)〔12,13〕。本研究結(jié)果顯示，AMI患者血漿miRNA-423-5p相對表達(dá)量顯著高于對照組，診斷價(jià)值ROC曲線下面積為0.836。與學(xué)者報(bào)道結(jié)果相似〔14,15〕，提示血漿miRNA-423-5p水平與AMI密切相關(guān)，對AMI臨床診斷具有一定的應(yīng)用價(jià)值，是臨床潛在標(biāo)志物之一。

本研究分析不同AMI患者血漿miRNA-423-5p表達(dá)與治療后心室重構(gòu)之間的關(guān)系，結(jié)果顯示，血漿miRNA-423-5p水平與AMI患者心室重構(gòu)之間具有密切的聯(lián)系，高表達(dá)miRNA-423-5p患者心室重構(gòu)發(fā)生情況較為嚴(yán)重，提示miRNA-423-5p可作為AMI患者PCI術(shù)后心室重構(gòu)預(yù)測的一個(gè)重要生物學(xué)指標(biāo)〔16,17〕。此外，本文分析臨床預(yù)后情況結(jié)果表明miRNA-423-5p表達(dá)與不良心血管事件發(fā)生有一定聯(lián)系。學(xué)者推測循環(huán)miRNA-423-5p可能來源于缺血壞死心肌細(xì)胞的釋放，因此患者外周血miRNA-423-5p表達(dá)越高，提示心肌缺血壞死越嚴(yán)重且心室重構(gòu)進(jìn)展越迅速，從而影響患者臨床預(yù)后〔18～20〕。